Identifiering av peptider av små extracellulära vesiklar från makrofager från benmärg

Små extracellulära vesiklar (sEV) utsöndras vanligtvis genom exocytos av multivesikulära kroppar (MVB). Dessa nanovesiklar med en diameter på <200 nm finns i olika kroppsvätskor. Dessa sEV reglerar olika biologiska processer såsom transkription och translation av gener, cellproliferation och överlevnad, immunitet och inflammation genom sina laster, såsom proteiner, DNA, RNA och metaboliter. För närvarande har olika tekniker utvecklats för isolering av elfordon. Bland dem anses den ultracentrifugeringsbaserade metoden vara guldstandarden och används ofta för isolering av elfordon. Peptiderna är naturligt biomakromolekyler med mindre än 50 aminosyror i längd. Dessa peptider deltar i en mängd olika biologiska processer med biologisk aktivitet, såsom hormoner, neurotransmittorer och celltillväxtfaktorer. Peptidomet är avsett att systematiskt analysera endogena peptider i specifika biologiska prover med vätskekromatografi-tandem-masspektrometri (LC-MS/MS). Här introducerade vi ett protokoll för att isolera sEV genom differentiell ultracentrifugering och extraherade peptidom för identifiering med LC-MS/MS. Denna metod identifierade hundratals sEVs-härledda peptider från benmärgshärledda makrofager.