Os autores agradecem aos cuidadores dos animais por cuidarem dos coelhos e seu trabalho compassivo e dedicado. Obrigado a Kai Diederich pela revisão do manuscrito.

Treinamento Baseado em Reforço Positivo para Procedimentos de Rotina de Criação de Coelhos

Os autores declaram não haver conflitos de interesse relacionados a esta publicação.

Entre 2015 e 2019, mais de 49 milhões de animais foram utilizados para fins científicos na União Europeia (e na Noruega); 1.745.037 (3,5%) deles eram coelhos1. Os coelhos são usados principalmente para pesquisa regulatória (por exemplo, controle de qualidade, toxicidade e outros testes de segurança, incluindo farmacologia) e produção de rotina de substâncias biológicas (por exemplo, produtos à base de sangue)2. Embora sejam feitos esforços para substituir experimentos com animais por métodos sem animais, o uso de animais ainda é necessário para alguns desses propósitos. Sempre que um experimento com animais não puder ser substituído, é crucial reduzir o número de animais e refinar as condições experimentais, bem como as condições de alojamento e criação para minimizar o sofrimento. Russel e Burch descreveram essa estratégia como o princípio dos 3R (substituir, reduzir, refinar) em 19593 e, em 2010, foi transposta para a Diretiva 2010/63/UE relativa à proteção dos animais de laboratório utilizados para fins científicos4. O papel do refinamento, às vezes chamado de 'Cinderela' dos 3Rs5, ganhou importância crescente. Embora a substituição e a redução sejam estratégias a longo prazo para atingir o objetivo final da diretiva de substituir totalmente as experiências com animais, o aperfeiçoamento permite a melhoria imediata do bem-estar dos animais5, o que, por sua vez, tem potencial para melhorar a qualidade científica6. As partes essenciais do refinamento são o manuseamento e a formação dos animais, tal como referido no anexo III da Diretiva 2010/63/UE. A Diretiva estipula que as instalações para animais devem projetar programas de habituação e treinamento para os animais de laboratório adaptados à espécie, procedimento e projeto4. O Apêndice A do ETS nº 123 sugere que o pessoal dos animais de laboratório gasta tempo "conversando, manuseando, treinando e cuidando dos animais"7.
Alguns procedimentos de manuseio causam estresse, especialmente para presas terrestres, como coelhos. Exemplos são ser encurralado, contido (ou seja, agarrado por um humano, segurado nos braços de um humano ou imobilizado por um dispositivo) e levantado (ou seja, levantado do chão) para uma inspeção de saúde ou procedimentos experimentais8. Uma pesquisa com foco em coelhos de estimação revelou que 57-61% deles lutaram ao serem levantados 9,10 e alguns até mostraram agressão relacionada ao medo (ou seja, morder)11. Isso enfatiza a necessidade de técnicas suaves de manuseio e treinamento. Já foi demonstrado para outros pequenos mamíferos, como camundongos, que técnicas de manuseio suave diminuem a ansiedade12. Além disso, o manuseio suave em combinação com o treinamento reduz o estresse, a ansiedade e o comportamento semelhante à depressão em camundongos13. Em macacos rhesus e chimpanzés, as medidas fisiológicas relacionadas ao estresse foram menos afetadas quando eles foram previamente treinados em um procedimento14,15. Pode-se supor que, se um animal pode optar por participar voluntariamente do treinamento, ele pode se envolver ativamente e controlar a situação, o que melhora o bem-estar do animal e também pode contribuir para dados científicos mais robustos e confiáveis16.
