Abstract
Biochemistry
原位 细胞冷冻断层扫描是一种强大的技术,用于在天然冷冻水合细胞环境中研究复杂物体,使其与细胞生物学和病毒学高度相关。将冷冻断层扫描与其他显微镜模式相结合的潜力使其成为综合和相关成像的完美技术。然而,原 位 细胞断层扫描的样品制备并不简单,因为细胞不容易附着在电子显微镜网格上并拉伸。此外,网格本身很脆弱,如果处理得太用力,可能会破裂,从而导致可成像区域的丢失。当用镊子操纵网格时,组织培养皿的几何形状也会带来挑战。在这里,我们描述了克服这些(和其他)挑战的技巧和窍门,并为贴壁哺乳动物细胞的 原位 细胞冷冻断层扫描和相关成像制备高质量的样品。随着冷冻显微镜技术的不断进步,这项技术在促进我们对复杂生物系统的理解方面具有巨大的前景。
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