इन-वीवो चूहा ट्राइजेमिनल नाड़ीग्रन्थि में संवेदी न्यूरॉन्स की कैल्शियम इमेजिंग

आनुवंशिक रूप से एन्कोडेड कैल्शियम संकेतक (जीईसीआई) लक्षित सेल आबादी में इंट्रासेल्युलर कैल्शियम में परिवर्तन की निगरानी के लिए इमेजिंग तकनीकों को सक्षम करते हैं। उनका बड़ा सिग्नल-टू-शोर अनुपात जीईसीआई को संवेदी न्यूरॉन्स में उत्तेजना-विकसित गतिविधि का पता लगाने के लिए एक शक्तिशाली उपकरण बनाता है। जीईसीआई न्यूरॉन्स की संख्या के साथ उत्तेजना एन्कोडिंग के जनसंख्या-स्तर के विश्लेषण की सुविधा प्रदान करते हैं जिनका एक साथ अध्ययन किया जा सकता है। यह जनसंख्या एन्कोडिंग विवो में सबसे उपयुक्त रूप से किया जाता है। पृष्ठीय रूट गैन्ग्लिया (डीआरजी), जो गर्दन के नीचे दैहिक और आंत संरचनाओं को संक्रमित करने वाले संवेदी न्यूरॉन्स के सोमा का घर है, विवो इमेजिंग में सबसे अधिक उपयोग किया जाता है क्योंकि इन संरचनाओं को अपेक्षाकृत आसानी से एक्सेस किया जाता है। हाल ही में, इस तकनीक का उपयोग चूहों में ट्राइजेमिनल गैंग्लियन (टीजी) में संवेदी न्यूरॉन्स का अध्ययन करने के लिए किया गया था जो मौखिक और क्रानियोफेशियल संरचनाओं को संक्रमित करते हैं। डीआरजी के अलावा टीजी का अध्ययन करने के कई कारण हैं, जिसमें मौखिक और क्रानियोफेशियल संरचनाओं के लिए विशिष्ट दर्द सिंड्रोम की लंबी सूची शामिल है जो संवेदी न्यूरॉन गतिविधि में परिवर्तन को दर्शाती है, जैसे कि ट्राइजेमिनल न्यूराल्जिया। आनुवंशिक उपकरणों की उपलब्धता के कारण डीआरजी और टीजी न्यूरॉन्स के अध्ययन में चूहों का सबसे अधिक उपयोग किया जाता है। हालांकि, आकार में अंतर, हैंडलिंग में आसानी और संभावित रूप से महत्वपूर्ण प्रजातियों के अंतर के साथ, माउस टीजी न्यूरॉन्स के बजाय चूहे का अध्ययन करने के कारण हैं। इस प्रकार, हम विवो में इमेजिंग चूहा टीजी न्यूरॉन्स के लिए एक दृष्टिकोण विकसित. हमने नवजात पिल्ले (पी 2) को एएवी एन्कोडिंग GCaMP6s के साथ इंट्रापेरिटोनली इंजेक्ट किया, जिसके परिणामस्वरूप टीजी और डीआरजी न्यूरॉन्स दोनों का >90% संक्रमण हुआ। टीजी क्रैनियोटॉमी और सजावट के बाद वयस्क में कल्पना की गई थी, और चेहरे के मैंडिबुलर और मैक्सिलरी क्षेत्रों की उत्तेजना के बाद टीजी न्यूरॉन्स में जीसीएएमपी 6 के प्रतिदीप्ति में परिवर्तन की निगरानी की गई थी। हमने पुष्टि की कि प्रतिदीप्ति में वृद्धि परिधीय तंत्रिका ब्लॉक के साथ उत्तेजना-विकसित थी। हालांकि इस दृष्टिकोण के कई संभावित उपयोग हैं, हम इसका उपयोग परिधीय तंत्रिका चोट के बाद बदले गए टीजी न्यूरॉन्स के उप-जनसंख्या (ओं) को चिह्नित करने के लिए कर रहे हैं।