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Neuroscience

Isolierung von gezielten hypothalamischen Neuronen zur Untersuchung der hormonellen, metabolischen und elektrischen Regulation

Published: August 4th, 2023

DOI:

10.3791/65674

1Department of Neuroscience and Cell Biology, Robert Wood Johnson Medical School, Rutgers University

Abstract

Der Hypothalamus reguliert grundlegende Stoffwechselprozesse, indem er so unterschiedliche Funktionen wie Nahrungsaufnahme, Körpertemperatur und Hormonausschüttung steuert. Da die Funktionen des Hypothalamus von bestimmten Untergruppen neuronaler Populationen gesteuert werden, ist die Fähigkeit, sie zu isolieren, ein wichtiges Werkzeug für die Untersuchung von Stoffwechselmechanismen. Die neuronale Komplexität des Hypothalamus stellt in dieser Hinsicht außergewöhnliche Herausforderungen dar.

Aus diesen Gründen wurden neue Techniken, wie z.B. die magnetisch aktivierte Zellsortierung (MACS), erforscht. Diese Arbeit beschreibt eine neue Anwendung der magnetisch aktivierten Zellsortierung (MACS) unter Verwendung der Mikrobead-Technologie, um eine gezielte neuronale Population aus pränatalen Mäusegehirnen zu isolieren. Die Technik ist einfach und garantiert eine hochreine und lebensfähige primäre hypothalamische Neuronenkultur mit hoher Reproduzierbarkeit. Der Hypothalamus wird sanft dissoziiert, Neuronen werden selektiv isoliert und von Gliazellen getrennt, und schließlich wird mit Hilfe eines spezifischen Antikörpers für einen Zelloberflächenmarker die interessierende Population ausgewählt.

Nach der Isolierung können Zielneuronen verwendet werden, um ihre morphologischen, elektrischen und endokrinen Eigenschaften und ihre Reaktionen unter normalen oder pathologischen Bedingungen zu untersuchen. Angesichts der vielfältigen Rolle des Hypothalamus bei der Regulierung von Ernährung, Stoffwechsel, Stress, Schlaf und Motivation kann ein genauerer Blick auf gezielte und regionenspezifische Neuronen einen Einblick in ihre Aufgaben in dieser komplexen Umgebung geben.

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