Massaggio addominale per migliorare la disfunzione motoria nei ratti con paralisi cerebrale infantile

Summary

Qui, presentiamo una serie di manipolazioni di massaggio nel modello di ratto di paralisi cerebrale che possono migliorare considerevolmente la funzione motoria dei ratti con paralisi cerebrale.

Abstract

La paralisi cerebrale infantile (CP) è una malattia con un alto tasso di disabilità e morbilità. I sintomi clinici della paralisi cerebrale sono la disfunzione motoria e lo sviluppo anormale della postura, spesso accompagnati da deterioramento cognitivo. Il massaggio, una terapia tradizionale della medicina cinese, può coordinare Zang e Fu, regolare il Qi e il sangue, far funzionare i visceri più agevolmente e calmare Yin e Yang. Inoltre, è stato un metodo efficace per la CP in ambito clinico. Questo articolo riassume una serie di manipolazioni semplici e standardizzate del massaggio per giovani ratti con paralisi paralisi cerebrale, che è facile da seguire. La procedura segue: in primo luogo, massaggio di quattro agopunti degli arti, tra cui Quchi (LI11) e Zusanli (ST36); secondo, massaggio dei punti di agopuntura dell'addome Zhongwan (RN12), Tianshu (ST25), Guanyuan (CV4) e Qihai (CV6); e infine, massaggio dell'addome dei ratti. Questo insieme di metodi di massaggio ha migliorato notevolmente la funzione motoria dei giovani ratti con paralisi cerebrale ed è semplice, standardizzato e facile da seguire. Abbiamo adattato questo insieme di metodi di manipolazione in modelli animali per promuovere l'internazionalizzazione e la standardizzazione del massaggio.

Introduction

La paralisi cerebrale infantile (CP) è una malattia con un alto tasso di disabilità e morbilità. L'indagine epidemiologica sulla paralisi cerebrale infantile mostra che 3-5 bambini hanno una paralisi cerebrale ogni 1.000 neonati¹. I sintomi tipici della paralisi cerebrale sono il disturbo persistente dello sviluppo motorio e posturale^{centrale 2}, la limitazione dell'attività sensoriale³, la percezione, la cognizione⁴, la comunicazione⁵, il disturbo comportamentale, l'epilessia e il problema muscoloscheletrico secondario¹. Finora, non esiste una cura per questa malattia invalidante per tutta la vita. Gli attuali metodi di trattamento includono la terapia fisica⁶, l'idroterapia⁷, la stimolazione elettrica funzionale⁸, l'esoscheletro muscolare⁹, la terapia con cellule del sangue del cordone ombelicale¹⁰, l'iniezione di tossina botulinica e la chirurgia¹¹. Tuttavia, la riabilitazione clinica richiede molto tempo e consuma molta energia, e la riabilitazione richiede una cooperazione attiva da parte dei pazienti, il che la rende difficile da replicare nei modelli animali. La chirurgia ha limiti, indicazioni e irreversibilità. I farmaci orali hanno una scarsa efficacia nel trattamento della funzione motoria nei bambini con paralisi cerebrale¹². La terapia dell'esoscheletro muscolare e la terapia del sangue del cordone ombelicale hanno costi economici elevati e sono difficili da permettersi, rendendo fondamentale trovare strategie di trattamento adeguate.

Il massaggio è un metodo di trattamento non invasivo, privo di effetti collaterali, altamente accettato ed economico per i bambini. È stato dimostrato sia negli esperimenti clinici¹³ che in quelli sugli animali¹⁴ di migliorare la disfunzione della CP. La medicina tradizionale cinese ritiene che il massaggio possa migliorare la disfunzione della CP regolando gli organi e sbloccando i meridiani¹⁵. Come metodo di trattamento efficace della MTC, il massaggio richiede moderni metodi di ricerca medica per spiegare il suo meccanismo d'azione per promuoverlo nel mondo. Tuttavia, ci sono limiti oggettivi della ricerca e limiti etici nello studio dei meccanismi rilevanti nei bambini con paralisi cerebrale. Pertanto, è più conveniente studiare i meccanismi di massaggio rilevanti per migliorare la CP negli animali. Sebbene gli animali siano diversi dai bambini, lo studio degli effetti del massaggio sugli animali richiede l'adesione alle teorie fondamentali della MTC. Dal punto di vista della zoologia clinica e sperimentale, replicheremo questa tecnologia dal corpo umano al corpo animale per studiare l'efficacia del massaggio, che aiuterà a promuovere l'applicazione della massoterapia.

