A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
* These authors contributed equally
Механически изолированная стромальная васкулярная фракция (SVF) в сочетании с фибриновым гидрогелем является простым и эффективным носителем жизнеспособных стромальных клеток, полученных из жировой ткани, по различным показаниям, включая тканевую инженерию и/или цели заживления ран. Здесь мы представляем получение механической конструкции SVF (mSVF)-фибринового гидрогеля для трансляционных исследований и клинического применения.
Регенеративный потенциал стромальных клеток (ASC), полученных из жировой ткани (ASC), привлек значительное внимание в регенеративных и трансляционных исследованиях. В прошлом экстракция этих клеток из жировой ткани требовала многоступенчатого ферментативного процесса, в результате чего получалась гетерогенная клеточная смесь, состоящая из ACS и других клеток, которые совместно называются стромально-васкулярной фракцией (SVF). Недавно представленные протоколы механической изоляции SVF (mSVF) требуют меньше времени и обходят нормативные требования. Недавно мы предложили протокол, который генерирует mSVF, богатую стромальными клетками, на основе комбинации эмульсификации и центрифугирования. Одной из актуальных проблем в применении mSVF для лечения ран является отсутствие каркаса, обеспечивающего защиту от механических манипуляций и высыхания. В прошлом было показано, что гидрогели фибрина являются полезным дополнением к переносу клеток для заживления ран. В данной работе мы описываем этапы подготовки гидрогелевой конструкции mSVF-фибрина в качестве нового подхода к трансляционным исследованиям и клиническому применению.
За последние несколько лет регенеративная пластическая хирургия стала дополнительным столпом пластической хирургии1. Регенеративная пластическая хирургия направлена на восстановление поврежденных тканей путем переноса растворимых факторов, клеток и тканей, собранных у пациента, для содействия восстановлению тканей минимально инвазивнымспособом. Стволовые клетки (ASC), полученные из жировой ткани, привлекли внимание благодаря своей способности дифференцироваться в несколько мезенхимальных линий, что делает их многообещающим кандидатом для исследований в области реген....
Данное исследование было выполнено в соответствии с Хельсинкской декларацией. Все взрослые доноры предоставили письменное информированное согласие на дальнейшее использование собранных образцов тканей. Протокол соответствует руководящим принципам комитета по эт.......
Анализ на резазурин
Сначала мы изучили жизнеспособность клеток mSVF in vitro . С этой целью мы проводили анализ жизнеспособности клеток резазурина на 0, 3 и 7 день. Жизнеспособность клеток в 0, 3 и 7 дней из четырех образцов показана на рисунке 1. З.......
Механическая изоляция SVF представляет собой элегантную альтернативу традиционному ферментативному подходу и обеспечивает широкий доступ к клиническомуприменению. Фактически, mSVF, как предложено в настоящей рукописи, уже используется в клинической прак.......
Bong-Sung Kim поддерживается Немецким научно-исследовательским обществом (KI 1973/2-1) и Фондом медико-биологических исследований Novartis (#22A046).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
12-Wellplate | Sarstedt | 83.3921 | |
4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) | Biochemica | A1001.0010 | |
50 mL-Falcon | Falcon | 352070 | |
Absorbent Towels, Two Pack | Halyard | 89701 | |
Alamar blue 25 mL | Invitrogen | DAL1025 | |
Albumin, Bovine (BSA) | VWR | 0332-500G | |
Biotek Cytation 5 | Agilent | Cell Imaging Multimode Microplate Reader | |
CaCl2 | Sigma-Aldrich | C5670-500G | |
Cryostat | Microtome | ||
DMEM with 4,5 g/L glucose,with L-Glutamine, with sodium pyruvate | VWR | 392-0416 | |
DPBS | Gibco | 14190-144 | |
Epinephrin | Sigma-Aldrich | E4250 | |
Fetal Bovine Serum | Biowest | S181H-500 | |
Fibrinogen Human Plasma 100 mg | Sigma-Aldrich | 341576-100MG | |
Formalin | Fisher Scientific | SF100-4 | |
Formalin 4% | Formafix | 1308069 | |
FSC 22-Einbettmedium, blau | Biosystems | 3801481S | |
Hematoxylin & Eosin Solution | Sigma-Aldrich | H3136 / HT110132 | |
Lactated Ringer’s Solution 1000 mL | B Braun | R5410-01 | |
Mercedes Cannula 4mm | MicroAire | PAL-R404LL | |
NaCl 0.9% | Bbraun | 570160 | |
OCT Embedding Matrix 125 mL | CellPath | KMA-0100-00A | |
Paraformaldehyde | Fisher Scientific | 10342243 | |
PBS 1% | Sigma-Aldrich | P4474 | |
PenStrep | Sigma-Aldrich | P4333-100ML | |
Petridish 150mm | Sarstedt | 83.1803 | |
Phalloidin-iFluor 488 Reagent | Abcam | ab176753 | |
Sterile Syringe 20 mL Luer | HENKE-JECT | 5200-000V0 | |
Sterile Syringe 30 mL Luer-Lock | BD | 10521 | |
Thrombin from Human Plasma | Sigma-Aldrich | T6884-100UN | |
Tranexamic acid | Orpha Swiss | 6837093 | |
Tulipfilter 1.2 | Lencion Surgical | ATLLLL | |
Tulipfilter 1.4 | Lencion Surgical | ATLLLL |
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved