涙液のバイオシェディング研究におけるアデノ随伴ウイルスベクターの検出のための検証可能な液滴デジタルポリメラーゼ連鎖反応アッセイ

遺伝病を治療するためのウイルスベクターの使用は近年大幅に増加しており、これまでに2,000を超える研究が登録されています。アデノ随伴ウイルス(AAV)ベクターは、ボレチゲンネパルボヴェック−rzylの承認によって例示されるように、眼関連疾患の治療において特に成功を見出した。新しい治療法を市場に投入するために、規制当局は通常、環境へのベクターの放出を評価するために、適格または検証済みのバイオシェディング研究を要求します。ただし、このような脱落研究をサポートするための分子ベースのアッセイの開発に関する公式のガイドラインは、米国食品医薬品局によってリリースされておらず、開発者は自分でベストプラクティスを決定する必要があります。このプロトコルの目的は、臨床バイオシェディング研究をサポートするために、液滴デジタルポリメラーゼ連鎖反応(ddPCR)によるヒト涙液中のAAVベクターを検出するための検証可能なプロトコルを提示することです。この原稿では、分子アッセイバリデーションに対する現在の業界のアプローチについて説明し、この方法がホワイトペーパーで現在提案されているターゲットアッセイの受け入れ基準を超えていることを示しています。最後に、アプリケーションに関係なく、ddPCRアッセイの性能に重要なステップについて説明します。