In primo luogo, la medicina tradizionale cinese ritiene che la CP appartenga ai sintomi di "cinque tardi" e "cinque mollità"¹⁶. Le cause della CP sono la disfunzione fetale congenita, il deficit epatico e renale, l'insufficiente essenza e qi o la carenza nutrizionale acquisita¹⁵. Il rene domina la crescita, lo sviluppo o la rigenerazione e la riparazione degli organi e dei tessuti umani e queste sostanze sono cruciali per la crescita, lo sviluppo, la riparazione dei tessuti e la resurrezione del corpo. Il Qi essenziale del rene è il fondamento della crescita e dello sviluppo. Un'essenza renale insufficiente può portare a insufficienza del midollo osseo, disturbi del qi e del sangue e mancanza di nutrizione negli organi interni del corpo, nei muscoli e nelle ossa. I bambini con paralisi cerebrale sono soggetti a ritardi nella crescita e nello sviluppo, diminuzione della mobilità articolare degli arti e aumento della tensione muscolare. Inoltre, la malattia a lungo termine può portare a un'eccessiva carenza e stasi del sangue, causando ostruzione dei meridiani, portando a disabilità intellettiva, risposta lenta, disturbi motori, ambiguità del linguaggio, debolezza della deglutizione e sintomi di salivazione, come disturbi del movimento degli arti.

La milza governa la circolazione e la trasformazione, fungendo da fonte di biochimica del qi e del sangue e dalla base dell'abilità acquisita. I meridiani umani che collegano i visceri, le braccia e le gambe sono percorsi che fanno circolare il qi e il sangue, comunicano su e giù e regolano lo yin e lo yang. Massaggiare il meridiano di Ren può migliorare la funzione renale e regolare il qi e il sangue. L'uso di agopunti sul meridiano della milza del piede Tai-Yin, sul meridiano dello stomaco del piede Yang-Ming e sul meridiano dell'intestino crasso della mano Yang-Ming nelle tecniche di massaggio migliora la funzione della milza e dello stomaco, che aiuta a promuovere la circolazione del Qi e del sangue. Il massaggio utilizza meridiani, parti specifiche e punti di agopuntura per fornire una stimolazione fisica benigna al corpo del bambino, provocando cambiamenti reattivi dalla superficie verso l'interno e dall'esterno verso l'interno, migliorando così la circolazione sanguigna locale e generale, ripristinando la normale eccitabilità e l'inibizione del cervello e raggiungendo il corrispondente equilibrio nella funzione sanguigna viscerale e tissutale. Secondo questa teoria, utilizziamo principalmente il massaggio sui punti di agopuntura come l'addome, Zhongwan (RN12), Tianshu (ST25), Guanyuan (CV4) e Qihai (CV6). Il massaggio addominale può migliorare i sintomi clinici dei bambini con CP^17,18,19 ed è altamente probabile che promuova la riparazione delle lesioni cerebrali attraverso il percorso cervello-intestino²⁰. Poiché la milza e lo stomaco sono la base dello sviluppo postnatale, possono promuovere il recupero delle lesioni cerebrali rafforzando la milza, avvantaggiando lo stomaco e reintegrando il qi e il sangue.

Abbiamo replicato questa tecnica sui ratti per simulare il più possibile l'intervento della MTC sulla CP e abbiamo scoperto che il massaggio addominale può migliorare la disfunzione dei ratti CP. In sintesi, presentiamo una serie di metodi per lo studio del massaggio addominale per indagare i meccanismi rilevanti per migliorare la CP attraverso il massaggio addominale. Poiché l'esistenza di molti generi di massaggio rende molto difficile lo studio dei meccanismi di massaggio, è necessario standardizzare i metodi di massaggio.

