تم تمويل هذا العمل من قبل مؤسسة العلوم الطبيعية في مقاطعة تشجيانغ (LY22H020005) ، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81873466).

تمت الموافقة على جميع الإجراءات التي تنطوي على مواضيع حيوانية من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية واستخدام (IACUC) بجامعة ونتشو الطبية (XMSQ2021-0057 ، 19 يوليو 2021). يتم سرد جميع الكواشف والمواد الاستهلاكية في جدول المواد.
1. إعداد وسط الثقافة
<ol><li>10x M199 وسط الاستزرا?...

تبسيط دراسات تكوين الأوعية باستخدام مقايسة سدادة هلام مصفوفة معدلة

<ol>
	<li>Bikfalvi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+and+conceptual+developments+in+vascular+biology+and+angiogenesis+research:+a+personal+view.">History and conceptual developments in vascular biology and angiogenesis research: a personal view.</a> Angiogenesis. 20 (4), 463-478 (2017).</li><li>Carmeliet, P., Jain, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+and+mechanisms+of+vessel+normalization+for+cancer+and+other+angiogenic+diseases.">Principles and mechanisms of vessel normalization for cancer and other angiogenic diseases.</a> Nature reviews Drug discovery. 10 (6), 417-427 (2011).</li><li>De Palma, M., Biziato, D., Petrova, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironmental+regulation+of+tumour+angiogenesis.">Microenvironmental regulation of tumour angiogenesis.</a> Nature reviews Cancer. 17 (8), 457-474 (2017).</li><li>Griffioen, A., Molema, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis:+potentials+for+pharmacologic+intervention+in+the+treatment+of+cancer,+cardiovascular+diseases,+and+chronic+inflammation.">Angiogenesis: potentials for pharmacologic intervention in the treatment of cancer, cardiovascular diseases, and chronic inflammation.</a> Pharmacological reviews. 52 (2), 237-268 (2000).</li><li>Viallard, C., Larriv&#233;e, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+angiogenesis+and+vascular+normalization:+alternative+therapeutic+targets.">Tumor angiogenesis and vascular normalization: alternative therapeutic targets.</a> Angiogenesis. 20 (4), 409-426 (2017).</li><li>Craig, M., Sumanas, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ETS+transcription+factors+in+embryonic+vascular+development.">ETS transcription factors in embryonic vascular development.</a> Angiogenesis. 19 (3), 275-285 (2016).</li><li>Losordo, D., Dimmeler, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+angiogenesis+and+vasculogenesis+for+ischemic+disease.+Part+I:+angiogenic+cytokines.">Therapeutic angiogenesis and vasculogenesis for ischemic disease. Part I: angiogenic cytokines.</a> Circulation. 109 (21), 2487-2491 (2004).</li><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-angiogenesis-new+concept+for+therapy+of+solid+tumors.">Anti-angiogenesis-new concept for therapy of solid tumors.</a> Annals of Surgery. 175 (3), 409-416 (1972).</li><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+in+cancer,+vascular,+rheumatoid+and+other+disease.">Angiogenesis in cancer, vascular, rheumatoid and other disease.</a> Nature Medicine. 1 (1), 27-31 (1995).</li><li>Folkman, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Opinion+-+Angiogenesis:+an+organizing+principle+for+drug+discovery.">Opinion - Angiogenesis: an organizing principle for drug discovery.</a> Nature Reviews Drug Discovery. 6 (4), 273-286 (2007).</li><li>Nowak-Sliwinska, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+guidelines+for+the+use+and+interpretation+of+angiogenesis+assays.">Consensus guidelines for the use and interpretation of angiogenesis assays.</a> Angiogenesis. 21 (3), 425-532 (2018).