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Usando moxabustão separada por bolo de ervas para o tratamento de ratos com insuficiência renal crônica
* These authors contributed equally
In This Article
Summary
A plataforma experimental de moxabustão pode fixar os ratos sem restrições, e os ratos podem ser submetidos a moxabustão multiponto no estado acordado, garantindo o bem-estar dos ratos, protegendo a segurança dos operadores, garantindo a eficácia terapêutica e melhorando a eficiência do experimento.
Abstract
No processo de moxabustão na prática clínica, os indivíduos precisam estar de bom humor e postura confortável para evitar problemas como queda de cinzas de moxa, queimaduras na pele e efeito curativo deficiente. Tais problemas também existem no experimento de moxabustão de ratos. Para simular a prática clínica, faz-se necessária a introdução de um instrumento experimental em experimentos com animais, ou seja, um dispositivo de moxabustão com ratos fixos e sincronização do tratamento com moxabustão, que pode fazer com que os ratos experimentais recebam tratamento de moxabustão de forma silenciosa e confortável sob não anestesia.
Nosso grupo de pesquisa projetou uma plataforma experimental de moxabustão de ratos. O dispositivo foi emoldurado por uma placa de madeira com uma placa de base de suporte, vários componentes fixos e componentes particionados. O dispositivo pode atingir o modo de operação de moxabustão em ratos sem ligação, evitando anestesia e escaldagem e expondo simultaneamente vários pontos de acupuntura nas costas. Esta operação pode evitar lesões físicas e mentais em ratos e operadores, o que melhora a eficiência da pesquisa e promove ainda mais o desenvolvimento e a pesquisa de experimentos com animais de moxabustão.
O dispositivo tem uma estrutura simples, é fácil de operar e popularizar, é projetado de forma abrangente e inovadora, reutilizável e é adequado para experimentos com ratos baseados principalmente em moxabustão. Este artigo apresenta principalmente a estrutura do dispositivo de plataforma experimental para moxabustão de ratos, o procedimento básico de moxabustão separada por bolo de ervas em ratos experimentais usando o dispositivo e descreve o estabelecimento de um modelo de rato de insuficiência renal crônica (IRC) e resultados experimentais representativos.
Introduction
A moxabustão apareceu com a aplicação de fogo. Médicos antigos descobriram acidentalmente que algumas partes do corpo em chamas poderiam aliviar os sintomas de desconforto. Após a prática de longo prazo, "Artemisiae Argyi Folium" foi gradualmente selecionado como o principal material de moxabustão1. A moxabustão é um dos componentes importantes da medicina tradicional chinesa e, quando justaposta à decocção da medicina tradicional chinesa e à acupuntura do ponto de acupuntura, essas três principais terapias da medicina tradicional chinesa são amplamente utilizadas em muitas doenças.
Os médicos chineses costumavam usa....
Protocol
O plano segue as Diretrizes de Cuidados com Animais da Universidade de Medicina Chinesa de Yunnan e foi aprovado pelo Comitê de Ética Animal da Universidade de Medicina Chinesa de Yunnan. O número experimental de revisão de bem-estar animal e ética é R-062021G098.
1. Dispositivo de plataforma experimental de moxabustão (Figura 1)
NOTA: Projetamos e construímos o dispositivo de plataforma experimen.......
Representative Results
Morfologia renal
Como pode ser visto na Figura 5, em comparação com os outros grupos, o tamanho, a cor e a textura dos rins no grupo D (grupo erva-bolo-separada-moxabustão) estavam mais próximos dos do grupo normal. A morfologia renal do modelo e os grupos losartana potássica apresentaram diferentes graus de fibrose branca.
Peso do rim
A Figura 6 mostra que o peso do rim es.......
Discussion
Clinicamente, o tratamento com acupuntura e moxabustão exige que os pacientes estejam calmos e relaxados, evitando raiva e fome excessivas e enfatizando a "paz". No entanto, a prática atual de experimentos de acupuntura e moxabustão ainda é baseada na premissa de amarrar animais, o que não é apenas contrário à intenção original do experimento, mas também não está de acordo com a prática clínica. Amarrar animais, deixando-os assustados e com raiva, aumentará rapidamente a adrenalina e outros hormônios em .......