Muitos procedimentos de treinamento de animais dependem de princípios de condicionamento operante, particularmente o uso de reforço positivo e modelagem 17,18,19. O condicionamento operante requer que um animal provoque comportamentos que podem ser aumentados ou diminuídos20. Existem quatro contingências comuns que são usadas para descrever o condicionamento operante: reforço positivo e negativo, bem como punição positiva e negativa21,22. Em coelhos, a punição positiva é usada quando uma pessoa se aproxima (estímulo indesejado) de um animal para afastá-lo ou em direção a um determinado local23. No contexto do manuseio de um coelho na mesa de exame, um exemplo de reforço negativo é a remoção da pressão (estímulo indesejado) no corpo do coelho quando o coelho fica parado; Um exemplo de punição negativa é retirar uma recompensa alimentar (estímulo desejado) quando o coelho começa a lutar. Nem punição positiva/negativa nem reforço negativo são recomendados no treinamento de animais. A punição causa efeitos emocionais negativos24, como angústia como mostrado em cães25. Em vez disso, o reforço positivo deve ser o método de escolha no treinamento de animais25,26. O treinamento de reforço positivo (PRT) significa que um estímulo desejável (por exemplo, uma recompensa alimentar) é fornecido depois que o animal mostrou um comportamento desejado, o que aumenta a probabilidade de que o animal exiba o comportamento desejado novamente no futuro27. O PRT geralmente envolve a aplicação de um reforçador condicionado. Um reforçador condicionado (reforçador secundário) geralmente é um estímulo neutro, como um som, que o animal aprende a associar a um reforçador incondicionado (reforçador primário, por exemplo, recompensa alimentar)28. Após o animal apresentar o comportamento desejado, o reforçador condicionado é imediatamente apresentado, seguido da apresentação da recompensa alimentar26. Um exemplo bem conhecido de PRT é o treinamento com clicker, onde um clicker é usado para produzir um clique como um reforçador secundário26.
O treinamento deve seguir padrões previsíveis, o que é alcançado através da criação de um protocolo de treinamento. O protocolo de treinamento descreve como um comportamento objetivo pode ser alcançado passo a passo (ou seja, modelagem comportamental), enquanto cada etapa é definida por critérios objetivos e deve ser facilmente realizada26. Se o treinamento seguir um protocolo específico, é possível que a equipe de animais de laboratório alterne com o treinamento dos animais. É importante notar que o pessoal precisa conhecer os princípios das técnicas de aprendizagem e treinamento para aplicá-los corretamente26. O treinamento de animais geralmente incorpora modelagem comportamental. A modelagem comportamental à mão foi deliberadamente usada pela primeira vez por Skinner e colegas no início dos anos 194029. Em contraste, em trabalhos anteriores, Skinner se concentrou em "fazer pequenas mudanças no ambiente físico para implementar um programa de aproximação sucessiva"29. Em um artigo publicado na Scientific American, ele explicou que reforçar um comportamento aumenta a probabilidade de que o comportamento seja repetido, o que "torna possível moldar o comportamento de um animal quase como um escultor molda um pedaço de argila"30. Desde então, a modelagem tem experimentado uma importância crescente para animais em cativeiro 29,30,31,32. Para reproduzir e aprimorar protocolos de modelagem, é fundamental avaliar os protocolos de forma sistemática e objetiva 33,34,35,36.