Protocol

Il Comitato Etico Animale dell'Ospedale Jinshan, affiliato alla Fudan University di Shanghai, ha approvato questo studio. I giovani ratti Sprague Dawley (SD) sono stati allevati in una stanza per animali SPF con luce dalle 08:00 alle 20:00, buio dalle 20:00 alle 08:00, temperatura controllata a 22 °C e umidità relativa interna del 40%-50%. Avevano libero accesso a cibo e acqua. Tutte le operazioni sperimentali sugli animali sono conformi all'etica del benessere degli animali da esperimento e alle norme di sicurezza per gli esperimenti sugli animali.

1. Modello animale di encefalopatia ipossico-ischemica neonatale ²¹

1. Dividi in modo casuale 18 cuccioli maschi di ratto Sprague Dawley (SD), 7 giorni dopo la nascita (P7), nei seguenti gruppi: sham (senza massaggio), modello e Massaggio (modello + gruppo di massaggio) (n = 6 per ogni gruppo).
2. Anestesia
   1. Utilizzare una macchina per anestesia con gas per piccoli animali per somministrare il gas sevoflurano al 5%, regolare la portata dell'ossigeno a 4 e utilizzare una frazione di induzione del 4% per anestetizzare i ratti giovani. Verificare che l'animale sia completamente anestetizzato aspettando il momento in cui il giovane ratto è sdraiato sulla schiena, i suoi arti smettono di muoversi, non c'è risposta quando viene toccato e i suoi muscoli si rilassano.
   2. Aggiungi unguento per gli occhi e colliri agli anestetizzati, giovani ratti per prevenire la secchezza oculare.
3. Processo chirurgico microscopico
   1. Innanzitutto, disinfettare una volta la pelle del collo dei ratti con iodoforo, quindi una volta con etanolo al 75% (eseguire questa procedura tre volte) e praticare un'incisione longitudinale lunga ~ 0,5 cm al centro del collo dei giovani ratti. Separare passivamente il tessuto sottocutaneo destro ed esporre l'arteria carotide comune.
   2. Modelli e gruppi di massaggio: separare accuratamente l'arteria carotide comune e il nervo vago (Figura 1A). Dopo aver diviso l'arteria carotide comune, coagulare l'arteria carotide comune con una pistola elettrica per coagulazione. Dopo aver confermato l'assenza di sanguinamento, suturare la pelle strato per strato e disinfettare nuovamente l'incisione chirurgica (Figura 1C).
   3. Gruppo fittizio (senza CP, senza massaggio): separare solo l'arteria carotide comune senza alcun trattamento dei vasi sanguigni. Suturare la pelle strato per strato e disinfettare nuovamente l'incisione chirurgica. Quando osservi il gattonare senza restrizioni del giovane ratto, rimetti il giovane ratto accanto alla madre ratto.
4. Disinfettare con iodio dopo l'intervento chirurgico. Posizionare i ratti che hanno completato l'intervento chirurgico su un cuscinetto isolante a 37 °C e osservare costantemente se la ferita sanguina e se c'è infiammazione negli occhi.
5. Posizionare il modello e massaggiare i gruppi di giovani ratti in una camera di ipossia aperta e osservare per 1 ora fino al loro risveglio.
   NOTA: Quando i ratti giovani possono gattonare liberamente, sono pronti per sottoporsi al trattamento dell'ipossia.
6. Trattamento dell'ipossia
   1. Dopo che si sono ripresi dall'anestesia, porre i giovani ratti in un dispositivo anossico chiuso a 37 °C con condizioni di gas al 92% di N 2 e all'8% di O 2 (₂ L/min) per 3 ore di ipossia. Dopo il trattamento ipossico, rimetti il ratto sveglio accanto alla madre ratto.
   2. Disinfettare gli strumenti chirurgici e pulire la camera ipossica con alcool. Dopo l'intervento chirurgico, disinfettare il giovane ratto con iodoforo, monitorare quotidianamente la ferita per segni di infezione e utilizzare un'imbottitura sterile. Completare l'intero processo chirurgico nella stanza degli animali SPF e tenere gli animali nella stanza degli animali SPF.
   3. Sollevare il gruppo di modelli normalmente dopo l'istituzione del modello senza alcuna misura di intervento. Sottoporre il gruppo di massaggio ad un intervento manuale dopo il completamento della modellazione.
      NOTA: Il gruppo fittizio è stato nutrito normalmente e non è stato sottoposto a trattamento per l'ipossia.
7. Posiziona ogni gruppo di ratti accanto ai ratti madri su lettiera sterile e sterilizzata ad alta temperatura. Osservateli per 1-2 ore fino a quando le madri ratti non nutrono la prole. Osservateli ogni giorno per verificare se la ferita sanguina e se c'è infiammazione agli occhi; Osservare fino a quando la ferita non è completamente guarita.

