JoVE Logo

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

Abstract

Developmental Biology

توليد عضويات الكلى في تعليق من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات

Published: September 1st, 2023

DOI:

10.3791/65698

1Department of Nephrology, The Children's Hospital, Zhejiang University School of Medicine, 2Zhejiang University School of Medicine, 3Hubei Normal University, 4National Clinical Research Center of Kidney Diseases, Jinling Hospital, Nanjing University School of Medicine, 5Clinical Laboratory, The Children’s Hospital, Zhejiang University School of Medicine, National Clinical Research Center for Child Health

* These authors contributed equally

Abstract

يمكن توليد عضويات الكلى من الخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs) من خلال طرق مختلفة. هذه المواد العضوية تحمل وعدا كبيرا لنمذجة الأمراض ، وفحص الأدوية ، والتطبيقات العلاجية المحتملة. تقدم هذه المقالة إجراء خطوة بخطوة لإنشاء عضويات الكلى من iPSCs ، بدءا من الخط البدائي الخلفي (PS) إلى الأديم المتوسط المتوسط المتوسط (IM). يعتمد النهج على وسيط APEL 2 ، وهو وسيط محدد خال من المكونات الحيوانية. يتم استكماله بتركيز عال من ناهض WNT (CHIR99021) لمدة 4 أيام ، يليه عامل نمو الخلايا الليفية 9 (FGF9) / الهيبارين وتركيز منخفض من CHIR99021 لمدة 3 أيام إضافية. خلال هذه العملية ، يتم التركيز على اختيار كثافة الخلايا المثلى وتركيز CHIR99021 في بداية iPSCs ، حيث أن هذه العوامل ضرورية لتوليد عضوي الكلى بنجاح. أحد الجوانب المهمة لهذا البروتوكول هو ثقافة التعليق في لوحة منخفضة الالتصاق ، مما يسمح لل IM بالتطور تدريجيا إلى هياكل نيفرون ، تشمل الهياكل الكبيبية والأنبوبية القريبة والأنبوبية البعيدة ، وكلها مقدمة بتنسيق مفهوم بصريا. بشكل عام ، يقدم هذا البروتوكول التفصيلي تقنية فعالة ومحددة لإنتاج عضويات الكلى من iPSCs المتنوعة ، مما يضمن نتائج ناجحة ومتسقة.

Explore More Videos

IPSCs APEL 2 Medium WNT CHIR99021 9 FGF9

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2024 MyJoVE Corporation. All rights reserved