Подготовка образцов для криотомографии клеток млекопитающих in situ

Клеточная криотомография in situ является мощным методом для изучения сложных объектов в их естественном замороженно-гидратированном клеточном контексте, что делает ее очень актуальной для клеточной биологии и вирусологии. Потенциал сочетания криотомографии с другими методами микроскопии делает ее идеальным методом для интегративной и коррелятивной визуализации. Тем не менее, подготовка образцов для клеточной томографии in situ не является простой задачей, поскольку клетки не прикрепляются и не растягиваются по сетке электронной микроскопии. Кроме того, сетки сами по себе хрупкие и могут сломаться при слишком сильном обращении, что приведет к потере видимых областей. Геометрия чашек для культур тканей также может представлять проблему при манипулировании сетками с помощью пинцета. В этой статье мы опишем советы и рекомендации по преодолению этих (и других) проблем и подготовке высококачественных образцов для клеточной криотомографии in situ и корреляционной визуализации адгезивных клеток млекопитающих. Благодаря постоянному прогрессу в технологии криомикроскопии, этот метод имеет огромные перспективы для углубления нашего понимания сложных биологических систем.