</li><li>Fan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interleukin-1&#946;+augments+the+angiogenesis+of+endothelial+progenitor+cells+in+an+NF-&#954;B/CXCR7-dependent+manner.">Interleukin-1&#946; augments the angiogenesis of endothelial progenitor cells in an NF-&#954;B/CXCR7-dependent manner.</a> Journal of Cellular and Molecular Medicine. 24 (10), 5605-5614 (2020).</li><li>Dai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nrf2+transcriptional+upregulation+of+IDH2+to+tune+mitochondrial+dynamics+and+rescue+angiogenic+function+of+diabetic+EPCs.">Nrf2 transcriptional upregulation of IDH2 to tune mitochondrial dynamics and rescue angiogenic function of diabetic EPCs.</a> Redox Biology. 56, 102449 (2022).</li><li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Liraglutide+Improves+the+Angiogenic+Capability+of+EPC+and+Promotes+Ischemic+Angiogenesis+in+Mice+under+Diabetic+Conditions+through+an+Nrf2-Dependent+Mechanism.">Liraglutide Improves the Angiogenic Capability of EPC and Promotes Ischemic Angiogenesis in Mice under Diabetic Conditions through an Nrf2-Dependent Mechanism.</a> Cells. 11 (23), 3821 (2022).</li><li>Koh, W., Stratman, A., Sacharidou, A., Davis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+three+dimensional+collagen+matrix+models+of+endothelial+lumen+formation+during+vasculogenesis+and+angiogenesis.">In vitro three dimensional collagen matrix models of endothelial lumen formation during vasculogenesis and angiogenesis.</a> Methods in enzymology. 443, 83-101 (2008).</li><li>Nowak-Sliwinska, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+guidelines+for+the+use+and+interpretation+of+angiogenesis+assays.">Consensus guidelines for the use and interpretation of angiogenesis assays.</a> Angiogenesis. 21 (3), 425-532 (2018).</li><li>Malinda, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+matrigel+migration+and+angiogenesis+assay.">In vivo matrigel migration and angiogenesis assay.</a> Methods in molecular biology (Clifton, NJ). , 287-294 (2009).</li><li>Rezzola, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+and+ex+vivo+retina+angiogenesis+assays.">In vitro and ex vivo retina angiogenesis assays.</a> Angiogenesis. 17 (3), 429-442 (2014).</li><li>Dai, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=FGF21+promotes+ischaemic+angiogenesis+and+endothelial+progenitor+cells+function+under+diabetic+conditions+in+an+AMPK/NAD+-dependent+manner.">FGF21 promotes ischaemic angiogenesis and endothelial progenitor cells function under diabetic conditions in an AMPK/NAD+-dependent manner.</a> Journal of Cellular and Molecular Medicine. 25 (6), 3091-3102 (2021).</li><li>Gavard, J., Gutkind, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF+controls+endothelial-cell+permeability+by+promoting+the+beta-arrestin-dependent+endocytosis+of+VE-cadherin.">VEGF controls endothelial-cell permeability by promoting the beta-arrestin-dependent endocytosis of VE-cadherin.</a> Nature cell biology. 8 (11), 1223-1234 (2006).</li><li>Birdsey, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+endothelial+transcription+factor+ERG+promotes+vascular+stability+and+growth+through+Wnt/&#946;-catenin+signaling.">The endothelial transcription factor ERG promotes vascular stability and growth through Wnt/&#946;-catenin signaling.</a> Developmental Cell. 32 (1), 82-96 (2015).</li><li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Novel+CXCR4+antagonist+enhances+angiogenesis+via+modifying+the+ischaemic+tissue+environment.">A Novel CXCR4 antagonist enhances angiogenesis via modifying the ischaemic tissue environment.</a> Journal of Cellular and Molecular Medicine. 21 (10), 2298-2307 (2017).</li></ol>

