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Abstract

Neuroscience

Messung desO2-Verbrauchs in Drosophila melanogaster mittels coulometrischer Mikrorespirometrie

Published: July 7th, 2023

DOI:

10.3791/65379

1Department of Biology, University of Maryland, College Park, Universities at Shady Grove

* These authors contributed equally

Abstract

Die coulometrische Mikrorespirometrie ist eine einfache, kostengünstige Methode zur Messung desO2-Verbrauchs kleiner Organismen bei gleichzeitiger Aufrechterhaltung eines stabilen Milieus. Ein coulometrisches Mikrorespirometer besteht aus einer luftdichten Kammer, in der O2 verbraucht und das vom Organismus produzierteCO2 durch ein absorbierendes Medium entfernt wird. Der resultierende Druckabfall löst die elektrolytischeO2-Produktion aus, und die Menge an erzeugtemO2 wird gemessen, indem die Menge der Ladung aufgezeichnet wird, die zu ihrer Erzeugung verwendet wurde. In der vorliegenden Studie wurde die Methode an Drosophila melanogaster angepasst, die in kleinen Gruppen getestet wurde, wobei die Empfindlichkeit der Apparatur und die Umgebungsbedingungen für eine hohe Stabilität optimiert wurden. Die Menge anO2, die von Wildtyp-Fliegen in diesem Apparat verbraucht wird, stimmt mit der in früheren Studien gemessenen Menge überein. Der massenspezifischeO2-Verbrauch von CASK-Mutanten, die kleiner sind und von denen bekannt ist, dass sie weniger aktiv sind, unterschied sich nicht von kongenen Kontrollen. Die geringe Größe der CASK-Mutanten führte jedoch zu einer signifikanten Reduzierung desO2-Verbrauchs pro Fliege. Daher ist das Mikrorespirometer in der Lage, denO2-Verbrauch in D. melanogaster zu messen, kann bescheidene Unterschiede zwischen Genotypen unterscheiden und ist ein vielseitiges Werkzeug zur Messung der Stoffwechselraten.

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