Étude de la dynamique transcriptionnelle musculaire à l’échelle d’une seule molécule chez la drosophile

Les muscles squelettiques sont de grandes syncytia composées de nombreuses myofibres groupées qui produisent des forces et permettent le mouvement du corps. La drosophile est un modèle classique pour étudier la biologie musculaire. La combinaison de la génétique de la drosophile et d’approches omiques avancées a conduit à l’identification de molécules clés conservées qui régulent la morphogenèse et la régénération musculaires. Cependant, la dynamique transcriptionnelle de ces molécules et la distribution spatiale de leur ARN messager au sein de la syncytia ne peuvent pas être évaluées par les méthodes conventionnelles. Ici, nous avons optimisé une méthode existante d’hybridation in situ par fluorescence de l’ARN à molécule unique (smFISH) pour permettre la détection et la quantification de molécules d’ARNm individuelles dans les muscles de vol adultes et leurs cellules souches musculaires. En guise de preuve de concept, nous avons analysé l’expression et la distribution de l’ARNm de deux facteurs de transcription conservés au cours de l’évolution, Mef2 et Zfh1/. Nous montrons que cette méthode permet de détecter et de quantifier efficacement des molécules d’ARNm uniques pour les transcrits dans les cellules précurseurs musculaires, les muscles adultes et les cellules souches musculaires.