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Qui, presentiamo un protocollo per valutare la nocicezione in topi infettati da Trypanosoma evansi, utilizzando l'apparato elettronico di von Frey come strumento, misurando le soglie meccaniche della zampa posteriore e dei visceri.
La patogenesi delle malattie infettive è ancora un campo complesso da studiare. Il decorso di diversi segni clinici, come l'allodinia e il dolore, può essere osservato negli animali domestici. Tuttavia, la conoscenza dei loro percorsi e il corretto trattamento richiedono esperimenti controllati, molti dei quali utilizzando animali da laboratorio. Misurare i cambiamenti nelle soglie meccaniche della zampa posteriore e dei visceri è una tecnica utile per osservare i cambiamenti nella percezione del dolore nei roditori. La risposta di astinenza può essere misurata prima nei test di base, il che crea un migliore controllo dei gruppi sperimentali. I test successivi possono essere eseguiti dopo aver indotto l'infezione e aver aggiunto farmaci al protocollo. L'uso di un apparato elettronico di von Frey associato all'uso di una scala facciale per osservare i cambiamenti simili al dolore consente una valutazione semplice, precisa e coerente per valutare l'allodinia e il dolore nei topi. Pertanto, gli esperimenti che utilizzano la presente metodologia per l'infezione da Trypanosoma evansi rappresentano un metodo utile per valutare l'allodinia e il dolore negli animali infetti da laboratorio, che può essere applicato al trattamento convenzionale per gli animali da reddito.
Il Trypanosoma evansi è l'agente eziologico della malattia chiamata "surra" o "mal-das-cadeiras" in Sud America 1,2. Colpisce comunemente equini e bovini, ma anche la fauna selvatica, essendo trasmessa da pipistrelli ematofagi, tabanidi e stomi morsi di mosca 1,3. La Surra è una malattia importante negli animali domestici, che può essere fatale in assenza di un trattamento corretto, presentando segni clinici aspecifici come anemia, perdita di appetito e peso, debolezza muscolare e aborto, che possono variare a seconda dell'ospite e della regio....
Tutti gli esperimenti sono stati eseguiti utilizzando topi svizzeri femmine adulte di 10 settimane (35-55 g). Gli animali sono stati alloggiati in gabbie di polisulfone (3-5 animali per gabbia) in una stanza a temperatura controllata (21 ± 1 °C), ciclo luce 12 ore / buio 12 ore e cibo da laboratorio standard e acqua ad libitum. Dieci animali sono stati assegnati a ciascun gruppo in ogni test per dimostrare gli effetti coerenti dei trattamenti farmacologici. Il disegno sperimentale è stato presentato e approva.......
Diminuzione della soglia meccanica dovuta all'infezione da T. evansi valutata mediante apparecchio elettronico di von Frey sia sulla zampa posteriore destra che sui tessuti viscerali
L'esperimento è stato condotto nell'arco di 5 giorni, secondo i dati precedenti relativi al campione2 disponibile di T. evansi. I topi infetti hanno iniziato a mostrare una differenza significativa nella soglia meccanica sulla zampa posteriore destra al giorno 3 dopo l'infezione .......
Un passaggio critico negli esperimenti che coinvolgono animali infetti è il controllo dei livelli di parassitemia. Diversi ceppi di T. evansi possono comportarsi in modi divergenti nei topi, portando da infezioni acute a croniche 2,4,5,6. Inoltre, le variazioni della dose di infezione possono ridurre o prolungare il tempo di sopravvivenza dei topi. Pertanto, si raccomanda di ottenere .......
Gli autori non hanno conflitti di interesse da dichiarare.
Gli autori ringraziano in particolare l'Università Statale di Santa Catarina per il sostegno finanziario, il Laboratorio di Farmacologia per gli animali e lo spazio e il Laboratorio di Biochimica degli Emoparassiti e dei Vettori per il campione di sangue crioconservato infettato da T. evansi utilizzato in questi esperimenti.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
26 G 1/2" needle coupled to insulin syringe | TKL | 80288090100 | Used to infund solutions on laboratory animals |
Accessories for von Frey analgesimeter | INSIGHT | EFF 303 | Containment box with support for digital analgesimeter assessment |
D-(+)-Glucose | SIGMA-ALDRICH | G7021 | A monosaccharide which is the main source of energy in the form of ATP for living organisms |
Digital analgesimeter | INSIGHT | von Frey Wi-Fi | The von Frey Wi-Fi is a portable device used to assess tissue sensitivity to mechanical stimuli |
Gilson type 10 µL polypropylene tip | CRALPLAST | 18261 | Polypropylene to be used on eletronic von Frey apparatus, recommended for hind paw allodynia assessment |
Laboratory water bath | BEING INSTRUMENT | BW-22P | Used to heat liquid and semi-solid substances contained in appropriate recipients to specific temperature |
Phosphate buffered saline | SIGMA-ALDRICH | 806552 | A balanced salt solution buffer used for a variety of cell culture applications |
Swiss mice (Mus musculus) from both gender | UFSC | Swiss Webster | Laboratory animals used for controlled experiments |
Trypanosoma evansi cryiopreserved sample | UDESC | - | Sample used to infect all mice, ceded by the Hemoparasites and Vectors Biochemistry Laboratory |
Universal type 10 µL polypropylene tip | CRALPLAST | 18171 | Polypropylene to be used on eletronic von Frey apparatus, recommended for visceral allodynia assessment |
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