मानव एक्सफोलिएटेड पर्णपाती दांतों से इम्यूनोफेनोटाइप्ड मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं की एकल-कोशिका छंटाई

एक जीव के मेसेनकाइमल स्टेम सेल (एमएससी) में शरीर में वयस्क कोशिकाओं के कई वंशों में अंतर करने की असाधारण क्षमता होती है और वे अपने इम्यूनोमॉड्यूलेटरी और विरोधी भड़काऊ गुणों के लिए जाने जाते हैं। इन स्टेम कोशिकाओं का उपयोग पुनर्योजी जीव विज्ञान के क्षेत्र के लिए एक वरदान है, लेकिन साथ ही, उनके साथ जुड़े कई सेलुलर अस्पष्टताओं के कारण पुनर्योजी चिकित्सा और चिकित्सीय के लिए एक अभिशाप है। ये अस्पष्टताएं इन स्टेम कोशिकाओं के स्रोत में विविधता और उनकी इन विट्रो विकास स्थितियों से उत्पन्न हो सकती हैं, जिनमें से दोनों उनकी कार्यात्मक विषमता को दर्शाती हैं।

यह चिकित्सीय अनुप्रयोगों के लिए एमएससी की शुद्ध, सजातीय आबादी प्रदान करने के तरीकों की गारंटी देता है। फ्लो साइटोमेट्री के क्षेत्र में प्रगति ने एक मल्टीपैरामीट्रिक दृष्टिकोण का उपयोग करके एकल-कोशिका आबादी का पता लगाने में सक्षम बनाया है। यह प्रोटोकॉल प्रतिदीप्ति-सहायता प्राप्त एकल-कोशिका छंटाई के माध्यम से मानव एक्सफोलिएटेड पर्णपाती दांतों (एसएचईडी) से स्टेम कोशिकाओं की पहचान और शुद्धिकरण करने का एक तरीका बताता है। सतह मार्करों की एक साथ अभिव्यक्ति, अर्थात्, सीडी 90-फ्लोरेसिन आइसोथियोसाइनेट (एफआईटीसी), सीडी 73-पेरिडिनिन-क्लोरोफिल-प्रोटीन (पेरसीपी-साइ 5.5), सीडी 105-एलोफिकोसाइनिन (एपीसी), और सीडी 44-वी 450 ने मल्टीपैरामीट्रिक फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग करके एमएससी के "उज्ज्वल", सकारात्मक-एक्सप्रेसर्स की पहचान की। हालांकि, इन सकारात्मक मार्करों के चौगुनी अभिव्यक्तियों के प्रतिशत में 7 वें मार्ग से बाद के अंशों तक एक महत्वपूर्ण गिरावट देखी गई।

इम्यूनोफेनोटाइप्ड उप-आबादी को एकल-सेल सॉर्ट मोड का उपयोग करके क्रमबद्ध किया गया था जहां केवल दो सकारात्मक और एक नकारात्मक मार्कर ने समावेश मानदंड का गठन किया था। इस पद्धति ने क्रमबद्ध आबादी की सेल व्यवहार्यता सुनिश्चित की और छंटाई के बाद सेल प्रसार को बनाए रखा। इस तरह की छंटाई के लिए डाउनस्ट्रीम एप्लिकेशन का उपयोग गेटेड उप-आबादी के लिए वंश-विशिष्ट भेदभाव का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है। अलगाव की स्थिति में सुधार करने और कई सेल सतह मार्कर जानकारी प्राप्त करने के लिए इस दृष्टिकोण को अन्य एकल-सेल प्रणालियों पर लागू किया जा सकता है।