2. Parametri della tecnica di massaggio

NOTA: Le tecniche principali del massaggio includono la pressione e lo sfregamento come tecniche di intervento primarie. Prima dell'esperimento, i ricercatori si sono basati sul funzionamento di un tester di tecniche che ha raccolto le tecniche dell'esperto di massaggio addominale di Tianjin Wang Jingui.

1. Impostare le forze di pressione e sfregamento a 6 N e 3 N, rispettivamente 22,23,24,25.

3. Manipolazione del massaggio

NOTA: Assicurarsi che la pressione del pollice del ricercatore sui punti di agopuntura sia stabile e duratura.

1. Il secondo giorno dopo l'operazione (P8), togliere i ratti giovani dalla gabbia senza disturbare i ratti materni. Nel gruppo di massaggio, massaggia i ratti dall'8^° giorno di nascita al 40^° giorno.
2. Prima di massaggiare i ratti giovani, strofina leggermente le mani per riscaldarle quasi alla stessa temperatura della pelle dei ratti giovani.
3. Segui questa sequenza di Massaggio: agopunti degli arti → agopunti dell'addome → addome.
4. Metti il giovane ratto nel palmo della mano sinistra e tocca delicatamente il dorso del giovane ratto dalla testa alla coda con la superficie del filo di quattro dita per 1 minuto per renderlo tranquillo.
5. Eseguire i seguenti passaggi di sfregamento.
   1. Strofina l'addome del pollice e dell'indice destro avanti e indietro.
   2. Strofinare l'arto anteriore, dall'estremità prossimale all'estremità distale per ~30 s. Premere Quchi (LI11), Waiguan (SJ5) e Hegu (LI4) punti 10 volte per 1 s ogni volta.
   3. Strofinare le zampe posteriori, dall'estremità prossimale all'estremità distale per ~30 s, e premere i punti Yanglingquan (SP9), Zusanli (ST36), Sanyinjiao (SP6) e Taichong (LR3) 10 volte per 1 s ogni volta per un periodo totale di ~5 min.
6. Usa il pollice destro per premere Zhongwan (RN12), Tianshu (ST25), Guanyuan (CV4) e Qihai (CV6). Premere ogni agopunto 10 volte, ogni volta per ~1 s, per una durata di 1 min.
7. Tieni il giovane ratto prono e premi e strofina la punta Zhongwan sull'addome con il pollice destro. Prendi l'ombelico del giovane ratto come centro e usa il pollice per muoverti in senso orario 120x/min per ~5 min.
8. Infine, usa la superficie del filo delle quattro dita della mano destra per toccare delicatamente la testa del giovane ratto con la sua coda, renderlo silenzioso, quindi rimetterlo nella gabbia e lasciare che la mamma ratto gli dia da mangiare.