Uma revisão sistemática e meta-análise publicada recentemente por Pfaller-Sadovsky et al. descobriu que o reforço condicionado foi mais frequentemente estudado em cavalos e cães, embora gatos, gado, peixes, cabras e primatas não humanos também tenham sido investigados37. Na ciência de animais de laboratório, o PRT é amplamente utilizado para primatas não humanos 38,39,40 e cães41,42. Além disso, porcos43, cabras44 e até pequenos mamíferos, como camundongos13 e ratos 45,46,47, foram treinados com sucesso usando um clicker em laboratório. Até onde sabemos, a introdução de PRT para coelhos de laboratório ainda não foi relatada48; A literatura revisada por pares existente publicada há várias décadas está desatualizada e não atende aos critérios da pesquisa ética moderna. Embora poucas informações não revisadas por pares sugiram que os coelhos possam ser treinados com sucesso usando o PRT49, parece haver uma falta de conhecimento sobre protocolos de treinamento adequados para coelhos alojados em instalações para animais de laboratório. As razões subjacentes podem variar. Por exemplo, as técnicas de treinamento usadas podem não ser descritas em detalhes em artigos de pesquisa ou os dados são gerados para pesquisa regulatória e, portanto, não são publicados. Além disso, os coelhos podem não ser o foco principal da pesquisa de refinamento, uma vez que outras espécies, como camundongos e ratos, são usadas com mais frequência em pesquisas. Como os coelhos podem mascarar o estresse e o desconforto extremamente bem, seu estado emocional negativo ao serem manuseados pode muitas vezes não ser reconhecido. O tamanho de um coelho permite que os humanos contenham esses animais para procedimentos, enquanto outras espécies, como primatas não humanos, não podem ser seguradas com as mãos para intervenções semelhantes sem serem gravemente feridas50. No entanto, esses fatos não devem impedir o desenvolvimento ou compartilhamento de protocolos de PRT para coelhos de laboratório.
Em relação aos benefícios potenciais do PRT, foram feitas primeiras tentativas para preencher a lacuna de conhecimento sobre protocolos de treinamento adequados para coelhos de laboratório. Para facilitar os procedimentos de rotina, como manuseio, inspeções sanitárias e pesagem, foram desenvolvidos protocolos de treinamento e avaliada sua viabilidade para coelhos brancos da raça Nova Zelândia. Comparações foram realizadas para avaliar se a técnica de manejo alternativo descrita nos protocolos de treinamento era menos aversiva do que a técnica de manejo convencional e se os protocolos de treinamento podem servir como medidas de refinamento. A Figura 1 demonstra o cronograma do presente estudo.
Manutenção de animais
Treze coelhos brancos da Nova Zelândia fêmeas foram obtidos de fontes comerciais (chegada ao biotério com aproximadamente sete semanas de idade). Os animais estavam livres de todos os patógenos virais, bacterianos e parasitários listados nas recomendações da FELASA51. Foram utilizadas roupas e equipamentos de proteção (luvas, máscaras, redes de cabelo) na condução das etapas do presente protocolo. Um grupo de seis e um grupo de sete animais foram alojados juntos em um curral de 2,8 m × 2,8 m (alojamento no chão), respectivamente. O chão foi coberto com material de cama de madeira fino e escamoso (autoclavado). Além disso, o material de nidificação e a lã de papel estavam espalhados em cima da cama. Três casas plásticas com duas aberturas cada (37 cm × 60 cm; altura 30 cm) e um túnel plástico (comprimento: 58 cm; diâmetro: 16 cm) serviram como abrigos. Além disso, foram fornecidos itens de enriquecimento, como blocos de madeira, bolas de feno e salgueiro e lanches cheios de pellets de comida, que caem ao mover a bola. Os coelhos tinham livre acesso a água da torneira, comida peletizada e feno autoclavado, bem como palha. Mais informações sobre alimentos e itens de enriquecimento estão listadas na Tabela de Materiais. A sala dos animais era limpa às quintas-feiras.
