Biyolojik Standartlar Kullanılarak Yapılan Araştırmalarda Tekrarlanabilirlik ve Uyum: Trombosit Agonisti Kollajen İlişkili Peptit Örneği

Metroloji - ölçü bilimi - çok az biyolojik bilim insanının eğitimlerinde kendi zararlarına öğretildiği bir konudur; Basit standardizasyon süreçlerinin günlük çalışma uygulamalarına uygulanması, verilere güven ve mesafe ve zaman içinde tekrarlanabilirlik sağlar.

Bu yöntem, hemostaz araştırmalarında ve klinik uygulamada yaygın olarak kullanılan bir çekirdek laboratuvar deneyinin nasıl standartlaştırılacağını, özellikle trombosit kollajen reseptörüne (glikoprotein [GP]VI) agonist kollajenle ilişkili peptit, çapraz bağlı (CRP-XL) ışık geçirgenlik agregometrisi (LTA) ile yanıtların nasıl standartlaştırılacağını gösterir. Bu yaklaşımın kullanılması, agonist stoğu veya tedarikçisinden bağımsız olarak laboratuvar içi tekrarlanabilirliği ve laboratuvarlar arası uyumu sağlayacaktır. Daha da önemlisi, bu yöntem diğer trombosit agonistlerine ve aslında diğer birçok biyolojik moleküle ve biyo-tahlillere uygulanabilir.

Aşağıda özetlenen işlem, 'standart' ve 'test'in (kontrol ettiğiniz malzeme) 6-8 noktalı bir seyreltme serisinin yapılmasını ve bunların seçilen bir tahlilde (bu durumda LTA) yan yana çalıştırılmasını içerir. CRP-XL, kütle/hacim konsantrasyonlarında kullanılır, ancak her malzeme belirli bir konsantrasyonda aynı biyolojik aktiviteyi vermez, bu nedenle standart ve test malzemesini karşılaştırmak ve eşdeğer aktivite vermek için hangi konsantrasyonun gerekli olduğunu belirlemek için bir seyreltme serisi yapılır. Seyreltme serisi %0-100 agregasyonu kapsamalıdır. Veriler doğrusal olmayan regresyon kullanılarak çizilir ve her numunenin (standart ve test) EC₅₀ değeri belirlenir. Aktivite atamak için, standardın EC₅₀ değerini, ne kadar az ya da çok etkili olduğunu belirlemek için testin değerine bölün ve konsantrasyonu buna göre ayarlayın. Bu yaklaşım, aynı biyolojik 'aktivitenin' teste tekrar tekrar eklenmesini sağlayacaktır.