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Biochemistry

哺乳類細胞の in situ クライオトモグラフィーのためのサンプル調製

Published: December 15th, 2023

DOI:

10.3791/65697

1College of Liberal Arts, University of Minnesota, 2Department of Biochemistry, Molecular Biology and Biophysics, Medical School, University of Minnesota, 3College of Biological Sciences, University of Minnesota

* These authors contributed equally

Abstract

in situ 細胞クライオトモグラフィーは、天然の凍結水和細胞環境で複雑な物体を研究するための強力な技術であり、細胞生物学およびウイルス学に非常に関連しています。クライオトモグラフィーを他の顕微鏡法と組み合わせることで、統合的および相関的なイメージングに最適な技術となります。しかし、 in situ 細胞トモグラフィーのサンプル調製は、細胞が電子顕微鏡グリッド上に容易に付着して伸びないため、簡単ではありません。さらに、グリッド自体は壊れやすく、力を入れすぎると壊れてしまい、イメージ可能な領域が失われる可能性があります。組織培養皿の形状は、ピンセットでグリッドを操作する際にも課題となる可能性があります。ここでは、これらの(およびその他の)課題を克服し、in situ 細胞クライオトモグラフィーおよび接着哺乳類細胞の相関イメージング用の高品質のサンプルを調製するためのヒントとコツについて説明します。クライオ顕微鏡技術の継続的な進歩により、この技術は複雑な生物学的システムの理解を深める上で大きな可能性を秘めています。

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