혈관신생 연구를 위한 수정된 In Vivo Matrix Gel Plug Assay

생체 내 혈관 신생을 조사하기 위해 여러 모델이 개발되었습니다. 그러나 이러한 모델의 대부분은 복잡하고 비용이 많이 들거나 특수 장비가 필요하거나 후속 정량 분석을 위해 수행하기 어렵습니다. 여기서는 생체 내 혈관신생을 평가하기 위해 수정된 매트릭스 겔 플러그 분석을 제시합니다. 이 프로토콜에서, 혈관 세포를 pro-angiogenic 또는 anti-angiogenic 시약의 존재 또는 부재 하에서 매트릭스 겔과 혼합한 후, 수용 마우스의 등에 피하 주사하였다. 7일 후, 덱스트란-FITC를 함유한 인산염 완충 식염수를 꼬리정맥을 통해 주입하여 30분 동안 혈관 내에서 순환시킵니다. 매트릭스 겔 플러그를 채취하여 조직 포매 겔로 포매한 다음 염색 없이 형광 검출을 위해 12μm 절편을 절단합니다. 이 분석에서 고분자량(~150,000Da)의 dextran-FITC는 길이를 검출하기 위한 기능성 용기를 나타내는 데 사용할 수 있으며, 저분자량(~4,400Da)의 dextran-FITC는 신생 혈관의 투과성을 나타내는 데 사용할 수 있습니다. 결론적으로, 이 프로토콜은 생체 내 혈관신생의 정량적 연구를 위한 신뢰할 수 있고 편리한 방법을 제공할 수 있습니다.