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Biochemistry

स्तनधारी कोशिकाओं के सीटू क्रायोटोमोग्राफी के लिए नमूना तैयारी

Published: December 15th, 2023

DOI:

10.3791/65697

* These authors contributed equally

Abstract

सीटू सेलुलर क्रायोटोमोग्राफी अपने मूल जमे हुए-हाइड्रेटेड सेलुलर संदर्भ में जटिल वस्तुओं का अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली तकनीक है, जिससे यह सेलुलर जीव विज्ञान और वायरोलॉजी के लिए अत्यधिक प्रासंगिक है। अन्य माइक्रोस्कोपी तौर-तरीकों के साथ क्रायोटोमोग्राफी के संयोजन की क्षमता इसे एकीकृत और सहसंबंधित इमेजिंग के लिए एक आदर्श तकनीक बनाती है। हालांकि, सीटू सेलुलर टोमोग्राफी के लिए नमूना तैयारी सीधी नहीं है, क्योंकि कोशिकाएं इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी ग्रिड पर आसानी से संलग्न और फैली नहीं होती हैं। इसके अतिरिक्त, ग्रिड स्वयं नाजुक होते हैं और यदि बहुत बलपूर्वक संभाला जाता है तो टूट सकता है, जिसके परिणामस्वरूप छवि योग्य क्षेत्रों का नुकसान होता है। चिमटी के साथ ग्रिड में हेरफेर करते समय ऊतक संवर्धन व्यंजनों की ज्यामिति भी एक चुनौती पैदा कर सकती है। यहां, हम इन (और अन्य) चुनौतियों को दूर करने के लिए युक्तियों और चालों का वर्णन करते हैं और सीटू सेलुलर क्रायोटोमोग्राफी और अनुयायी स्तनधारी कोशिकाओं के कोररिलेटिव इमेजिंग के लिए अच्छी गुणवत्ता वाले नमूने तैयार करते हैं। क्रायोमाइक्रोस्कोपी प्रौद्योगिकी में निरंतर प्रगति के साथ, यह तकनीक जटिल जैविक प्रणालियों की हमारी समझ को आगे बढ़ाने के लिए बहुत वादा करती है।

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