نقدم طريقة موثوقة ومريحة للتقييم الكمي لتكوين الأوعية الدموية في الجسم الحي دون تلطيخ. في هذا البروتوكول ، تم خلط الخلايا الوعائية مع هلام المصفوفة في وجود كواشف مؤيدة لتولد الأوعية أو مضادة لتولد الأوعية ، ثم حقنها تحت الجلد في الجزء الخلفي من الفئران Nu / Nu لتشكيل سدادة هلامية (<strong cla...

يلعب تكوين الأوعية ، عملية تكوين الأوعية الجديدة من الأوعية الموجودة مسبقا ، دورا مهما في العديد من العمليات الفسيولوجية والمرضية ، مثل التطور الجنيني ، والتئام الجروح ، وتصلب الشرايين ، وتطور الورم ، وما إلى ذلك 1،2،3،4،5. تتضمن هذه العملية الديناميكية عدة خطوات ، بما في ذلك تدهور المصفوفة ، وتكاثر الخلايا الوعائية ، والهجرة والتنظيم الذاتي لتشكيل هياكل أنبوبية وتثبيت الأوعية الجديدة6. ثبت أن تعزيز تكوين الأوعية أمر بالغ الأهمية في علاج احتشاء عضلة القلب والسكتة الدماغية وأنواع أخرى من الأمراض الإقفارية7 بينما يعتبر تثبيط تكوين الأوعية استراتيجية واعدة في علاج السرطانات8 وأمراض الروماتويد9. يعتبر تكوين الأوعية مبدأ تنظيميا لاكتشاف الأدوية10. وبالتالي ، فإن بناء طريقة موثوقة ومريحة لتقييم مدى تكوين الأوعية أمر بالغ الأهمية للبحث الميكانيكي أو اكتشاف الأدوية في الأمراض التي تعتمد على تولد الأوعية.
تم تطوير العديد من النماذج في المختبر وفي الجسم الحي لتقييم تولد الأوعية11. من بين هذه النماذج ، لا يمكن للنماذج ثنائية الأبعاد (2-D) ، مثل فحص تشكيل أنبوب هلامالمصفوفة 12 ، تشكيل هياكل أنبوبية وظيفية. يمكن للنماذج الحيوانية ، مثل نموذج نقص تروية الطرف الخلفي13،14 ، إعادة إنتاج عملية تكوين الأوعية ولكنها معقدة وتتطلب نظام تصوير تدفق الدم بالليزر البقعي. توفر النماذج ثلاثية الأبعاد لتشكل الأوعية الدموية ، مثل مقايسة سدادة هلام المصفوفة ، منصة بسيطة يمكنها تقليد عملية تكوين الأوعية في الجسم الحي15 ، لكن اكتشاف تكوين الأوعية يتطلب الكيمياء المناعية أو تلطيخ التألق المناعي16،17،18 ، وهي متغيرة وسيئة التصور.
هنا ، نصف بروتوكولا لمقايسة سدادة هلام المصفوفة المعدلة حيث تم خلط خلايا الأوعية الدموية مع هلام المصفوفة وحقنها تحت الجلد في الجزء الخلفي من الفئران لتشكيل سدادة. في السدادة ، تحتاج الخلايا الوعائية إلى تحلل المصفوفة ، والتكاثر ، والهجرة ، والتنظيم الذاتي لتشكيل أوعية وظيفية في النهاية مع تدفق الدم في البيئة الداخلية. بعد ذلك ، يتم حقن ديكستران المسمى بالفلورسنت عبر الوريد الخلفي ، ليتدفق عبر القابس ، ويتم تصور الملصق للإشارة إلى الأوعية الجديدة. يمكن تقييم محتوى تولد الأوعية كميا من خلال طول الأوعية. يمكن أن تشكل هذه الطريقة أوعية وظيفية لا يمكن إنتاجها في نماذج تولد الأوعية ثنائية الأبعاد12 ، ولا تحتاج إلى عملية صبغ معقدة كما هو الحال في مقايسة سدادة هلام المصفوفةالعادية 11. كما أنه لا يتطلب أدوات محددة باهظة الثمن مثل نظام تصوير تدفق الدم بالليزر في نموذج نقص تروية الأطراف الخلفية13،14،19. هذه الطريقة متعددة الاستخدامات ومنخفضة التكلفة وقابلة للقياس الكمي وسهلة الأداء ، ويمكن استخدامها لتحديد القدرة المؤيدة أو المضادة لتولد الأوعية الدموية للأدوية أو استخدامها في الأبحاث الميكانيكية المشاركة في تكوين الأوعية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Adhesion Microscope Slides</td>
			<td>CITOTEST</td>
			<td>188105</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia System</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R640-S1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Counter</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>AMQAX1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell Culture Dish</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430167</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cryoslicer</td>
			<td>Thermo Fisher</td>
			<td>CryoStar NX50</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextrans-FITC-150kDa</td>
			<td>WEIHUA BIO</td>
			<td>WH007N07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dextrans-FITC-4kDa</td>
			<td>WEIHUA BIO</td>
			<td>WH007N0705</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Embedding Cassettes</td>
			<td>CITOTEST</td>
			<td>80203-0007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelial Cell Medium</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td>35809</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Endothelial Growth Supplements</td>
			<td>ScienCell</td>
			<td>1025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>10100147C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibroblast Growth Factor 1</td>
			<td>AtaGenix</td>
			<td>9043p-082318-A01</td>
			<td>FGF1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorescence Microscope</td>
			<td>Nikon</td>
			<td>ECLIPSE Ni</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heating Pad</td>
			<td>Boruida</td>
			<td>30-50-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin Syringe</td>
			<td>BD</td>
			<td>300841</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>RWD</td>
			<td>R510-22-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laboratory&#160;Balance</td>
			<td>Sartorius</td>
			<td>BSA124S-CW</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>356234</td>
			<td>Matrix gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medium 199 powder</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>31100-035</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microtubes</td>
			<td>Axygen</td>
			<td>MCT-150-C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Optimal Cutting Temperature (OCT) Compound</td>
			<td>SUKURA</td>
			<td>4583</td>
			<td>Tissue embedding gel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Palmitate Acid</td>
			<td>KunChuang</td>
			<td>KC001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin-Streptomycin Liquid</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate Buffer Saline</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>P1022</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Instruments</td>
			<td>RWD</td>
			<td>RWD</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tail Vein Injection Instrument</td>
			<td>KEW BASIS</td>
			<td>KW-XXY</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypsin-EDTA Solution</td>
			<td>Solarbio</td>
			<td>T1320</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultra-Low Temperature Freezer</td>
			<td>eppendorf</td>
			<td>U410</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular Endothelial Growth Factor</td>
			<td>CHAMOT</td>
			<td>CM058-5HP</td>
			<td>VEGF</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modified in vivo matrix gel plug assay for angiogenesis studies