Os coelhos foram mantidos em condições padrão (temperatura ambiente e umidade relativa do ar dadas como média ± desvio padrão: 20,3 ± 0,4 °C e 50 ± 5%) em um ciclo claro:escuro de 12:12 h (luz artificial com incidência adicional de luz do dia). Um rádio foi ligado 30 minutos antes do início da fase de luz por aproximadamente 8 h para habituar os coelhos aos ruídos do ambiente.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Bed-r&#8217;Nest</td>
			<td>The Andersons, Inc., Maumee, USA</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Finger Clicker</td>
			<td>ASCO</td>
			<td></td>
			<td>https://ascoshop.de/products/fingerclicker</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>G*Power</td>
			<td></td>
			<td>version 3.1.9.7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heu-Proppen</td>
			<td>Ssniff Spezialdi&#228;ten GmbH, Soest, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBM Corp. Released 2020. IBM SPSS Statistics for Windows,&#160; Armonk, NY: IBM Corp</td>
			<td>IBM Corp</td>
			<td>Version 27.0.</td>
			<td>in the manuscript referred to as &#34;software for advanced statistical analysis&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kaninchen Haltung + 25 mg/kg Salinomycin-Natrium-Sondermischung</td>
			<td>Ssniff Spezialdi&#228;ten GmbH, Soest, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lignocel block</td>
			<td>Lignocel J. Rettenmaier &#38;S&#246;hne GmbH + Co KG, Rosenberg, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lillebro gesch&#228;lte Sonnenblumenkerne&#8221;, Martina GmbH, M&#252;nchen, Germany) and Rainbow Foraging Bits (Bio-Serv, Flemington, USA)&#160;</td>
			<td>Martina GmbH, M&#252;nchen, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Excel for Microsoft 365 MSO</td>
			<td>Microsoft Corporation</td>
			<td>Version 2305</td>
			<td>in the manuscript referred to as &#34;spread sheet&#34;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>New Zealand White rabbits&#160;</td>
			<td>Charles River Laboratories France</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plattformwaage DE 35K5DL</td>
			<td>KERN &#38; SOHN GmbH, Balingen-Frommern, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Premium scientific bedding (fine &#38; flake)</td>
			<td>SAFE, Augy, France</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rainbow Foraging Bits</td>
			<td>Bio-Serv, Flemington, USA</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Snackball f&#252;r Kaninchen &#8211; 7 cm</td>
			<td>TRIXIE Heimtierbedarf GmbH &#38; Co. KG, Tarp, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Target stick with integrated clicker</td>
			<td>TRIXIE Heimtierbedarf GmbH &#38; Co. KG, Tarp, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trixi Transportbox Capri Open Top</td>
			<td>TRIXIE Heimtierbedarf GmbH &#38; Co. KG, Tarp, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weiden-Heuball</td>
			<td>JR FARM GmbH, Holzheim-Pessenburgheim, Germany</td>
			<td></td>
			<td>The successful implementation of the protocol does not depend on this particular product. You could use comparable products by other companies.&#160;</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

training laboratory rabbits to refine routine husbandry procedures

Técnicas de manejo e treinamento não aversivas para animais de laboratório são necessárias para facilitar os procedimentos experimentais e de rotina de criação, melhorando o bem-estar animal e a qualidade científica. O treinamento com clicker foi utilizado para desenvolver protocolos de treinamento para coelhos para refinar os procedimentos estressantes de criação de rotina geralmente associados a levantá-los (ou seja, ser pego do chão) / contê-los (ou seja, ser segurado nos braços de um humano). Treze fêmeas de coelhos brancos da Nova Zelândia foram treinadas ao longo de três semanas. Todos os coelhos aprenderam os comportamentos de objetivo predefinidos: eles seguiram o bastão alvo, pularam na balança, entraram em uma caixa de transporte e empinaram enquanto colocavam as patas dianteiras na mão do treinador. Além disso, dez animais pularam do chão para o colo do treinador sentado e permitiram que o treinador levantasse as patas da superfície enquanto estava sentado no colo do treinador. Para alguns indivíduos, os protocolos tiveram que ser adaptados por etapas intermediárias adicionais. No final do treinamento, os coelhos mostraram de forma confiável os comportamentos de meta esperados, mesmo após intervalos de treinamento curtos e longos. Com poucas exceções, uma pessoa familiar que não seja o treinador poderia obter os comportamentos objetivos dos coelhos (generalização), embora mais sessões fossem necessárias para a generalização. No teste de abordagem voluntária, os coelhos preferiram interagir com o treinador na1ª tentativa, mas passaram tanto tempo com uma pessoa desconhecida quanto com o treinador na2ª tentativa. As observações comportamentais sugeriram que pegar os coelhos com a caixa de transporte, conforme descrito no protocolo, em vez de prendê-los com a nuca e levantá-los no braço, era menos aversivo. Em suma, os protocolos de treinamento foram viáveis e podem servir como uma estratégia de refinamento em instalações de animais de laboratório. No interesse do bem-estar dos animais, os protocolos de treino devem ser aplicados sempre que possível.

