A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Abstract
Biochemistry
Det fibrinolytiske enzymet fra Sipunculus nudus (sFE) er et nytt fibrinolytisk middel som både kan aktivere plasminogen til plasmin og nedbryte fibrin direkte, og viser store fordeler i forhold til tradisjonelle trombolytiske midler. På grunn av mangel på strukturell informasjon er imidlertid alle renseprogrammene for sFE basert på flertrinns kromatografirensinger, som er for kompliserte og kostbare. Her utvikles en affinitetsrensingsprotokoll for sFE for første gang basert på en krystallstruktur av sFE; Det inkluderer fremstilling av råprøven og lysin/arginin-agarose-matriseaffinitetskromatografikolonnen, affinitetsrensing og karakterisering av den rensede sFE. Etter denne protokollen kan en gruppe sFE renses innen 1 dag. Videre øker renheten og aktiviteten til den rensede sFE til henholdsvis 92% og 19,200 U / ml. Dermed er dette en enkel, billig og effektiv tilnærming for sFE-rensing. Utviklingen av denne protokollen er av stor betydning for videre bruk av sFE og andre lignende midler.
Explore More Videos
ABOUT JoVE
Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved