Reproduserbarhet og harmonisering i forskning ved hjelp av biologiske standarder: eksemplet på blodplateagonist kollagenrelatert peptid

Justervesenet - vitenskapen om mål - er et emne få biologiske forskere blir undervist om i sin utdanning til skade for dem; Anvendelsen av enkle standardiseringsprosesser i daglig arbeidspraksis gir tillit til data og reproduserbarhet over avstand og tid.

Denne metoden demonstrerer hvordan man standardiserer et kjernelaboratorieeksperiment som brukes mye i hemostaseforskning og klinisk praksis, spesielt måling av respons på blodplatekollagenreseptor (glykoprotein [GP] VI) agonist kollagenrelatert peptid, tverrbundet (CRP-XL) ved lystransmisjonsaggregometri (LTA). Bruk av denne tilnærmingen vil sikre reproduserbarhet i laboratoriet og harmonisering mellom laboratorier, uavhengig av agonistlager eller leverandør. Det er viktig at denne metoden gjelder for andre blodplateagonister og faktisk mange andre biologiske molekyler og bioassay.

Prosessen som er skissert nedenfor innebærer å lage en 6-8-punkts fortynningsserie av 'standard' og 'testen' (materialet du sjekker) og kjøre dem side om side i en valgt analyse (i dette tilfellet LTA). CRP-XL brukes ved masse/volumkonsentrasjoner, men ikke alle materialer gir samme biologiske aktivitet ved en gitt konsentrasjon, så en fortynningsserie er laget for å sammenligne standard- og testmaterialet og bestemme hvilken konsentrasjon som er nødvendig for å gi tilsvarende aktivitet. Fortynningsserien må spenne over 0-100% aggregering. Data plottes ved hjelp av ikke-lineær regresjon, og EF_50-verdien for hver prøve (standard og test) bestemmes. For å tildele aktivitet, del EC_50-verdien av standarden med testen for å bestemme hvor mye mer eller mindre potent den er og juster konsentrasjonen tilsvarende. Denne tilnærmingen vil sikre at den samme biologiske "aktiviteten" blir lagt til analysen gang på gang.