सीमित पाचन के साथ युग्मित संवर्धन मोती का उपयोग करके मेजबान सेल प्रोटीन विश्लेषण

मेजबान सेल प्रोटीन (एचसीपी) अशुद्धियां हैं जो चिकित्सीय प्रोटीन पर प्रतिकूल प्रभाव डाल सकती हैं, यहां तक कि कम मात्रा में भी। दवा उत्पादों से जुड़े संभावित जोखिमों का मूल्यांकन करने के लिए, कम बहुतायत वाले एचसीपी की पहचान करने के लिए तरीके विकसित किए गए हैं। एक संवेदनशील एचसीपी डिटेक्शन विधि विकसित करने के लिए एक महत्वपूर्ण दृष्टिकोण में एचसीपी को समृद्ध करना शामिल है, साथ ही विश्लेषण से पहले मोनोक्लोनल एंटीबॉडी (एमएबीएस) को हटाना, तरल क्रोमैटोग्राफी-मास स्पेक्ट्रोमेट्री (एलसी-एमएस) का उपयोग करना।

इस प्रोटोकॉल व्यावसायिक रूप से उपलब्ध प्रोटिओम संवर्धन मोती का उपयोग मेजबान सेल प्रोटीन को समृद्ध करने के लिए विस्तृत निर्देश प्रदान करता है. इन मोतियों में विभिन्न प्रोटीनों के लिए विशिष्ट समानता के साथ हेक्सापेप्टाइड लिगैंड की एक विविध लाइब्रेरी होती है। प्रोटोकॉल में नैनो एलसी-एमएस / एमएस का उपयोग करके सीमित पाचन और बाद में पेप्टाइड का पता लगाना भी शामिल है। इन तकनीकों को नियोजित करके, कम बहुतायत वाले एचसीपी को 7000 गुना से अधिक समृद्ध किया जा सकता है, जिसके परिणामस्वरूप 0.002 पीपीएम जितनी कम प्रभावशाली पहचान सीमा होती है। गौरतलब है कि यह प्रोटोकॉल एनआईएसटी एमएबी का उपयोग करके उच्च स्तर के आत्मविश्वास के साथ 850 एचसीपी का पता लगाने में सक्षम बनाता है। इसके अलावा, इसे उपयोगकर्ता के अनुकूल बनाया गया है और इसके कार्यान्वयन में सहायता के लिए एक वीडियो प्रदर्शन शामिल है। इन चरणों का पालन करके, शोधकर्ता एचसीपी को प्रभावी ढंग से समृद्ध और पहचान सकते हैं, जिससे दवा उत्पादों के लिए जोखिम मूल्यांकन की संवेदनशीलता और सटीकता बढ़ जाती है।