Mimetizando o Método do Rolo de Ding na Lesão Muscular Induzida por Notexina em Ratos

Summary

Este protocolo descreve um dispositivo simples que imita o método de rolo de Ding, estabelece um modelo de lesão muscular esquelética em ratos e usa coloração de hematoxilina-eosina para observar a patologia do tecido danificado e ensaio imunoenzimático para detectar alterações nos marcadores de dano sérico.

Abstract

O método de rolo de Ding é uma das manipulações mais usadas em clínicas de massagem tradicional chinesa (Tuina) e uma das manipulações contemporâneas de Tuina mais influentes na China. Ele é baseado no método de rolamento tradicional comumente usado no gênero Zen de um dedo e chamado de método de rolo de Ding. Devido aos seus efeitos anti-inflamatórios e promotores da circulação sanguínea, o método de rolamento de Ding tem efeitos terapêuticos sólidos na miopatia. Devido à grande área de força aplicada à pele humana, o método de rolagem de Ding é desafiador de executar em animais experimentais com pequenas áreas de pele, como ratos e coelhos. Além disso, a força de Tuina aplicada ao corpo humano difere daquela aplicada aos animais de experimentação, por isso pode acontecer que a força seja muito alta ou muito baixa para alcançar o efeito terapêutico de Tuina durante o experimento. Este experimento visa criar um massageador simples adequado para ratos com base nos parâmetros de manipulação de rolamento de Ding (força, frequência, duração de Tuina). O dispositivo pode padronizar a manipulação em experimentos com animais e reduzir a variação na força de Tuina aplicada a diferentes animais devido a fatores subjetivos. Um modelo de lesão muscular esquelética induzida por anotoxina em ratos foi estabelecido, e os marcadores de lesão plasmática creatina quinase (CK) e proteína ligadora de ácidos graxos 3 (FABP3) foram usados para avaliar o efeito terapêutico de Tuina na lesão muscular esquelética. Os resultados mostraram que este massageador Tuina pode reduzir os níveis de expressão de CK e FABP3 e diminuir o grau de lesão muscular esquelética. Portanto, o massageador Tuina aqui descrito, mimetizando o método do rolo de Ding, contribui para padronizar a manipulação de Tuina em pesquisas experimentais e é de grande ajuda para pesquisas subsequentes sobre o mecanismo molecular de Tuina para miopatia.

Introduction

As lesões musculares são lesões traumáticas comuns na vida clínica e diária, causadas por golpes externos (contusões) ou sobretensão crônica das fibras musculares (estiramentos), etc., resultando em disfunção muscular e dor, afetando até seriamente a qualidade de vida do^paciente1. Iniciar a reabilitação o mais precocemente possível após uma lesão por esforço agudo é a chave para reduzir o tempo de retorno ao esporte² e reduzir a dor ^3,4. Na medicina ocidental moderna, os primeiros socorros clínicos para lesões musculares seguem os princípios de repouso, gelo, com....

Protocol

Os procedimentos envolvendo animais foram aprovados pelo Comitê de Cuidados e Uso Institucional da Universidade de Medicina Chinesa de Hunan.

1. Montagem do massageador rolante

1. Selecione um massageador que consista em um rolo de borracha, suporte de garfo, mola, defletor limite, tala de ajuste, parafuso e alça de acrílico (Figura 1). Certifique-se de que o rolo de borracha mede 3 cm de comprimento e 1,6 cm de diâmetro, a mola mede 3 .......

Discussion

Aqui, descrevemos um protocolo para Tuina no tratamento da lesão muscular esquelética em ratos e, em seguida, analisamos o grau de lesão muscular esquelética após o tratamento para verificar a eficácia do método. Notadamente, modelos de lesão muscular esquelética de ratos, incluindo, mas não se limitando a, indução de drogas (notaxina, bupivacaína)16, contusão contusa ²⁶, esmagamento 27 e isquemia-reperfusão²⁸, podem ser intervencionados com Tuina.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1 mL syringe	JIANGXI FENGLIN	20220521
1.5 microtubes	Servicebio	EP-150X-J
15 mL centrifuge tube	Servicebio	EP-1501-J
30G needle	CONPUVON	220318
5 mL blood collection tube	Servicebio	QX0023
Acrylic handle	Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd	65643645
Adjustment splint	CREROMEM	20220729
Cotton Swab	INOHV	22080215
Enzyme-labeled Instrument	Rayto	RT-6100
Ethanol	INOHV	211106
Fork holder	Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd	JL001
Hair removal cream	Veet, France	LOTC190922002
Hematoxylin dyeing solution set	Wuhan Google Biotech	G1005
Imaging system	Nikon, Japan	Nikon DS-U3
IODOPHOR disfecting solution	Hale&Hearty	20221205
Light microscope	Nikon, Japan	Nikon Eclipse E100
Limit baffle	CREROMEM	20220724
Notexin	Latoxan S.A.S.	L8104-100UG
Pentobarbital sodium	Merck KGaA	P3761
Rat creatine kinase (CK) ELISA kit	LunChangShuoBiotech	YD-35237
Rat fatty acid-binding protein 3 (FABP3) ELISA kit	LunChangShuoBiotech	YD-35730
Rubber roller	Hebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd	202207
Screw	Weiyan Hardware	B05Z122
Sprague Dawley rats	Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.	SYXK2019-0009
Spring	Bingzhang Hardware	TH001
Surgical blade	Covetrus	#23
Weigh controller	Iyoys	HY-XSQ