Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Целью этого протокола является установление модели фиброза орофациальных мышц. Сравнение гистологии между жевательной мышцей мышей и передней большеберцовой мышцей после травмы обморожения подтвердило фиброз жевательной мышцы. Эта модель облегчит дальнейшее изучение механизма, лежащего в основе фиброза орофациальных мышц.

Abstract

Орофациальная мышца представляет собой подмножество скелетной мышечной ткани с четкой эволюционной траекторией и происхождением развития. В отличие от мышц конечностей, полученных из сомита, орофациальные мышцы берут начало от жаберных дуг, с исключительным вкладом черепного нервного гребня. Недавнее исследование показало, что регенерация также отличается в группе орофациальных мышц. Тем не менее, лежащий в основе механизм регулирования еще предстоит раскрыть. Современные модели регенерации скелетных мышц в основном сосредоточены на мышцах конечностей и туловища. В этом протоколе сухой лед использовался для индуцирования травмы замерзания жевательной мышцы мыши и передней большеберцовой мышцы для создания модели фиброза орофациальной мышцы. Временная динамика мышечных сателлитных клеток и фиброадипогенных предшественников различалась между двумя мышцами, что приводило к нарушению регенерации миоволокон и чрезмерному отложению внеклеточного матрикса. С помощью этой модели можно провести более глубокое исследование регенерации мышц в орофациальной области для разработки терапевтических подходов к пациентам с орофациальными заболеваниями.

Introduction

Орофациальные мышцы имеют решающее значение в повседневной физиологической деятельности, такой как жевание, речь, дыхание и мимика1. Однако при врожденных орофациальных деформациях эти мышцы демонстрируют атрофические и фиброзные изменения, что приводит к нарушению здоровья тела и социального познания2. Реконструктивная хирургия лица остается лечением первой линии, но до 30-70% послеоперационных пациентов по-прежнему страдают от потери мышечной массы и мышечной дисфункции 3,4 Неудача регенерации орофациальных мышц объясняется внутренними факторами, которые не мог....

Protocol

Все процедуры на животных в этом исследовании были рассмотрены и одобрены Этическим комитетом Западно-Китайской школы стоматологии Сычуаньского университета (WCHSIRB-D-2020-114). Самцы мышей C57BL/6 (в возрасте 5 недель) выращивались в помещении с контролируемой влажностью (53 ± 2%) и температурой (23.......

Representative Results

Окрашивание HE и Sirius Red (рис. 4 и дополнительный рисунок S1) выявили полную мышечную регенерацию ТА в этой модели травмы замерзания. Напротив, у MAS наблюдалось нарушение регенерации миоволокон и чрезмерное отложение внеклеточного матрикса. Гистология инт?.......

Discussion

Существует множество моделей травм для изучения регенерации скелетных мышц, включая использование физических, химических и хирургических стимулов 10,11,12,13,14,15,16.

Disclosures

У авторов нет конфликта интересов, который можно было бы раскрыть.

Acknowledgements

Это исследование было поддержано грантами Комитета по здравоохранению и благополучию провинции Сычуань (номер гранта: 21PJ063) и Национального фонда естественных наук Китая (номер гранта: 82001031).

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
1 mL syringeShifeng Medical Apparatus and Instrument (Chengdu, Sichuan, China)1-ml syringe/
AcetoneChron ChemicalsAceton/
Adhesion microscope slidesCitotest Scientific188105/
Animal depilatoryPhygene ScientificPH1877/
BSA (bovine serum albumin)Solarbio Life SciencesA8010/
DAPISolarbio Life SciencesC0065/
Donkey anti-goat Alexa Fluor 488Abcamab1501291:200
donkey serumSolarbio Life SciencesSL050/
Dry IceSinrro Technology (Chengdu, Sichuan, China)rice-shaped dry ice/
IFKine Red Donkey anti-rabbitAbbkine Scientific CompanyA244211:200
Insulation barrels (big)ThermosD600/
Insulation barrels (small)Polar Ware250B/
IsofluraneRWD Life Technology Company (Shenzhen, Guangdong, China)R510-22/
IsopentaneMACKLINM813375/
LamininSigma-AldrichL93931:1000
Liquid nitrogenSinrro Technology (Chengdu, Sichuan, China)//
M.O.M kitVector LaboratoriesBMK-2202
Mice  Dashuo Biological Technology Company(Chengdu, Sichuan, China)5 weeks old/
mounting mediumSolarbio Life SciencesS2100/
Nertral balsamSolarbio Life SciencesG8590/
Pax7Developmental Studies Hybridoma Bank Pax71:5
PdgfraR&D systemsAF10621:40
Sirus Red Staining KitSolarbio Life SciencesG1472/
Surgical instruments (forceps, scissors, needle holder, scalpel, and suture)Zhuoyue Medical Instrument (Suqian, Jiangsu, China)//
Tissue-tek OCTSakura4583/
TritonShanghai Scigrace BiotechABIO-Biofroxx-0006A/
ZoletilVirbacZoletil 50/

References

  1. Yoshioka, K., Kitajima, Y., Seko, D., Tsuchiya, Y., Ono, Y. The body region specificity in murine models of muscle regeneration and atrophy. Acta Physiologica. 231 (1), e13553 (2021).
  2. Worley, M. L., Patel, K. G., Kilpatrick, L. A. Cleft lip and palate.....

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Research

Education

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved