A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
* These authors contributed equally
מחקר זה מתאר שיטה מהירה ויעילה לניתוח מרכיבי התא של קרישי דם מוחיים באמצעות המסת קרישי דם, צביעת תאים ובדיקת דם שגרתית.
פקקת מוחית, קריש דם בעורק מוחי או בווריד, הוא הסוג הנפוץ ביותר של אוטם מוחי. חקר מרכיבי התאים של קרישי דם מוחיים חשוב לאבחון, טיפול ופרוגנוזה. עם זאת, הגישות הנוכחיות לחקר מרכיבי התא של קרישי הדם מבוססות בעיקר על צביעה באתרה , שאינה מתאימה למחקר מקיף של מרכיבי התא מכיוון שהתאים עטופים היטב בקרישי הדם. מחקרים קודמים בודדו בהצלחה אנזים פיברינוליטי (sFE) מ-Sipunculus nudus, שיכול לפרק את הפיברין הצולב, באופן ישיר, ולשחרר את מרכיבי התא. מחקר זה ביסס שיטה מקיפה המבוססת על sFE לחקר מרכיבי התא של פקקת מוחית. פרוטוקול זה כולל המסת קרישי דם, שחרור תאים, צביעת תאים ובדיקת דם שגרתית. על פי שיטה זו, ניתן היה לחקור את מרכיבי התא באופן כמותי ואיכותי. התוצאות המייצגות של ניסויים בשיטה זו מוצגות.
מחלת כלי דם במוח היא אחת משלוש מחלות עיקריות שיכולות לאיים על בריאות האדם, ביניהן מחלת כלי דם איסכמית במוח מהווה יותר מ -80%. פקקת מוחית ופקקת ורידים מוחיים הן מחלות כלי הדם האיסכמיות המודאגות ביותר כיום, הנגרמות בעיקר על ידי קרישי דם מוחיים 1,2. אם הטיפול לא נעשה כראוי, יהיו לו שיעורי נכות ותמותה גבוהים ושיעור הישנות גבוה לאחר השחרור3.
לאחרונה, מספר גדל והולך של מחקרים הראו כי מרכיבי התאים של קרישי דם מוחיים נמצאים בקורלציה הדוקה עם האבחון, הטיפול והפרוגנוזה של פקקת מוחית 4,5,6
המחקר בוצע בהתאם להנחיות המוסדיות של ועדת האתיקה הרפואית של אוניברסיטת Huaqiao. קרישי הדם המוחיים הוסרו בניתוח ונאספו בבית החולים הראשון Quanzhou, המסונף לאוניברסיטה הרפואית פוג'יאן, בהסכמה מדעת של החולים.
1. טיפול מקדים לקריש דם
בשלב הראשוני של תהליך ההשפלה, נמצא כי קרישי הדם היו בעלי מבנה קומפקטי אדום, ותמיסת העבודה הייתה חסרת צבע. לאחר הדגירה במשך 30 דקות, תמיסת העבודה הפכה לאדומה בהירה, מה שמצביע על כך שתאי הדם המוצלבים שוחררו לתמיסת העבודה. רוב הקרישים הומסו בעת הארכת זמן הדגירה ל-5 שעות, ותמיסת העבודה הפכה לאדומה.......
sFE הוא סוכן פיברינוליטי שיכול לפרק את הפיברין באופן ישיר ויעיל12,16. כאן, נעשה שימוש ב-sFE כדי לפרק את הפיברין הצולב-מקושר של קרישי הדם במוח, לשחרר את התאים הסגורים בתוך קרישי הדם, ולנתח את מרכיבי התאים של הקרישים באופן איכותי וכמותי. נתוני המיקרוסקופ ובדיקת הדם ?.......
למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.
מחקר זה מומן על ידי לשכת המדע והטכנולוגיה של העיר שיאמן (3502Z20227197), ולשכת המדע והטכנולוגיה של מחוז פוג'יאן (מס '2019J01070, מס '2021Y0027).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Agglutination Reaction Plate | ROTEST | RTB-4003 | |
Auto Hematology Analyzer | SYSMEX | XNB2 | |
Automatic Vertical Pressure Steam Sterilizer | SANYO | MLS-3750 | |
Centrifuge Tube (1.5 mL) | Biosharp | BS-15-M | |
Clean bench | AIRTECH | BLB-1600 | |
Constant Temperature Incubator | JINGHONG | JHS-400 | |
Culture Dish (100 mm) | NEST | 704001 | |
DHG Series Heating and Drying Oven | SENXIN | DGG-9140AD | |
Electronic Analytical Balance | DENVER | TP-213 | |
Filter Membrane (0.22 µm) | Millex GP | SLGP033NK | |
Micro Refrigerated Centrifuge | Cence | H1650-W | |
Microscope Slides | CITOGLAS | 01-30253-50 | |
Milli-Q Reference | Millipore | Z00QSV0CN | |
Normal Saline | CISEN | H37022337 | |
Optical Microscope | Nikon | ECLIPSE E100 | |
Parafilm | Bemis | PM-996 | |
Phosphate-Buffered Saline | Beyotime | C0221A | |
Pipette Tip (1 mL ) | Axygene | T-1000XT-C | |
Pipette Tip (200 µL) | Axygene | T-200XT-C | |
Pipettor (1 mL) | Thermo Fisher Scientific | ZY18723 | |
Pipettor (200 µL) | Thermo Fisher Scientific | ZY20280 | |
Scalpel | MARTOR | 23111 | |
Small-sized Vortex Oscillator | Kylin-Bell | VORTEX KB3 | |
Tweezer | Hystic | HKQS-180 | |
Wright Staining Solution | Beyotime | C0135-500ml |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved