Affiniteitszuivering van een fibrinolytisch enzym van Sipunculus nudus

Het fibrinolytische enzym van Sipunculus nudus (sFE) is een nieuw fibrinolytisch middel dat zowel plasminogeen tot plasmine kan activeren als fibrine direct kan afbreken, wat grote voordelen biedt ten opzichte van traditionele trombolytische middelen. Vanwege het gebrek aan structurele informatie zijn alle zuiveringsprogramma's voor sFE echter gebaseerd op meerstapschromatografiezuiveringen, die te ingewikkeld en duur zijn. Hier wordt voor het eerst een affiniteitszuiveringsprotocol van sFE ontwikkeld op basis van een kristalstructuur van sFE; het omvat de bereiding van het ruwe monster en de lysine/arginine-agarose matrix affiniteitschromatografiekolom, affiniteitszuivering en karakterisering van de gezuiverde sFE. Volgens dit protocol kan een partij sFE binnen 1 dag worden gezuiverd. Bovendien neemt de zuiverheid en activiteit van de gezuiverde sFE toe tot respectievelijk 92% en 19.200 U/ml. Dit is dus een eenvoudige, goedkope en efficiënte aanpak voor sFE-zuivering. De ontwikkeling van dit protocol is van groot belang voor het verdere gebruik van sFE en andere soortgelijke middelen.