Screening analogico del fentanil mediante LC-TIMS-TOF MS/MS

Summary

Un metodo per lo screening degli analoghi del fentanil in base al loro tempo di ritenzione, mobilità e modello di frammentazione della spettrometria di massa.

Abstract

L'uso del fentanil e l'emergere di analoghi del fentanil negli ultimi decenni è diventato una preoccupazione crescente per la comunità in generale. Il fentanil e i suoi analoghi sono i principali responsabili delle overdose fatali e non fatali negli Stati Uniti. I casi più recenti di overdose correlata al fentanil sono collegati al fentanil prodotto illecitamente e alla sua estrema potenza associata. Nel presente lavoro, descriviamo un protocollo analitico ad alto rendimento per lo screening di analoghi del fentanil. L'uso della cromatografia liquida complementare, della spettrometria di mobilità ionica intrappolata e della spettrometria di massa tandem consente la separazione e l'assegnazione di centinaia di analoghi del fentanil da un singolo campione in un'unica scansione. L'approccio descritto sfrutta il recente sviluppo dell'acquisizione dipendente dai dati e dell'acquisizione indipendente dai dati utilizzando l'accumulo parallelo nella trappola della mobilità seguita dalla frammentazione sequenziale utilizzando la dissociazione indotta dalla collisione. Gli analoghi del fentanil vengono assegnati con sicurezza in base al tempo di ritenzione, alla mobilità e al modello di frammentazione della SM.

Introduction

Il fentanil e i suoi analoghi sono i principali responsabili delle overdose fatali e non fatali negli Stati Uniti ^1,2. Il Center for Disease Control and Prevention (CDC) ha riferito che il numero di decessi per overdose correlati agli oppioidi sintetici dal 2013 al 2021 è stato di oltre 258.000. Solo nel 2021, oltre 68.000 decessi per overdose potrebbero essere attribuiti agli oppioidi sintetici, per un totale dell'82% di tutti i decessi correlati all'overdose nella nazione³. Dal 2013 sono stati identificati centinaia di analoghi del fentanil, con poten....

Protocol

1. Preparazione del campione

1. Conservare il kit di screening analogico del fentanil a -20 °C una volta ricevuto. Risospendere ciascun campione a una concentrazione finale di 400 μg/mL mediante l'aggiunta di 500 μL di metanolo puro di grado LC/MS.
2. Impastare con un miscelatore a piastre o un vortex a 400 giri/min per 1 ora o a vortice a velocità media per 15 minuti. Dopo la risospensione, conservare i flaconcini a -20 °C.
3. Diluire ogni stan.......

Discussion

La separazione analitica di campioni biologici ad alto contenuto isomerico può essere difficile dal punto di vista analitico. In questo articolo, il metodo descritto mira a caratterizzare 29 set di isomeri, per un totale di 185 analoghi da un kit standard di 250 oppioidi. Durante la preparazione del gruppo di test, è importante assicurarsi che non ci siano due analoghi con m/z che non possano essere distinti sperimentalmente. I dati qui descritti utilizzano standard non provenienti da .......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Ammonium formate for HPLC	Fluka	17843-50G
Eppendorf Snap-Cap Microcentrifuge Safe-Lock Tubes	Fisher	05-402-25
ESI-L Low Concentration Tuning mix	Agilent	G1969-85000
Fentanyl Analog Screening (FAS) Kit	Cayman Chemical	9003237, 9003286, 9003380, 9003381	kit of 250 snthetic opioids, 210 fentanyl analogs, broken up into one kit and emergent panel versions 1-4
Formic acid Optima LC/MS	Fisher	A117-50
Onyx guard column (5 x 4.6 mm)	Phenomenex	CHO-7649	guard column for C18 columns
Onyx monolithic C18 HPLC column (100 x 4.6 mm)	Phenomenex	CHO-7643	reverse phase C18 LC column
Optima grade acetonitrile	Fisher	A996-4
Optima grade methanol	Fisher	A454-4
Optima grade water	Fisher	W7-4
Pipette	Fisher	05-719-510	kit of 1-10 µL, 10-100 µL, and 100-1000 µL pipette
Pipette tips 10µL	Fisher	94060100
Pipette tips 1000µL	Fisher	94056710
Pipette tips 200µL	Fisher	94060310
Plate mixer	IKA	MS 3 D S1	IKA MS 3 digtital
Prominence LC-20 CE ultrafast liquid chromatograph	Shimadzu, Japan		equiped with DGU-20A5, LC-20AD, SIL-20AC, CTO-20A, SPD-M20A, CBM-20A, SPD-20A
timsTOF Pro	Bruker Daltonics Inc., Billerica, MA		timsTOF instrument with PASEF