Between 2015 and 2019, more than 49 million animals were used for scientific purposes in the European Union (and Norway); 1,745,037 (3.5 %) of them were rabbits1. Rabbits are mostly used for regulatory research (e.g., quality control, toxicity, and other safety testing, including pharmacology) and routine production of biological substances (e.g., blood-based products)2. Although efforts are made to replace animal experiments with animal-free methods, the use of animals is still necessary for some of these purposes. Whenever an animal experiment cannot be replaced, it is crucial to reduce the number of animals and refine experimental as well as housing and husbandry conditions to minimize suffering. Russel and Burch described this strategy as the 3R principle (replace, reduce, refine) in 19593 and, in 2010, it was implemented into the Directive 2010/63/EU on the protection of laboratory animals used for scientific purposes4. The role of refinement sometimes referred to as &#39;Cinderella&#39; of the 3Rs5, has gained growing importance. While replacement and reduction are long-term strategies towards the ultimate goal of the Directive to fully replace animal experiments, refinement enables the immediate improvement of animal welfare5, which in turn has the potential to improve scientific quality6. Essential parts of refinement are animal handling and training, as pointed out in Annex III of the Directive 2010/63/EU. The Directive stipulates that animal facilities should design habituation and training programs for the laboratory animals adapted to species, procedure, and project4. Appendix A of the ETS No. 123 suggests that the laboratory animal personnel spends time &#34;talking to, handling, training and grooming animals&#34;7.
Some handling procedures cause stress, especially for terrestrial prey animals such as rabbits. Examples are being cornered, restrained (i.e., grabbed by a human, held in the arms of a human, or immobilized by a device), and lifted (i.e., picked up from the floor) for a health inspection or experimental procedures8. A survey focusing on pet rabbits revealed that 57-61% of them struggled when being lifted9,10 and some even showed fear related aggression (i.e., biting)11. This emphasizes the need for gentle handling and training techniques. It has already been demonstrated for other small mammals such as mice that gentle handling techniques decreases anxiety12. Moreover, gentle handling in combination with training reduces stress, anxiety, and depression-like behavior in mice13. In rhesus macaques and chimpanzees, physiological measures related to stress were less affected when they were previously trained on a procedure14,15. It may be assumed that if an animal can choose to participate in the training voluntarily, it can actively engage in and control the situation, which improves the animal&#39;s welfare and may also contribute to more robust and reliable scientific data16.
Many animal training procedures are reliant on operant conditioning principles, particularly the use of positive reinforcement and shaping17,18,19. Operant conditioning requires an animal to elicit behaviors that can then be increased or decreased20. There are four common contingencies that are used to describe operant conditioning: positive and negative reinforcement as well as positive and negative punishment21,22. In rabbits, positive punishment is used when a person approaches (undesired stimulus) an animal to move it away from or towards a particular location23. In the context of handling a rabbit on the examination table, an example for negative reinforcement is the removal of pressure (undesired stimulus) on the rabbit&#39;s body when the rabbit keeps still; an example for negative punishment is withdrawing a food reward (desired stimulus) when the rabbit starts struggling. Neither positive/negative punishment nor negative reinforcement are recommended in animal training. Punishment causes negative emotional affects24, such as distress as shown in dogs25. Instead, positive reinforcement should be the method of choice when training animals25,26. Positive reinforcement training (PRT) means that a desirable stimulus (e.g., a food reward) is provided after the animal showed a desired behavior, which increases the likelihood that the animal will display the desired behavior again in the future27. PRT often involves the application of a conditioned reinforcer. A conditioned reinforcer (secondary reinforcer) usually is a neutral stimulus such as a sound, which the animal learns to associate with an unconditioned reinforcer (primary reinforcer, e.g., food reward)28. After the animal displays the desired behavior, the conditioned reinforcer is immediately presented, followed by the presentation of the food reward26. A well-known example of PRT is clicker training, where a clicker is used for producing a click as a secondary reinforcer26.