4. Localizzazione dei punti di agopuntura

NOTA: Per i ratti nati entro 2 settimane, il peso e la lunghezza dei ratti sono uguali a quelli dei topi. Pertanto, abbiamo utilizzato metodi di massaggio del topo nella letteratura pertinente per massaggiare i ratti durante gli 8-15 giorni dei ratti²⁴.

1. Da due settimane a 40 giorni dopo, trattare i ratti con un regolare massaggio per ratti utilizzando i seguenti agopunti: LI11, SJ5, LI4, SP9, ST36, SP6, LR3, RN12, ST25, CV4 e CV6²⁶.
   NOTA: Vedere la Tabella 1 e le descrizioni dettagliate della localizzazione dei punti di agopuntura del ratto altrove²⁶ e la Figura 2 per le posizioni specifiche dei punti di agopuntura.

5. Test di peso e comportamentali

1. Pesare i ratti giovani ogni giorno da P7 a P40.
2. Condurre esperimenti comportamentali sulla trave di equilibrio da P37 a P40. Testare la funzione di equilibrio motorio dei ratti giovani utilizzando una trave di equilibrio (35 cm di lunghezza, 1,5 cm di larghezza e 100 cm di altezza).
   1. Posiziona il giovane ratto sulla trave dell'equilibrio e lascialo scorrere nella scatola nera posta all'altra estremità dell'equilibrio.
   2. Condurre l'allenamento con la trave di equilibrio per i giovani ratti su P37-P39, 3 volte al giorno, e condurre un test su P40. Registrare il tempo in cui i tre gruppi di giovani ratti superano la trave di equilibrio e il numero di volte in cui i loro arti posteriori scivolano (Figura 1D).
      NOTA: Utilizzare il metodo di soffocamento con anidride carbonica per sopprimere i ratti.

Discussion

Il modello neonatale di ratto di ischemia e ipossia è il modello più classico per lo studio della paralisi cerebrale 27,28,29,30. Siamo intervenuti sui ratti dall'8° al 40^° giorno, che equivale approssimativamente a interferire negli esseri umani dai 3 mesi agli 11,5 anni, il periodo d'oro per la crescita e lo sviluppo umano³¹. I risultati indicano che il massaggio è un metodo efficace per migliorare la disfunzione CP. Precedenti esperimenti sugli animali hanno dimostrato che il massaggio può ridurre l'infiammazione e migliorare le funzioni motorie e cognitive nei ratti giovani con CP^14,32. Alcuni studi clinici hanno dimostrato che il massaggio dei meridiani della schiena e della vescica migliora la funzione motoria nei bambini con CP³³. Questi risultati mostrano anche che il massaggio può accorciare il tempo per i giovani ratti con CP di passare sopra la trave di equilibrio e ridurre il numero di scivolamenti delle zampe posteriori. Pertanto, si può vedere che il massaggio addominale può migliorare la funzione motoria dei giovani ratti con paralisi paralisi.

La medicina tradizionale cinese ritiene che la CP appartenga ai cinque sintomi ritardati e ai cinque sintomi lievi, con il deficit congenito del qi renale come fattore fondamentale e la debolezza acquisita della milza e dello stomaco come fattore promotore. Il rene governa l'osso e genera il midollo, in modo che quando il rene è pieno di qi, il midollo diventa abbondante e l'intelligenza rimane normale. La milza controlla i muscoli e gli arti, quindi se la milza è sana, i muscoli saranno forti e le articolazioni si muoveranno liberamente. Pertanto, è necessario ricostituire la milza e rafforzare i reni, migliorare la funzione gastrointestinale, muovere arti e articolazioni e migliorare la funzione. In primo luogo, la teoria della MTC sostiene che l'addome è la radice di tutte le malattie. Il massaggio addominale può schiarire su e giù, separare yin e yang, rimuovere il vecchio e crearne di nuovi, arricchire i cinque organi interni, scacciare il male esterno ed eliminare le malattie interne. In secondo luogo, la ricerca ha dimostrato che i bambini con paralisi cerebrale hanno un peso corporeo inferiore e sono inclini alla malnutrizione, compresa l'assunzione eccessiva o sbilanciata, l'energia o lo stato nutrizionale^34,35,36,37. Il ritardo della crescita e la malnutrizione sono comuni nei bambini con paralisi cerebrale e sono direttamente correlati a una disfunzione motoria più grave³⁷. Il rischio di malnutrizione è strettamente correlato alla prognosi dei pazienti con CP^34,38,39. Al giorno d'oggi, la principale area di ricerca del massaggio addominale è quella di migliorare i sintomi gastrointestinali come la dispepsia funzionale, la stitichezza, la diarrea e l'anoressia infantile 33,40,41,42. Infine, numerosi studi dimostrano che la stimolazione di Zhongwan, Tianshu, Guanyuan e Qihai può trattare le malattie gastrointestinali, promuovere l'assorbimento e migliorare lo stato nutrizionale^43,44,45. I punti addominali possono trattare le malattie gastrointestinali, pettinare il meccanismo del qi dell'energizzatore centrale, ricostituire il potere del qi primario e promuovere la biochimica del qi e del sangue. Pertanto, abbiamo introdotto il massaggio addominale nel metodo sperimentale per migliorare la disfunzione motoria nei ratti giovani con paralisi paralipiati.

