Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

В настоящее время флюоресцентная ангиография (ФА) является предпочтительным методом выявления характера утечки в животных моделях хориоидальной неоваскуляризации (ХНВ). Однако ФА не дает информации о морфологии сосудов. В этом протоколе описывается использование ангиографии индоцианинового зеленого цвета (ICGA) для характеристики различных типов поражения лазерно-индуцированной ХНВ на мышиных моделях.

Abstract

Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) является основной причиной слепоты среди пожилых людей, и ее распространенность быстро растет из-за старения населения. Хориоидальная неоваскуляризация (ХНВ) или влажная ВМД, на долю которых приходится 10-20% всех случаев ВМД, ответственна за тревожные 80%-90% слепоты, связанной с ВМД. Современные анти-VEGF-терапии показывают субоптимальный ответ примерно у 50% пациентов. Резистентность к анти-VEGF-терапии у пациентов с ХНВ часто связана с артериолярной ХНВ, в то время как у пациентов, отвечающих на лечение, как правило, наблюдается капиллярная ХНВ. Несмотря на то, что флуоресцеиновая ангиография (ФА) обычно используется для оценки характера утечки у пациентов с влажной ВМД и животных моделей, она не дает информации о морфологии сосудов CNV (артериолярная CNV в сравнении с капиллярной CNV). Этот протокол вводит использование ангиографии индоцианинового зеленого цвета (ICGA) для характеристики типов поражения в лазерно-индуцированных моделях мышей CNV. Этот метод имеет решающее значение для изучения механизмов и стратегий лечения резистентности к анти-VEGF при влажной ВМД. Рекомендуется включать ICGA вместе с ФА для комплексной оценки как негерметичности, так и сосудистых особенностей CNV в механистических и терапевтических исследованиях.

Introduction

Возрастная макулярная дегенерация (ВМД) является распространенным заболеванием, которое приводит к тяжелой потере зрения у пожилых людей1. Только в Соединенных Штатах число пациентов с ВМД, по прогнозам, удвоится, достигнув почти 22 миллионов к 2050 году по сравнению с нынешними 11 миллионами. Ожидается, что к 2040 г. во всем мире число случаев ВМД достигнет ошеломляющих 288миллионов2.

Хориоидальная неоваскуляризация (ХНВ), также известная как «влажная» или неоваскулярная ВМД, может иметь разрушительные последствия для зрения из-за образования аномальных кровеносных сосудов под центральной сет....

Protocol

Эксперименты на животных, проведенные в этом исследовании, получили одобрение от Институциональных комитетов по уходу за животными и их использованию (IACUC) в Медицинском колледже Бэйлора. Все процедуры были проведены в соответствии с рекомендациями, изложенными в Заявлении Ассоциации.......

Representative Results

В соответствии с протоколом, ICGA и FA проводили на лазерно-индуцированной CNV у молодых (7-9 недель) и старых (12-16 месяцев) мышей C57BL/6J. FA предоставляет информацию о локализации и утечке поражений CNV (рис. 1, левые панели), в то время как ICGA раскрывает сосудистую морфологию поражен?.......

Discussion

Это исследование продемонстрировало использование ангиографии индоцианинового зеленого цвета (ICGA) для определения морфологии сосудов артериолярной и капиллярной хориоидальной неоваскуляризации (CNV) на мышиных моделях с лазерно-индуцированной CNV. Связанные с гемоглобином и инфракра?.......

Disclosures

Авторам нечего раскрывать.

Acknowledgements

Эта работа была поддержана грантами от BrightFocus Foundation, Retina Research Foundation, Mullen Foundation и Фонда Сары Кэмпбелл Блаффер в области офтальмологии для YF, основным грантом NIH 2P30EY002520 для Медицинского колледжа Бэйлора и неограниченным грантом для кафедры офтальмологии Медицинского колледжа Бэйлора от Research to Prevention Blindness.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
32-G Insulin SyringeMHC Medical ProductsNDC 08496-3015-01
Alexa Fluor 488 goat anti-rabbit secondary antibodyInvitrogen A11008
Anti-α smooth muscle Actin antibodyAbcamab5694
Bovine Serum AlbuminSanta Cruz Biotechnology, Inc.sc-2323 
C57BL/6J mice (7-9 weeks)The Jackson LaboratoryStrain #:000664
Fluorescein Sodium SaltSigma-AldrichMFCD00167039
Gaymar T Pump Heat Therapy SystemGaymarTP-500Water circulation heat pump for mouse recovery after imaging
GenTeal GelGentealNDC 58768-791-15Clear lubricant eye gel
GS-IB4 Alexa-Flour 568 conjugateInvitrogen I21412
Heidelberg Eye ExplorererHeidelberg Engineering, GermanyHEYEX2
Indocyanine GreenPfaultz & BauerI01250
KetamineVedco Inc.NDC 50989-996-06
ParaformaldehydeAcros Organics 416785000
Proparacaine Hydrochloride Ophthalmic Solution (0.5%)SandozNDC 61314-016-01
Spectralis Multi-Modality Imaging System Heidelberg Engineering, Germany SPECTRALIS HRA+OCT Tropicamide ophthalmic solution (1%) Bausch & Lomb NDC 24208-585-64 for dilation of pupils GenTeal Gel Genteal NDC 58768-791-15 clear lubricant eye gel Ketamine Vedco Inc NDC 50989-996-06 Xylazine Lloyd Laboratories NADA 139-236 Acepromazine Vedco Inc NDC 50989-160-11 32-G Needle Steriject PRE-32013 1-ml syringe BD 309659 Indocyanine Green Pfaltz & Bauer I01250Heidelberg Engineering, GermanySPECTRALIS HRA+OCT
Triton X-100 Sigma-AldrichX100-1L
Tropicamide ophthalmic solution (1%)Bausch & LombNDC 24208-585-64For dilation of pupils
XylazineLloyd LaboratoriesNADA 139-236

References

  1. Fleckenstein, M., et al. Age-related macular degeneration. Nature Reviews Disease Primers. 7 (1), 1-25 (2021).
  2. Wong, W. L., et al. Global prevalence of age-related macular degener....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

VEGFCNV

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved