ההשפעות והמנגנונים נגד יתר לחץ דם של מרתח Huotan Jiedu Tongluo בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H

Summary

כאן, אנו מציגים פרוטוקול לגרימת יתר לחץ דם מסוג H ולהעריך את ההשפעות נגד יתר לחץ דם של מרתח Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD) המנוהל תוך גזסטרית. בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H, HTJDTLD היה בעל השפעות יעילות נגד יתר לחץ דם, שייתכן שהיו קשורות לעיכוב של הפעלת מסלול אפופטוזיס הנגרם על ידי לחץ אנדופלסמי (ER).

Abstract

יתר לחץ דם מסוג H, שהוא צורה ספציפית של יתר לחץ דם המאופיין ברמות גבוהות של הומוציסטאין בפלזמה (Hcy), הפך לאתגר גדול בתחום בריאות הציבור ברחבי העולם. מחקר זה בדק את ההשפעות ההיפוטנסיביות ואת המנגנונים הבסיסיים של מרתח Huotan Jiedu Tongluo (HTJDTLD), נוסחה יעילה ביותר ברפואה סינית מסורתית המשמשת בדרך כלל לטיפול בהיצרות כלי דם. מתיונין שימש לגרימת יתר לחץ דם מסוג H בחולדות, ו-HTJDTLD ניתן תוך גסטרית. לאחר מכן, לחץ הדם הסיסטולי והדיאסטולי של העורק הקאודלי של חולדות נמדד על ידי מנומטריה קאודלית לא פולשנית של חולדות. הערכה היסטולוגית של אבי העורקים בוצעה על ידי צביעת hematoxylin-eosin (HE). בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA) שימשה למדידת רמות Hcy, ותגובת שרשרת כמותית של פולימראז שעתוק לאחור (qRT-PCR) והקרישה המערבית שימשו לקביעת רמות ה-mRNA והחלבון של חלבון מווסת גלוקוז 78 (GRP78), גורם הקשור לקולטן נמק הגידול (TNF) גורם 2 (TRAF2), קינאזות c-Jun N-terminal (JNK) וקספאז-3. התוצאות הראו כי HTJDTLD הוריד באופן משמעותי את לחץ הדם, הקל על נגעים היסטופתולוגיים והוריד את רמות Hcy לאחר טיפול במתיונין. יתר על כן, HTJDTLD עיכב באופן משמעותי את ביטוי הגנים והחלבונים של GRP78, JNK, TRAF2 וקספז 3, המעורבים בעיקר במסלול אפופטוזיס המושרה על ידי לחץ ברשתית האנדופלסמית (ER). בסך הכל, התוצאות הצביעו על כך של- HTJDTLD היו השפעות יעילות נגד יתר לחץ דם בחולדות עם יתר לחץ דם מסוג H וחשפו את המנגנונים נגד יתר לחץ דם הקשורים לעיכוב הפעלת מסלול אפופטוזיס הנגרם על ידי לחץ ב- ER.

Introduction

יתר לחץ דם, גורם סיכון מרכזי להתקף לב, שבץ ואי ספיקת כליות, הפך לאתגר משמעותי בתחום בריאות הציבור המשפיע על מיליארד אנשים ברחבי העולם¹. הומוציסטאין (Hcy), חומצת אמינו המכילה קבוצת תיול, היא מתווך מטבולי חיוני של מטבוליזם מתיונין. יתר לחץ דם עם רמות גבוהות של Hcy בפלזמה מוגדר כיתר לחץ דם מסוג H, אשר יכול להיות גורם סיכון משמעותי להתרחשות והישנות של מחלות לב וכלי דם כגון שבץ^{מוחי 2,3}. מחקרים אחרונים דיווחו כי תושבות משותפת של יתר לחץ דם מסוג H עלולה להחמיר את תופעות הלוואי^{של מחלות לב} וכלי דם וכלי דם 4. יש לציין כי 75% מהחולים בסין עם יתר לחץ דם מסוג H סובלים מיתר לח....

Protocol

כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) של אוניברסיטת צ'אנגצ'ון לרפואה סינית. החומרים מפורטים בטבלת החומרים.

1. בעלי חיים וטיפול

1. חלקו באופן אקראי 50 חולדות בוגרות עם יתר לחץ דם ספונטני (SHRs) (זכר, בן 50 יום) לחמש קבוצ.......

Discussion

יתר לחץ דם היא אחת מהפרעות הלב וכלי הדם הנפוצות ביותר המשפיעה על שליש מהאוכלוסייה הבוגרת ומעלה את הסיכון לשבץ מוחי, מחלות לב כליליות ואי ספיקת לב וכליות⁸. יתר לחץ דם מסוג H הוא סוג מיוחד של יתר לחץ דם המתייחס להתרחשות משותפת של יתר לחץ דם ראשוני ורמות הומוציסטאין מוגברות ומשך תש.......

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR	Yeasen,China	11149ES	cDNA synthesis kit
Anti-beta-actin antibody	Bioss, China	bs-0061R
Anti-caspase-3 antibody	Bioss, China	bs-0081R
Anti-GPR78 antibody	Abcam, USA	ab108513
Anti-JNK antibody	Abcam, USA	ab76572
Anti-p-JNK antibody	Bioss, China	bsm-52462R
Anti-rabbit IgG antibody	Bioss, China	bs-0295G-HRP
Anti-TRAF2 antibody	Bioss, China	bs-22372R
Bio-Rad CFX96 Touch system	Bio-Rad	CFX96	real-time PCR detection system
ECL Western Blot Substrates	Merck, MA, USA	WBULP-10ML
Enalapril maleate folic acid tablets	Yangzijiang Pharmaceutical Company, China	20040991
FastStart SYBR Green Master	Sigma	FSSGMMRO
Fructus Trichosanthis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Hirudo	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
intelligent noninvasive sphygmomanometer	Beijing Softron Biotechnology company	BP-2010A
Lonicerae Japonicae Flos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Methionine	Sigma, USA	M9500
Radix Angelicae Sinensis	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Glycyrrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Nardostachyos	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Rhodiolae Crenulatae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix et Rhizoma Salviae Miltiorrhizae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Radix Scrophulariae	The First Affiliated Hospital of Changchun University of Traditional Chinese Medicine, China	No catalog number
Rat Hcy ELISA Kits	Shanghai Meimian Industrial Company, China	MM-0293R2
RIPA buffer	Shanghai Beyotime Biotechnology company	P0013B