Il massaggio addominale è principalmente combinato con i punti addominali, integrati da punti degli arti, come Quchi e Zusanli. I collaterali esterni e le articolazioni dei quattro agopunti degli arti sono collegati agli organi interni e il massaggio addominale viene utilizzato per ottenere il miglior effetto terapeutico. Da un lato, gli studi sperimentali sugli animali mostrano che l'agopuntura Zusanli di ratti neonati con CP ipossico-ischemico potrebbe migliorare la funzione dei giovani ratti con CP⁴⁶. D'altra parte, la ricerca clinica mostra che l'agopuntura a Hegu 47 e altri agopunti può migliorare efficacemente lo sviluppo della CP. Quchi e Zusanli sono i punti di agopuntura nell'intestino crasso Yang-Ming del meridiano^{della mano 48} e del meridiano Foot-Yang-Ming sulla somatostatina⁴⁹, che sono i punti di agopuntura più comunemente usati nel trattamento clinico dell'ictus in Cina per migliorare la paralisi degli arti^{50, 51}. Inoltre, Quchi e Zusanli sono rispettivamente i punti di confluenza dei meridiani dell'intestino crasso e dello stomaco. Da questo punto, il qi meridiano raggiunge i visceri ed è collegato alle parti superiore e inferiore e ai meridiani e collaterali. Inoltre, l'agopuntura e la moxibustione più il massaggio hanno mostrato un effetto migliore sul miglioramento dei bambini con paralisi cerebrale nei risultati della ricerca clinica⁵². Per riassumere, la terapia della MTC può aiutare a migliorare la disfunzione dei pazienti con paralisi cerebrale.

Sebbene ci siano stati molti studi su come il massaggio possa migliorare la CP, la diversità delle tecniche di massaggio è diventata una sfida enorme. Ci sono molte scuole di massaggio e le differenze di forza, direzione e altri fattori pongono numerose sfide. Abbiamo imparato una varietà di metodi di massaggio ed esplorato una serie di tecniche di massaggio semplici e facili. Tuttavia, non possiamo simulare una varietà di tecniche di massaggio. In secondo luogo, il momento del massaggio è una fase importante nello sviluppo dei giovani ratti. Il suo peso e la rapida crescita di vari sistemi corporei portano al costante cambiamento della forza delle nostre dita per i ratti in diverse fasi. Gli sforzi devono essere continuati per studiare la stabilità del massaggio.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Animal anesthesia machine	RWD OF SCIENCE	R550
Experimental gloves	Sri Trang Gloves (Thailand) Co.,Ltd	0169
Isoflurane	RWD OF SCIENCE	R510-22-10
Rat	Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd.
YF-3 manipulation tester	Developed jointly by Shanghai Fudan University and Shanghai University of Traditional Chinese Medicine		Patent number of the People's Republic of China (ZL200710187403.1)