ヒト胚性幹細胞由来網膜色素上皮細胞の最適段階での凍結保存

ヒト胚性幹細胞(hESC)に由来する網膜色素上皮(RPE)細胞は、網膜変性疾患の個人における細胞補充療法のための優れた細胞源です。しかし、これらの治療細胞の安定的かつ安全なバンキングに関する研究は少ないです。凍結保存後のRPE細胞の非常に変動する細胞生存率と機能回復は、最も一般的に遭遇する問題です。本プロトコールでは、元の実験条件に基づいて凍結に最適な細胞相を選択することで、解凍後の細胞回収率を最高にすることを目指しました。細胞は、5-エチニル-2′-デオキシウリジン標識アッセイを使用して決定された指数関数的段階で凍結され、融解後の細胞生存率と回収率が向上しました。融解後まもなく、長い分化プロセスとは無関係に、安定で機能的な細胞が得られました。ここで説明する方法により、hESC由来RPE細胞の保存と融解を簡便、効率的、かつ安価に行うことができます。このプロトコルはRPE細胞に焦点を当てていますが、この凍結戦略は他の多くの種類の分化細胞に適用することができます。