Характеристика морфологии сосудов неоваскулярной возрастной макулярной дегенерации методом ангиографии индоцианином зеленым

Summary

В настоящее время флюоресцентная ангиография (ФА) является предпочтительным методом выявления характера утечки в животных моделях хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ). Однако ФА не дает информации о морфологии сосудов. В этом протоколе описывается использование ангиографии индоцианинового зеленого цвета (ICGA) для характеристики различных типов поражения лазерно-индуцированной ХНВ на мышиных моделях.

Abstract

Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) является основной причиной слепоты среди пожилых людей, и ее распространенность быстро растет из-за старения населения. Хориоидальная неоваскуляризация (ХНВ) или влажная ВМД, на долю которых приходится 10-20% всех случаев ВМД, ответственна за тревожные 80%-90% слепоты, связанной с ВМД. Современные анти-VEGF-терапии показывают субоптимальный ответ примерно у 50% пациентов. Резистентность к анти-VEGF-терапии у пациентов с ХНВ часто связана с артериолярной ХНВ, в то время как у пациентов, отвечающих на лечение, как правило, наблюдается капиллярная ХНВ. Несмотря на то, что флуоресцеиновая ангиография (ФА) обычно используется для оценки характера утечки у пациентов с влажной ВМД и животных моделей, она не дает информации о морфологии сосудов CNV (артериолярная CNV в сравнении с капиллярной CNV). Этот протокол вводит использование ангиографии индоцианинового зеленого цвета (ICGA) для характеристики типов поражения в лазерно-индуцированных моделях мышей CNV. Этот метод имеет решающее значение для изучения механизмов и стратегий лечения резистентности к анти-VEGF при влажной ВМД. Рекомендуется включать ICGA вместе с ФА для комплексной оценки как негерметичности, так и сосудистых особенностей CNV в механистических и терапевтических исследованиях.

Introduction

Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) является распространенным заболеванием, которое приводит к тяжелой потере зрения у пожилых людей¹. Только в Соединенных Штатах число пациентов с ВМД, по прогнозам, удвоится, достигнув почти 22 миллионов к 2050 году по сравнению с нынешними 11 миллионами. Ожидается, что к 2040 г. во всем мире число случаев ВМД достигнет ошеломляющих 288^{миллионов2}.

Хориоидальная неоваскуляризация (ХНВ), также известная как «влажная» или неоваскулярная ВМД, может иметь разрушительные последствия для зрения из-за образования аномальных кровеносных сосудов под центральной сет....

Protocol

Эксперименты на животных, проведенные в этом исследовании, получили одобрение от Институциональных комитетов по уходу за животными и их использованию (IACUC) в Медицинском колледже Бэйлора. Все процедуры были проведены в соответствии с рекомендациями, изложенными в Заявлении Ассоциации.......

Discussion

Это исследование продемонстрировало использование ангиографии индоцианинового зеленого цвета (ICGA) для определения морфологии сосудов артериолярной и капиллярной хориоидальной неоваскуляризации (CNV) на мышиных моделях с лазерно-индуцированной CNV. Связанные с гемоглобином и инфракра?.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
32-G Insulin Syringe	MHC Medical Products	NDC 08496-3015-01
Alexa Fluor 488 goat anti-rabbit secondary antibody	Invitrogen	A11008
Anti-α smooth muscle Actin antibody	Abcam	ab5694
Bovine Serum Albumin	Santa Cruz Biotechnology, Inc.	sc-2323
C57BL/6J mice (7-9 weeks)	The Jackson Laboratory	Strain #:000664
Fluorescein Sodium Salt	Sigma-Aldrich	MFCD00167039
Gaymar T Pump Heat Therapy System	Gaymar	TP-500	Water circulation heat pump for mouse recovery after imaging
GenTeal Gel	Genteal	NDC 58768-791-15	Clear lubricant eye gel
GS-IB4 Alexa-Flour 568 conjugate	Invitrogen	I21412
Heidelberg Eye Explorerer	Heidelberg Engineering, Germany	HEYEX2
Indocyanine Green	Pfaultz & Bauer	I01250
Ketamine	Vedco Inc.	NDC 50989-996-06
Paraformaldehyde	Acros Organics	416785000
Proparacaine Hydrochloride Ophthalmic Solution (0.5%)	Sandoz	NDC 61314-016-01
Spectralis Multi-Modality Imaging System Heidelberg Engineering, Germany SPECTRALIS HRA+OCT Tropicamide ophthalmic solution (1%) Bausch & Lomb NDC 24208-585-64 for dilation of pupils GenTeal Gel Genteal NDC 58768-791-15 clear lubricant eye gel Ketamine Vedco Inc NDC 50989-996-06 Xylazine Lloyd Laboratories NADA 139-236 Acepromazine Vedco Inc NDC 50989-160-11 32-G Needle Steriject PRE-32013 1-ml syringe BD 309659 Indocyanine Green Pfaltz & Bauer I01250	Heidelberg Engineering, Germany	SPECTRALIS HRA+OCT
Triton X-100	Sigma-Aldrich	X100-1L
Tropicamide ophthalmic solution (1%)	Bausch & Lomb	NDC 24208-585-64	For dilation of pupils
Xylazine	Lloyd Laboratories	NADA 139-236