強膜過剰発現と2D一軸張力 の組み合わせによる 人工多能性幹細胞由来iTenocytesの生成

腱と靭帯の修復における今日の課題は、腱の再生を促進するための細胞ベースの治療の適切で効果的な候補を特定する必要があります。間葉系間質細胞(MSC)は、腱修復のための潜在的な組織工学戦略として研究されています。それらは多能性であり、 in vivoで再生する可能性がありますが、自己複製能力には限界があり、表現型の不均一性を示します。人工多能性幹細胞(iPS細胞)は、その高い自己複製能力と比類のない発生可塑性により、これらの制限を回避することができます。テノサイトの発生において、強膜(Scx)は腱分化の重要な直接的な分子調節因子です。さらに、機械調節は、胚性腱の発達と治癒を導く中心的な要素であることが示されています。そのため、私たちは、テノサイトの生成に不可欠である可能性のある生物学的および機械的刺激の相乗効果をカプセル化するプロトコルを開発しました。iPS細胞は間葉系間質細胞(iMSC)となるように誘導され、フローサイトメトリーにより古典的な間葉系間質細胞マーカーで特徴付けられました。次に、レンチウイルスベクターを用いて、iMSCを形質導入し、安定的に過剰発現するSCX(iMSC^SCX+) を発現させた。これらのiMSC^SCX+ 細胞は、2Dバイオリアクターを用いた一軸引張荷重により、さらにiTenocytesに成熟させることができます。得られた細胞は、初期および後期の腱マーカーのアップレギュレーション、ならびにコラーゲン沈着を観察することによって特徴付けられました。iTenocytesを生成するこの方法は、腱細胞治療アプリケーション用の潜在的に無制限の既製の同種細胞源を開発する研究者を支援するために使用できます。