Intakte korte, mellomliggende og lange skjelettmuskelfibre oppnådd ved enzymatisk dissosiasjon av seks baklemmusmuskler hos mus: Utover flexor digitorum brevis

Skjelettmuskelfibre oppnådd ved enzymatisk dissosiasjon av musemuskler er en nyttig modell for fysiologiske eksperimenter. Imidlertid omhandler de fleste papirene de korte fibrene i flexor digitorum brevis (FDB), som begrenser omfanget av resultater som omhandler fibertyper, begrenser mengden biologisk materiale som er tilgjengelig, og hindrer en klar sammenheng mellom cellulære fysiologiske fenomener og tidligere biokjemisk og dynamisk kunnskap oppnådd i andre muskler.

Dette papiret beskriver hvordan du får intakte fibre fra seks muskler med forskjellige fibertypeprofiler og lengder. Ved hjelp av C57BL / 6 voksne mus viser vi muskeldisseksjons- og fiberisolasjonsprotokollen og demonstrerer fibrenes egnethet for Ca²⁺ forbigående studier og deres morfometriske karakterisering. Fibertypesammensetningen av musklene presenteres også. Ved dissosiering ga alle muskler intakte, levende fibre som trakk seg raskt sammen i mer enn 24 timer. FDB ga korte (<1 mm), peroneus digiti quarti (PDQA) og peroneus longus (PL) ga mellomliggende (1-3 mm), mens extensor digitorum longus (EDL), extensor hallucis longus (EHL) og soleusmuskler frigjorde lange (3-6 mm) fibre.

Når det ble registrert med det raske fargestoffet Mag-Fluo-4, viste Ca²⁺ transienter av PDQA-, PL- og EHL-fibre den raske, smale kinetikken som minner om morfologitypen II (MT-II), kjent for å korrespondere med type IIX- og IIB-fibre. Dette stemmer overens med det faktum at disse musklene har over 90% av type II fibre sammenlignet med FDB (~ 80%) og soleus (~ 65%). Når vi beveger oss utover FDB, demonstrerer vi for første gang dissosiasjonen av flere muskler, som gjør fibre som spenner over en rekke lengder mellom 1 og 6 mm. Disse fibrene er levedyktige og gir raske Ca²⁺ transienter, noe som indikerer at MT-II kan generaliseres til IIX og IIB raske fibre, uavhengig av muskelkilde. Disse resultatene øker tilgjengeligheten av modeller for modne skjelettmuskelstudier.