Acknowledgements
Agradecemos ao Professor Associado Huang e à Srta. Cui por sua orientação e apoio rigorosos a este artigo. O estudo foi apoiado por: 1. Fundação Nacional de Ciências Naturais da China (NSFC), 82160938, "Exploração da pesquisa de mecanismos na fibrose intersticial renal com moxabustão separada por bolo a partir do efeito interativo das vias de sinal ERK e Smad mediadas por TGF-β1"; 2. A Comissão de Saúde da Província de Yunnan "2020 Talentos de Reserva de MTC de Alto Nível" Projeto de Incubação (Desenvolvimento de MTC de Yunwei [2021] No.1); 3. Departamento de Ciência e Tecnologia da Província de Yunnan-Fundos Especiais Conjuntos de Pesquisa Básica da Medicina Chinesa ....
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 0.5 mL heparin lithium biochemical tube | Shijiazhuang Kangweishi Medical Equipment Co., LTD | 220518 | Blood collection |
| 0.9% normal saline | Kunming Nanjiang Pharmaceutical Co., LTD | / | Rinse |
| 1.5 mL Eppendorf tube | Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD | 12100024 | Subpackage |
| 2 mL cryopreservation tube | Baroque Biotechnology Co., LTD | 88-0151 | Packaged kidney |
| 4 °C refrigerator | Haier Group Co. LTD | BCD-236WDGL | Store |
| 5 mL syringe | Sichuan New century Medical polymer products Co., LTD | 20211115 | Gavage |
| 50 mL centrifuge tube | Beijing Langeke Biotechnology Co., LTD | CT-002-50A | Packaged kidney |
| 12 G gavage needle | Beijing Zhongke Hengtian Technology Co., Ltd. | 12#55mm | Gavage |
| 96-well plates | Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD | 11510 | Determination of protein concentration |
| -80 °C freezer | Thermo Fisher Scientific | 991 | Store |
| Adenine | Beijing Boaotuo Technology Co., LTD | A0607 | Molding drug |
| BCA developer | Biyuntian Biological Engineering Co., LTD | P0010 | Determination of protein concentration |
| BCL-2 protein antibody reagent | Abcam Shanghai Trading Co., LTD | ab196495 | Western Blot |
| Caspase-3 protein antibody reagent | Abcam Shanghai Trading Co., LTD | ab184787 | Western Blot |
| Chemiluminescence imaging system | Shanghai Qinxiang Scientific Instrument Co., LTD | 100240073 | Protein banding imaging |
| Chinese medicine powder | The Second Affiliated Hospital of Yunnan University of Chinese Medicine | / | Cure |
| Direct-load Color Prestained Marker | Beijing Kangrunchengye Biotechnology Co., LTD (GenStar) | M221 | Western Blot |
| Disposable blood collection needle | Liuyang Sanli Medical science and technology development Co., LTD | YZB/ Country 0411-2010 | Blood sampling |
| Disposable human venous blood sample collection container | Liuyang Sanli Medical science and technology development Co., LTD | 20210901 | Blood sampling |
| DK-30 Automatic snow ice maker | Henan Brothers instrument equipment Co., LTD | SHDX0023 | Ice-making |
| ECL luminescent substrate kit | Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD | BL520B | Convert latent images in exposed film into visible images |
| electronic scales | Shanghai Ran Hao Electronics Co., LTD | JCS-31002C | The body weight and kidney weight of rats were measured |
| Freezing microtome | Thermo Fisher Scientific | HM525 NX | Microtome |
| fully automatic biochemical analyser | Tianjin Micro nano core Technology Co., LTD | PV2112001Z02410305 | Renal function test |
| Gas anesthesia system | Zhongshi Technology Co., Ltd | ZS-MV-1 | Anesthesia |
| Glycine | Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. | Cat#G8200 | Running buffer, Western transfer buffer |
