माइक्रोट्यूबुल्स नेटवर्क की कल्पना करने के लिए ड्रोसोफिला लार्वा न्यूरोमस्कुलर जंक्शन और मांसपेशी कोशिकाओं का उपयोग करना

सूक्ष्मनलिका नेटवर्क तंत्रिका तंत्र का एक आवश्यक घटक है। कई सूक्ष्मनलिकाएं नियामक प्रोटीन में उत्परिवर्तन न्यूरोडेवलपमेंटल विकारों और न्यूरोलॉजिकल रोगों से जुड़े होते हैं, जैसे कि सूक्ष्मनलिका से जुड़े प्रोटीन ताऊ से न्यूरोडीजेनेरेटिव रोग, सूक्ष्मनलिका सेवरिंग प्रोटीन स्पास्टिन और कैटानिन 60 क्रमशः वंशानुगत स्पास्टिक पैरापलेजिया और न्यूरोडेवलपमेंटल असामान्यताएं पैदा करते हैं। न्यूरॉन्स में सूक्ष्मनलिका नेटवर्क का पता लगाना न्यूरोलॉजिकल विकारों के रोगजनन को स्पष्ट करने के लिए फायदेमंद है। हालांकि, न्यूरॉन्स का छोटा आकार और अक्षीय सूक्ष्मनलिका बंडलों की घनी व्यवस्था सूक्ष्मनलिका नेटवर्क को चुनौतीपूर्ण बनाती है। इस अध्ययन में, हम ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में सूक्ष्मनलिका नेटवर्क की कल्पना करने के लिए लार्वा न्यूरोमस्कुलर जंक्शन और मांसपेशियों की कोशिकाओं के विच्छेदन के साथ-साथ α-ट्यूबुलिन और सूक्ष्मनलिका से जुड़े प्रोटीन फुटश के इम्यूनोस्टेनिंग के लिए एक विधि का वर्णन करते हैं। न्यूरोमस्कुलर जंक्शन हमें प्री-और पोस्ट-सिनैप्टिक सूक्ष्मनलिकाएं दोनों का निरीक्षण करने की अनुमति देता है, और ड्रोसोफिला लार्वा में मांसपेशियों की कोशिकाओं का बड़ा आकार सूक्ष्मनलिका नेटवर्क के स्पष्ट विज़ुअलाइज़ेशन की अनुमति देता है। यहां, ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर में कैटनिन 60 को उत्परिवर्तित और अतिरंजित करके, और फिर न्यूरोमस्कुलर जंक्शन और मांसपेशियों की कोशिकाओं में सूक्ष्मनलिका नेटवर्क की जांच करके, हम न्यूरोडेवलपमेंट में कैटनिन 60 की नियामक भूमिका को सटीक रूप से प्रकट करते हैं। इसलिए, ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर के शक्तिशाली आनुवंशिक उपकरणों के साथ संयुक्त, यह प्रोटोकॉल तंत्रिका तंत्र में सूक्ष्मनलिका नेटवर्क नियामक प्रोटीन की भूमिका के लिए आनुवंशिक स्क्रीनिंग और सूक्ष्मनलिका गतिशीलता विश्लेषण की सुविधा प्रदान करता है।