تم تطوير العديد من النماذج للتحقيق في تكوين الأوعية الدموية في الجسم الحي. ومع ذلك ، فإن معظم هذه النماذج معقدة ومكلفة ، وتتطلب معدات متخصصة ، أو يصعب تنفيذها للتحليل الكمي اللاحق. نقدم هنا مقايسة سدادة هلام مصفوفة معدلة لتقييم تكوين الأوعية في الجسم الحي. في هذا البروتوكول ، تم خلط الخلايا الوعائية مع هلام المصفوفة في وجود أو عدم وجود كواشف مؤيدة لتولد الأوعية أو مضادة لتولد الأوعية ، ثم حقنها تحت الجلد في الجزء الخلفي من الفئران المتلقية. بعد 7 أيام ، يتم حقن محلول ملحي عازل للفوسفات يحتوي على ديكستران-FITC عبر الوريد الذيلي ويتم تدويره في أوعية لمدة 30 دقيقة. يتم جمع سدادات هلام المصفوفة ودمجها مع هلام تضمين الأنسجة ، ثم يتم قطع أقسام 12 ميكرومتر للكشف عن التألق دون تلطيخ. في هذا الفحص ، يمكن استخدام dextran-FITC ذو الوزن الجزيئي العالي (~ 150000 Da) للإشارة إلى الأوعية الوظيفية للكشف عن طولها ، بينما يمكن استخدام dextran-FITC ذات الوزن الجزيئي المنخفض (~ 4400 Da) للإشارة إلى نفاذية الأوعية الجديدة. في الختام ، يمكن أن يوفر هذا البروتوكول طريقة موثوقة ومريحة للدراسة الكمية لتكوين الأوعية الدموية في الجسم الحي.