| HE staining reagent | Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. | G1120 | Staining |
| High-protein feed | Jiangsu Synergetics Biological Engineering Co., LTD | XT19008 | Feeding |
| Intelligent laboratory ultra-pure water machine | Chongqing huachuag water treatment engineering co.,LTD | 15L | Filtration |
| Internal reference β-actin | Jiangsu Qinke Biological Research Co., LTD | AF7018 | Western Blot |
| Isoflurane | Jiangsu Zhongmu Beikang Pharmaceutical Co., Ltd | 20220701 | Anesthesia |
| liquid nitrogen | Kunming Botai dry ice sales Co., LTD | / | Renal tissue freezing |
| Losartan potassium tablets | Merck Sharp & Dohme (China) Investment Co., LTD | J20180054 | Cure |
| Low temperature high speed tissue grinder | Wuhan Servicebio technology CO.,LTD | SKZ3F20200191 | Tissue grinding |
| Maason staining kit | Beijing Soleibao Technology Co., Ltd. | G1340 | Staining |
| Methanol | Guangdong Guanghua Sci-Tech Co., Ltd | 20220519 | Western transfer buffer |
| Mini-PROTEAN Tetra | Bole Life Medical Products (Shanghai) Co., Ltd | 552BR 233193 | Electrophoresis |
| Moxa | The Second Affiliated Hospital of Yunnan University of Chinese Medicine | / | Cure |
| Multiskan Spectrum Microplate Spectrophotometer | TECAN | Spark | The absorbance and concentration of tissue protein were detected |
| operating scissors | Zhangjiagang city Jinfeng deer knife cutting factory | 201118 | Cut the skin |
| Paraformaldehyde | Beijing Lanjieke Biotechnology Co., LTD | BL539A | Fixed tissue |
| PERK protein antibody reagent | Shanghai Pumai Biotechnology Co., LTD (CST China Agent) | 3192 | Western Blot |
| Positive fluorescence microscope | Carl Zeiss Suzhou Co.,Ltd. | 5446000456 | Capture picture |
| Prefabricated glue | Derun Cheng (Beijing) Biological Co., LTD (ACE China Agent) | B230418 | Western Blot |
| ProteinFind Goat Anti-Rabbit LgG(H+L), HRP Conjugate | Shanghai Dinran electronic Technology Co., LTD (TRAN) | HS101 | Western Blot |
| pulverizer | Hefei Rongzhida small household appliances Co., LTD | RS-FS1401 | Crushed Chinese medicine |
| PVDF membrane | MerckMillipore Corporation | IPVH00010 | Western Blot |
| Refrigerated centrifuge | Hettich Precision Technology (Zhuhai) Co., LTD | MIKRO 220R | Centrifuge |
| RIPA lysate | Beijing Solaibao Technology Co., LTD (Solarbio) | R0010 | Lytic tissue |
| Sampling capillary | Jiangsu Kangjianhua Medical Supplies Co., LTD | 20160157 | Blood from inner canthus |
| Scald ointment (Zilian ointment) | Yunnan Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine | / | Used for the treatment of scalding from moxibustion |
| Skim milk powder | Guangzhou Saiguo Biotechnology Co., LTD (BIOFROXX) | 1172GR500 | Western blocking buffer |
| surgical blade | Shanghai Medical Equipment Co., LTD | JOBO10 | Incision kidney tissue |
| surgical knife handle | Shanghai Medical Equipment Co., LTD | J11010 | Mounting blade |
| TS-200 Orbital shaker | Haimen Qilin Bell Manufacturing Co., Ltd. | TS-8S | Gel fixation |
| Tween 80 | MedChemExpress | HY-Y1819 | TBST |
| tweezers | Shanghai Medical Equipment Co., LTD | JD1050 | Pick up the moxa |
| Veterinary drugs*Micro core renal function test disc | Tianjin Micro nano core Technology Co., LTD | 47031-35.5-0145-0227-62-220750 | Renal function test |
References
- Run-Ming, Y. The origin and development of Chinese acupuncture and moxibustion. Ancient Science of Life. 4 (4), 224-228 (1985).
- Zhang, Q. W. . Moxibustion Theories of Different Schools. , (2016).
- Ren, H. W., Cai, D. J.
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