שיפור האמינות הביו-בנקאית של גידול הערמונית באמצעות טכניקת דגימה משופרת ואפיון היסטולוגי

Summary

פרוטוקול זה מתאר שיטה להקל על איסוף דגימות מדגימות כריתת ערמונית רדיקלית. המטרה היא למפות, לאפיין ולנתח במיקרו-מאקרו דגימות רקמה מהדגימות על סמך קריטריונים אנטומופתולוגיים לפני אחסונן בביובנק.

Abstract

רכישת דגימות רקמת גידול טריות ומאופיינות היטב היא קריטית לביצוע מחקרי "אומיקס" איכותיים. עם זאת, זה יכול להיות מאתגר במיוחד בהקשר של סרטן הערמונית (PC) בשל האופי הייחודי של איבר זה ואת ההטרוגניות הגבוהה הקשורים גידול זה. מצד שני, אפיון היסטופתולוגי של דגימות לפני אחסונן מבלי לגרום לשינויים משמעותיים ברקמה הוא גם אתגר מסקרן. במסגרת זו אנו מציגים שיטה חדשה לרכישה, מיפוי, אפיון וניתוח מיקרו של רקמת ערמונית מנותחת על פי קריטריונים אנטומופתולוגיים.

בניגוד לפרוטוקולים שפורסמו בעבר, שיטה זו מפחיתה את הזמן הדרוש לניתוח היסטופתולוגי של דגימת הערמונית מבלי לפגוע במבנה שלה, שהוא קריטי להערכת שולי הניתוח. יתר על כן, הוא מאפשר תיחום ודיסקציה מיקרו-מאקרו של דגימות רקמת ערמונית טריות, תוך התמקדות באזורים גידוליים היסטולוגיים המוגדרים על ידי קריטריונים פתולוגיים כגון ציון גליסון, נגעים מקדימים (neoplasia intraepithelial intraepithelial בדרגה גבוהה - PIN), ונגעים דלקתיים (prostatitis). דגימות אלה מאוחסנות לאחר מכן בביובנק לצורך ניתוחי מחקר עוקבים.

Introduction

סרטן הערמונית (PC) הוא הסרטן^השני בשכיחותו בקרב גברים וגורם המוות המוביל^החמישי בעולם¹. הטיפול והפרוגנוזה של המטופל תלויים בבימוי ובדירוג (ציון גליסון) של הגידול, כפי שמעידים שיעורי ההישרדות הגבוהים יותר של 5 שנים של גידולים מקומיים ונמוכים (דירוג גליסון 6) (99%) בהשוואה לציוני גליסון גבוהים וגידולים גרורתיים (31%)².

הישנות מקומית של PC וכישלון טיפול נקשרו להטרוגניות הגנטית הגבוהה האופיינית של גידול זה מסוג³. בנוסף, PC נחשבת למחלה מולטיפוקלית עם מספר מוקדי גידול בעלי מאפיינים מורפולוגיים, היסטולוגיים ומולקולריים שונים⁴, אשר עש....

Protocol

שיטה זו פותחה באמצעות מאמצים משותפים הכוללים שירותים קליניים שונים (אורולוגיה, פתולוגיה וביובנק בית החולים לה פה). המחקר נערך בהתאם להנחיות מוסדיות, לאומיות ובינלאומיות לרווחת האדם, והוא קיבל אישור מוועדת האתיקה למחקר ביו-רפואי בבית החולים לחקירת סניטריה Universitario y Politécnico La Fe (ולנסיה, ספרד)........

Discussion

בכל מחקר, השגת דגימות איכותיות היא דרישה חיונית להפחתת הטיות שיטתיות ולהשגת תוצאות אמינות²². לכן, יש לקחת בחשבון בקרה על משתנים פרה-אנליטיים כגון הטמפרטורה שבה הדגימות מעובדות ומאוחסנות, הזמן שחלף מאיסוף הדגימות ועד לאחסון, השימוש בחומרים מעוקרים או ההשפעות שיכולות להיות להו?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Cadiere forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471049. 18 uses.
Conventional slides	Knittel Glass	2021	Ground/ Frosted end
Cryostat microtome	Thermo Fisher Scientific	---	Criostato CryoStar NX50
Cryotubes	Greiner Bio-One GmbH	Ref.: 122280.	CRYO S. PP, with screw cap, sterile.
Da Vinci surgical system	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	XI model
Dissection instruments	Bayer	---	Two tweezers and a surgical blade
DPX Eukitt	Medizin- und Labortechnik GmbH	6.00.01.0001.06.01.01
Eosin	Agilent	157252
Fenestrated bipolar forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471205. 14 lives.
Force bipolar	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471405. 12 uses.
Freezers	Thermo Scientific		MODEL 907. -80 ºC
Hematoxylin	Agilent	157251
Inmunohistochemistry Slides	Agilent-Dako	K802021-2
Large needle driver	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471006. 15 uses.
Maryland bipolar forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471172. 14 uses.
Microscope	Olympus	---	Olympus cx40
Microtome blades	PFM Medical	a35
Monopolar curved scissors	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 470179. 10 uses.
OCT compound	NEG-50	LOT.117340
PlusSpeed S Single-use Biopsy Device with beveled tip	Peter Pflugbeil GmbH	PSS-1825-S
ProGasp forceps	Intuitive	PN1052082-US 10/2021	Part number: 471093. 18 uses.
Sample holder Disc	Davidson Cryo Chuck. BradleyProducts		30 mm
Tissue ink	Pelikan	2021	Ink 4001 brilliant black (301168)
Xylol	Quimipur	Ref. 169