Angiogenesis, the process of formation of neo-vessels from pre-existing vessels, plays a critical role in many physiological and pathological processes, such as embryonic development, wound healing, atherosclerosis, tumor development, etc.1,2,3,4,5. This dynamic process involves several steps, including the degradation of the matrix, vascular cell proliferation, migration and self-organization to form tubular structures and the stabilization of the neo-vessels6. Promoting angiogenesis has been demonstrated to be critical in the treatment of myocardial infarction, stroke and other kinds of ischemic diseases7 while inhibiting angiogenesis has been considered a promising strategy in the treatment of cancers8 and rheumatoid diseases9. Angiogenesis has been considered an organizing principle for drug discovery10. Thus, the construction of a reliable and convenient method to assess the extent of angiogenesis is critical for mechanical research or drug discovery in angiogenesis-dependent diseases.
Several in vitro and in vivo models have been developed to evaluate angiogenesis11. Among these, two-dimensional (2-D) models, like matrix gel tube formation assay12, cannot form functional tubular structures. The animal models, such as the hind limb ischemia model13,14, can reproduce the angiogenesis process but are complex and require a laser speckle blood flow imaging system. 3D models of vascular morphogenesis, like matrix gel plug assay, provide a simple platform that can mimic the process of angiogenesis in vivo15, but the detection of angiogenesis requires immunohistochemistry or immunofluorescence staining16,17,18, which are variable and poorly visualized.
Here, we describe a protocol for a modified matrix gel plug assay where vascular cells were mixed with matrix gel and subcutaneously injected into the back of mice to form a plug. In the plug, vascular cells need to degrade the matrix, proliferate, migrate, and self-organize to finally form functional vessels with blood flow in the internal environment. Thereafter, fluorescent-labeled dextran is injected via the tail vein, to flow through the plug, and the label is visualized to indicate neo-vessels. The content of angiogenesis can be quantitatively evaluated by the length of the vessels. This method can form functional vessels that cannot be produced in 2-D angiogenesis models12, and does not need complex stain process as in ordinary matrix gel plug assay11. It also does not require expensive specific instruments like laser speckle blood flow imaging system in hind limb ischemia model13,14,19. This method is versatile, low-cost, quantifiable, and easy to perform, and can be used to determine the pro- or anti-angiogenic capability of drugs or be used in mechanical research involved in angiogenesis.

تسليط الضوء على المؤلف: التحقيق في تكوين الأوعية ونفاذية الأوعية من خلال مقايسة سدادة هلام مصفوفة معدلة

تعديل في الجسم الحي مصفوفة هلام المكونات مقايسة لدراسات تولد الأوعية

Our research deals with angiogenesis, the process of formation of new vessels from preexisting vessels. It plays a critical role in many physiological and pathological processes, such as embryonic development or curing atherosclerosis, tumor development, etc. The construction of a reliable model to evaluate the extent of angiogenesis is critical for myocardial research or the discovery of medicines for angiogenesis-depend diseases.However, most of the existing models are complex, expensive, and require specialized equipment. Here, we present a modified matrix gel plug assay that can be used to investigate angiogenesis and vessel permeability without staining in a simple, more intuitive, as well as efficient manner.

الشكل 1 هو المخطط الانسيابي الذي يوضح كيفية تحضير خليط هلام المصفوفة والخلايا الوعائية ووسط الاستزراع والكاشف. ثم تم حقن الخليط تحت الجلد في الجزء الخلفي من الفئران Nu / Nu وتسخينه باستخدام وسادة تسخين لتسريع تجلط الدم لتشكيل سدادة هلامية في النهاية.
<strong class="xf...

Watch this Scientific Journal Video about Modified In Vivo Matrix Gel Plug Assay for Angiogenesis Studies at JoVE.com

يمكن للطريقة المعروضة هنا تقييم تأثير الكواشف على تكوين الأوعية الدموية أو نفاذية الأوعية الدموية في الجسم الحي دون تلطيخ. تستخدم الطريقة حقن ديكستران-FITC عبر الوريد الخلفي لتصور الأوعية الجديدة أو تسرب الأوعية الدموية.

Several models have been developed to investigate angiogenesis in vivo. However, most of these models are complex and expensive, require specialized ...

يتناول بحثنا تكوين الأوعية الدموية ، وهي عملية تكوين أوعية جديدة من الأوعية الموجودة مسبقا. يلعب دورا مهما في العديد من العمليات الفسيولوجية والمرضية ، مثل التطور الجنيني أو علاج تصلب الشرايين ، وتطور الورم ، وما إلى ذلك. يعد بناء نموذج موثوق به لتقييم مدى تكوين الأوعية أمرا بالغ الأهمية لأبحاث عضلة القلب أو اكتشاف أدوية للأمراض التي تعتمد على تكوين الأوعية.ومع ذلك ، فإن معظم النماذج الحالية معقدة ومكلفة وتتطلب معدات متخصصة. هنا ، نقدم مقايسة سدادة هلام مصفوفة معدلة يمكن استخدامها للتحقيق في تكوين الأوعية ونفاذية الأوعية دون تلطيخ بطريقة بسيطة وأكثر سهولة وكفاءة.

تعديل في الجسم الحي مصفوفة هلام المكونات مقايسة لدراسات تولد الأوعية

Abstract