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Abstract

Biochemistry

अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न मैक्रोफेज से छोटे बाह्य कोशिकीय पुटिकाओं के पेप्टाइड्स की पहचान

Published: June 30th, 2023

DOI:

10.3791/65521

1School of Basic Medical Sciences, Anhui Medical University, 2State Key Laboratory of Proteomics, Beijing Proteome Research Center, National Center for Protein Sciences (Beijing), Beijing Institute of Lifeomics, 3School of Life Sciences, Hebei University

Abstract

छोटे बाह्य कोशिकीय पुटिकाओं (एसईवी) को आमतौर पर मल्टीवेसिकुलर बॉडी (एमवीबी) के एक्सोसाइटोसिस द्वारा स्रावित किया जाता है। <200 एनएम के व्यास वाले ये नैनोवेसिकल्स शरीर के विभिन्न तरल पदार्थों में मौजूद होते हैं। ये एसईवी विभिन्न जैविक प्रक्रियाओं जैसे जीन प्रतिलेखन और अनुवाद, सेल प्रसार और अस्तित्व, प्रतिरक्षा और सूजन को उनके कार्गो, जैसे प्रोटीन, डीएनए, आरएनए और मेटाबोलाइट्स के माध्यम से नियंत्रित करते हैं। वर्तमान में, एसईवी अलगाव के लिए विभिन्न तकनीकों का विकास किया गया है। उनमें से, अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन-आधारित विधि को सोने का मानक माना जाता है और एसईवी अलगाव के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। पेप्टाइड्स स्वाभाविक रूप से लंबाई में 50 से कम अमीनो एसिड के साथ बायोमैक्रोमोलेक्यूल होते हैं। ये पेप्टाइड्स जैविक गतिविधि के साथ विभिन्न जैविक प्रक्रियाओं में भाग लेते हैं, जैसे हार्मोन, न्यूरोट्रांसमीटर और सेल विकास कारक। पेप्टिडोम का उद्देश्य तरल क्रोमैटोग्राफी-टेंडम मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस / एमएस) द्वारा विशिष्ट जैविक नमूनों में अंतर्जात पेप्टाइड्स का व्यवस्थित रूप से विश्लेषण करना है। यहां, हमने अंतर अल्ट्रासेंट्रीफ्यूजेशन द्वारा एसईवी को अलग करने के लिए एक प्रोटोकॉल पेश किया और एलसी-एमएस / एमएस द्वारा पहचान के लिए पेप्टिडोम निकाला। इस विधि ने अस्थि मज्जा-व्युत्पन्न मैक्रोफेज से सैकड़ों एसईवी-व्युत्पन्न पेप्टाइड्स की पहचान की।

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