A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Мышиная модель индикатора действия гормонов щитовидной железы была разработана для того, чтобы обеспечить тканеспецифическую количественную оценку локального действия гормонов щитовидной железы с использованием их эндогенного регуляторного механизма. Недавно было показано, что модель пригодна для характеристики химических веществ, разрушающих эндокринную систему, взаимодействующих с экономикой гормонов щитовидной железы, как по методам ex vivo , так и in vivo .
Гормоны щитовидной железы (ТГ) играют важнейшую роль в клеточном метаболизме и функции тканей. Экономика ТГ восприимчива к химическим веществам, разрушающим эндокринную систему (EDC), которые могут нарушить выработку или действие гормонов. Многие загрязнители окружающей среды являются EDC, представляя собой новую угрозу как для здоровья человека, так и для сельскохозяйственного производства. Это привело к увеличению спроса на надлежащие тестовые системы для изучения эффектов потенциальных EDC. Однако нынешние методологии сталкиваются с проблемами. В большинстве тест-систем используются эндогенные маркеры, регулируемые множественными, часто сложными регуляторными процессами, что затрудняет различение прямых и косвенных эффектов. Кроме того, тест-системы in vitro не обладают физиологической сложностью метаболизма и фармакокинетики EDC у млекопитающих. Кроме того, воздействие EDC окружающей среды обычно включает в себя смесь нескольких соединений, в том числе метаболитов, генерируемых in vivo , поэтому нельзя игнорировать возможность взаимодействий. Эта сложность затрудняет определение характеристик EDC. Мышь с индикатором действия гормонов щитовидной железы (THAI) представляет собой трансгенную модель, которая несет TH-чувствительную репортерную систему люциферазы, позволяющую оценить тканеспецифическое действие TH. Можно оценить тканеспецифическое влияние химических веществ на локальное действие ТГ путем количественной оценки экспрессии репортерной люциферазы в образцах тканей. Кроме того, с помощью визуализации in vivo модель мышей THAI позволяет проводить лонгитюдные исследования влияния потенциальных EDC на живых животных. Этот подход является мощным инструментом для тестирования длительного воздействия, сложных структур лечения или отмены, поскольку он позволяет оценить изменения местного действия ТГ с течением времени у одного и того же животного. В этом отчете описывается процесс визуализации in vivo на тайских мышах. Протокол, обсуждаемый здесь, фокусируется на разработке и визуализации мышей с гипер- и гипотиреозом, которые могут служить контрольными. Исследователи могут адаптировать или расширить представленные методы лечения в соответствии со своими конкретными потребностями, предлагая основополагающий подход для дальнейших исследований.
Передача сигналов гормонов щитовидной железы (ТГ) является фундаментальным регулятором клеточного метаболизма, необходимым для нормального развития и оптимального функционирования тканей во взрослом возрасте1. В тканях действие ТГ точно контролируется сложным молекулярным механизмом, позволяющим поддерживать локальные уровни ТГ в тканеспецифичных слоях. Эта автономия различных тканей от циркулирующих уровней ТГ имеет большое значение 2,3,4.
Многочисленные химические вещества могут нарушать эндокринные функции и обнаруживаютс....
Настоящий протокол был рассмотрен и одобрен Комитетом по благополучию животных Института экспериментальной медицины (PE/EA/1490-7/2017, PE/EA/106-2/2021). Представленные данные получены от14-месячных самцов тайских мышей FVB/муравьев (n = 3-6/группа). Тайские животные, как правило, имеют сильн.......
Как правило, измеренное излучение колеблется от 105 до 1010 /с/см2/ср. Однако точные значения могут варьироваться у разных животных на одном и том же изображении и на разных изображениях. Таким образом, сравнение необработанных данных может ввести в заблу?.......
Угрозы, представляемые химическими веществами, разрушающими эндокринную систему (EDC) для здоровья человека, хорошо известны; тем не менее, исследования EDC сталкиваются с серьезными проблемами. Эти проблемы частично являются следствием сложности эндокринной системы. Было выявлено, что ?.......
Эта работа была поддержана проектом No. Проект RRF-2.3.1-21-2022-00011 под названием «Национальная лаборатория трансляционной нейронауки» был реализован при поддержке Фонда восстановления и устойчивости Европейского Союза в рамках Программы Сечени Plan Plus.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
3,5,3'-triiodothyronine (T3) | Merck | T2877 | |
Animals, mice | THAI mouse | ||
Eye protection gel | Oculotect | 1000 IU/g | |
Falcon tube | Thermo Fisher Scientific | 50 mL volume | |
Iodine-free chow diet | Research Diets | custom | |
IVIS Lumina II in vivo imaging system | Perkin Elmer | - | |
Ketamine | Vetcentre | E1857 | |
Living Image software 4.5 | Perkin Elmer | - | provided with the instrument |
Measuring cylinder | 250 mL | ||
methimazole | Merck | M8506 | |
Microfuge tubes | Eppendorf | For diluting treatment materials | |
NaClO4 | Merck | 71852 | |
Na-luciferin, substrate | Goldbio | 103404-75-7 | |
NaOH | Merck | 101052833 | |
Phoshphate buffer saline | Chem Cruz | sc-362302 | |
Pipette | Gilson | For diluting treatment materials | |
Pipette tips | Axygen | For diluting treatment materials | |
Shaving cream/epilator/shaver | Personal preference | ||
Syringe | B Braun | 1 mL volume | |
Syringe needle | B Braun | 0.3 x 12 mm | |
Xylazine | Vetcentre | E1852 |
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved