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Abstract

Developmental Biology

ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर थर्ड इनस्टार लार्वा ब्रेन की लाइव-सेल इमेजिंग

Published: June 23rd, 2023

DOI:

10.3791/65538

1Department of Biology, University of Washington

Abstract

ड्रोसोफिला न्यूरल स्टेम सेल (न्यूरोब्लास्ट्स, इसके बाद एनबी) असममित विभाजन से गुजरते हैं, आत्म-नवीनीकृत न्यूरोब्लास्ट को पुनर्जीवित करते हैं, जबकि एक विभेदक गैंग्लियन मदर सेल (जीएमसी) भी बनाते हैं, जो दो न्यूरॉन्स या ग्लिया को जन्म देने के लिए एक अतिरिक्त विभाजन से गुजरेंगे। एनबी में अध्ययन ने सेल ध्रुवीयता, स्पिंडल अभिविन्यास, तंत्रिका स्टेम सेल आत्म-नवीकरण और भेदभाव के अंतर्निहित आणविक तंत्र को उजागर किया है। ये असममित कोशिका विभाजन लाइव-सेल इमेजिंग के माध्यम से आसानी से देखने योग्य होते हैं, जिससे लार्वा एनबी जीवित ऊतक में असममित कोशिका विभाजन की स्थानिक गतिशीलता की जांच के लिए आदर्श रूप से अनुकूल होते हैं। जब पोषक तत्वों के पूरक माध्यम में ठीक से विच्छेदित और चित्रित किया जाता है, तो खोज दिमाग में एनबी 12-20 घंटे के लिए मजबूत रूप से विभाजित होते हैं। पहले वर्णित विधियां तकनीकी रूप से कठिन हैं और क्षेत्र में नए लोगों के लिए चुनौतीपूर्ण हो सकती हैं। यहां, वसा शरीर की खुराक का उपयोग करके लाइव थर्ड-इनस्टार लार्वा मस्तिष्क खोजों की तैयारी, विच्छेदन, माउंटिंग और इमेजिंग के लिए एक प्रोटोकॉल का वर्णन किया गया है। संभावित समस्याओं पर भी चर्चा की जाती है, और उदाहरण प्रदान किए जाते हैं कि इस तकनीक का उपयोग कैसे किया जा सकता है।

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