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Neuroscience

Isolamento di neuroni ipotalamici mirati per studi di regolazione ormonale, metabolica ed elettrica

Published: August 4th, 2023

DOI:

10.3791/65674

1Department of Neuroscience and Cell Biology, Robert Wood Johnson Medical School, Rutgers University

Abstract

L'ipotalamo regola i processi metabolici fondamentali controllando funzioni varie come l'assunzione di cibo, la temperatura corporea e il rilascio di ormoni. Poiché le funzioni dell'ipotalamo sono controllate da specifici sottoinsiemi di popolazioni neuronali, la capacità di isolarli fornisce uno strumento importante per lo studio dei meccanismi metabolici. A questo proposito, la complessità neuronale dell'ipotalamo pone sfide eccezionali.

Per questi motivi, sono state esplorate nuove tecniche, come il Magnetic-Activated Cell Sorting (MACS). Questo documento descrive una nuova applicazione dello smistamento cellulare attivato magneticamente (MACS) utilizzando la tecnologia delle microsfere per isolare una popolazione neuronale mirata dal cervello dei topi prenatali. La tecnica è semplice e garantisce una coltura di neuroni ipotalamici primari altamente pura e vitale con un'elevata riproducibilità. L'ipotalamo viene delicatamente dissociato, i neuroni vengono selettivamente isolati e separati dalle cellule gliali e, infine, utilizzando un anticorpo specifico per un marcatore di superficie cellulare, viene selezionata la popolazione di interesse.

Una volta isolati, i neuroni mirati possono essere utilizzati per studiare le loro caratteristiche morfologiche, elettriche ed endocrine e le loro risposte in condizioni normali o patologiche. Inoltre, dati i ruoli variegati dell'ipotalamo nella regolazione dell'alimentazione, del metabolismo, dello stress, del sonno e della motivazione, uno sguardo più attento ai neuroni mirati e specifici della regione può fornire informazioni sui loro compiti in questo ambiente complesso.

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