A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
פציעת הקפאה בשריר המסה של עכבר להקמת מודל פיברוזיס שריר הלסת
In This Article
Summary
מטרת פרוטוקול זה היא לבסס מודל פיברוזיס שרירי הפנים. השוואת ההיסטולוגיה בין מעסה עכברים לשריר הקדמי טיביאליס לאחר פציעה קפואה אישרה פיברוזיס שריר המעסה. מודל זה יאפשר חקירה נוספת של המנגנון העומד בבסיס פיברוזיס שריר הפנים.
Abstract
שריר הלסת מהווה תת-קבוצה של רקמת שריר השלד, עם מסלול אבולוציוני מובהק ומקור התפתחותי. בניגוד לשרירי הגפיים שמקורם בסומיט, שרירי הלסת מקורם בקשתות הענפיות, עם תרומות בלעדיות מהפסגה העצבית הגולגולתית. מחקר שנערך לאחרונה גילה כי התחדשות שונה גם בקבוצת שרירי הפנים. עם זאת, מנגנון הרגולציה הבסיסי עדיין לא נחשף. המודלים הנוכחיים להתחדשות שרירי השלד מתמקדים בעיקר בשרירי הגפיים והגו. בפרוטוקול זה, קרח יבש שימש לגרימת פציעת הקפאה בשריר המסה של העכבר ובשריר הטיביאליס הקדמי ליצירת מודל פיברוזיס של שריר הפנים. הדינמיקה הטמפורלית של תאי לוויין שריר ואבות פיברו-אדיפוגניים הייתה שונה בין שני השרירים, מה שהוביל לפגיעה בהתחדשות מיופייבר ולשקיעת מטריצה חוץ-תאית מוגזמת. בעזרת מודל זה, מחקר מעמיק יותר של התחדשות שרירים באזור orofacial יכול להתבצע כדי לפתח גישות טיפוליות עבור חולים עם מחלות orofacial .
Introduction
שרירי הלסת הם קריטיים בפעילויות פיזיולוגיות יומיומיות כגון מסטיקציה, דיבור, נשימה והבעות פנים1. עם זאת, בעיוותים אורופציאליים מולדים, שרירים אלה מפגינים שינויים אטרופיים ופיברוטיים, מה שמוביל לפגיעה בבריאות הגוף ובקוגניציה חברתית2. ניתוח שחזור פנים נותר טיפול הקו הראשון, אך עד 30-70% מהמטופלים לאחר הניתוח עדיין סובלים מאובדן שרירים ותפקוד לקוי של שרירים 3,4 כישלון התחדשות שריר הלסת מיוחס לגורמים פנימיים, שאינם ניתנים לתיקון על ידי ניתוח בלבד.
הופעתם של שרירי הלסת היא חידוש אבולוציוני, המלווה את ראש החוליות המורכב והלב הקאמרי
Protocol
כל ההליכים בבעלי חיים במחקר זה נבדקו ואושרו על ידי הוועדה האתית של בית הספר לסטומטולוגיה במערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (WCHSIRB-D-2020-114). עכברי C57BL/6 זכרים (בני 5 שבועות) גודלו במתקן מבוקר לחות (53 ± 2%) ובטמפרטורה מבוקרת (23 ± 2 מעלות צלזיוס) והיו במחזור אור/חושך של 12 שעות. ראה טבלת חומרים לפרטים .......
Representative Results
צביעה אדומה של HE וסיריוס (איור 4 ואיור משלים S1) חשפה התחדשות שרירים מלאה של TA במודל זה של פציעת הקפאה. לעומת זאת, MAS הציג רגנרציה לקויה של מיופייבר ושקיעת מטריצה חוץ-תאית מוגזמת. ההיסטולוגיה של שרירי MAS ו-TA שלמים מוצגת באיור 4A,B, כאשר ?.......
Discussion
ישנם מגוון מודלים של פציעות לחקר התחדשות שרירי השלד, כולל שימוש בגירויים פיזיים, כימיים וכירורגיים 10,11,12,13,14,15,16. קרדיוטוקסין ובריום כלוריד הם שני הכימיקלים הנפו?.......
Disclosures
למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.
Acknowledgements
מחקר זה נתמך על ידי מענקים מוועדת הבריאות והבריאות המחוזית של סצ'ואן (מספר מענק: 21PJ063) והקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מספר מענק: 82001031).
....Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 1 mL syringe | Shifeng Medical Apparatus and Instrument (Chengdu, Sichuan, China) | 1-ml syringe | / |
| Acetone | Chron Chemicals | Aceton | / |
| Adhesion microscope slides | Citotest Scientific | 188105 | / |
| Animal depilatory | Phygene Scientific | PH1877 | / |
| BSA (bovine serum albumin) | Solarbio Life Sciences | A8010 | / |
| DAPI | Solarbio Life Sciences | C0065 | / |
| Donkey anti-goat Alexa Fluor 488 | Abcam | ab150129 | 1:200 |
| donkey serum | Solarbio Life Sciences | SL050 | / |
| Dry Ice | Sinrro Technology (Chengdu, Sichuan, China) | rice-shaped dry ice | / |
| IFKine Red Donkey anti-rabbit | Abbkine Scientific Company | A24421 | 1:200 |
| Insulation barrels (big) | Thermos | D600 | / |
| Insulation barrels (small) | Polar Ware | 250B | / |
| Isoflurane | RWD Life Technology Company (Shenzhen, Guangdong, China) | R510-22 | / |
| Isopentane | MACKLIN | M813375 | / |
| Laminin | Sigma-Aldrich | L9393 | 1:1000 |
| Liquid nitrogen | Sinrro Technology (Chengdu, Sichuan, China) | / | / |
| M.O.M kit | Vector Laboratories | BMK-2202 | |
| Mice | Dashuo Biological Technology Company(Chengdu, Sichuan, China) | 5 weeks old | / |
| mounting medium | Solarbio Life Sciences | S2100 | / |
| Nertral balsam | Solarbio Life Sciences | G8590 | / |
| Pax7 | Developmental Studies Hybridoma Bank | Pax7 | 1:5 |
| Pdgfra | R&D systems | AF1062 | 1:40 |
| Sirus Red Staining Kit | Solarbio Life Sciences | G1472 | / |
| Surgical instruments (forceps, scissors, needle holder, scalpel, and suture) | Zhuoyue Medical Instrument (Suqian, Jiangsu, China) | / | / |
| Tissue-tek OCT | Sakura | 4583 | / |
| Triton | Shanghai Scigrace Biotech | ABIO-Biofroxx-0006A | / |
| Zoletil | Virbac | Zoletil 50 | / |
References
- Yoshioka, K., Kitajima, Y., Seko, D., Tsuchiya, Y., Ono, Y. The body region specificity in murine models of muscle regeneration and atrophy. Acta Physiologica. 231 (1), e13553 (2021).
- Worley, M. L., Patel, K. G., Kilpatrick, L. A. Cleft lip and palate.....
Reprints and Permissions
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionExplore More Articles
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved