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Immunology and Infection

マダラカの精子形成を研究するためのホールマウント蛍光In Situハイブリダイゼーション

Published: May 26th, 2023

DOI:

10.3791/65356

1Department of Life Sciences, Sir Alexander Fleming Building, Imperial College London, 2Department of Entomology, Virginia Tech
* These authors contributed equally

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精子形成は、二倍体細胞が連続的な有糸分裂と減数分裂を経て、その後大きな構造変化を経て一倍体精子を形成する複雑な生物学的プロセスです。生物学的側面に加えて、精子形成の研究は、遺伝子ドライブや合成性比歪曲器などの遺伝技術を理解し、開発するために最も重要であり、メンデル遺伝と精子の性比をそれぞれ変更することにより、害虫の個体数を制御するために使用できます。これらの技術は、実験室で非常に有望であることが証明されており、マラリアの媒介者である ハマダラカ の野生個体群の制御に使用できる可能性があります精巣の解剖学的構造の単純さと医学的重要性により、サハラ以南のアフリカの主要なマラリア媒介者である ガンビエハマダラカは、精子形成を研究するための優れた細胞学的モデルを表しています。このプロトコルはとりわけXおよびY染色体を汚す蛍光プローブを使用して精子形成によってセル核構造の劇的な変更を調査するのに全台紙の蛍 光性を そのままの交配(WFISH)がいかに使用することができるか記述する。FISHは通常、有糸分裂染色体または減数分裂染色体を露出させ、特定のゲノム領域を蛍光プローブで染色するために生殖器官の破壊を必要とします。WFISHは、反復DNA配列を標的とする蛍光プローブからの良好なシグナル検出と相まって、精巣の天然細胞学的構造の保存を可能にします。これにより、研究者は減数分裂を起こしている細胞の染色体挙動の変化を器官の構造に沿って追跡することができ、プロセスの各段階を明確に区別することができます。この手法は、染色体減数分裂のペアリングを研究し、例えば、合成性比歪曲器、ハイブリッド男性不妊症、精子形成に関与する遺伝子のノックアウトに関連する細胞学的表現型を調査するために特に有用である可能性があります。

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