The training should follow predictable patterns, which is achieved by designing a training protocol. The training protocol describes how a goal behavior can be reached step by step (i.e., behavioral shaping) while each step is defined by objective criteria and should be easily accomplished26. If the training follows a particular protocol, it is possible that the laboratory animal staff alternates with training the animals. Important to note is that the personnel needs to know the principles of learning and training techniques in order to correctly apply them26. Animal training often incorporates behavioral shaping. Behavioral shaping by hand was deliberately used for the first time by Skinner and colleagues in the early 1940s29. In contrast, in previous work, Skinner rather focused on &#34;making small changes in the physical environment in order to implement a program of successive approximation&#34;29. In an article published in Scientific American, he explained that reinforcing a behavior increases the likelihood that the behavior will be repeated which &#34;makes it possible to shape an animal&#39;s behavior almost as a sculptor shapes a lump of clay&#34;30. Since then, shaping has experienced growing importance for captive animals29,30,31,32. For reproducing and improving shaping protocols, it is crucial to assess the protocols in a systematic and objective manner33,34,35,36.
A recently published systematic review and meta-analysis by Pfaller-Sadovsky et al. found that conditioned reinforcement was most frequently studied in horses and dogs, though cats, cattle, fish, goats, and non-human primates were also investigated37. In laboratory animal science, PRT is widely used for non-human primates38,39,40 and dogs41,42. In addition, pigs43, goats44, and even small mammals, such as mice13 and rats45,46,47, were successfully trained using a clicker in the laboratory setting. To the authors&#39; knowledge, the introduction of PRT for laboratory rabbits has only been rarely reported yet48; existing peer-reviewed literature published several decades ago is outdated and does not meet the criteria of modern ethical research. Although few non-peer-reviewed pieces of information suggest that rabbits can be successfully trained using PRT49, there seems to be a lack of knowledge on suitable training protocols for rabbits that are housed in laboratory animal facilities. The underlying reasons may be varying. For instance, training techniques used may not be described in detail in research articles or data are generated for regulatory research and therefore not being published. Moreover, rabbits may not be the main focus of refinement research since other species such as mice and rats are more frequently used in research. Since rabbits can mask stress and discomfort extremely well, their negative emotional state when being handled may often remain unrecognized. The size of a rabbit allows humans to restrain these animals for procedures while other species such as non-human primates may not be held with the hands for similar interventions without being seriously injured50. However, these facts should not prevent the development or sharing of PRT protocols for laboratory rabbits.
Regarding the potential benefits of PRT, first attempts were made to fill the knowledge gap on suitable training protocols for laboratory rabbits. To facilitate routine procedures such as handling, health inspections, and weighing, training protocols were developed and their feasibility for female New Zealand White rabbits was evaluated. Comparisons were carried out to assess whether the alternative handling technique described in the training protocols was less aversive than the conventional handling technique and whether the training protocols can serve as refinement measures. Figure 1 demonstrates the time schedule of the present study.
Animal maintenance
Thirteen female New Zealand White rabbits were obtained from commercial sources (arrival at animal facility at the age of approximately seven weeks of age). The animals were free of all viral, bacterial, and parasitic pathogens listed in the FELASA recommendations51. Protective clothing and equipment (gloves, masks, hair nets) were worn when conducting the steps of the present protocol. A group of six and a group of seven animals were housed together in a floor pen of 2.8 m &#215; 2.8 m (floor housing), respectively. The floor was covered with fine and flaky wooden bedding material (autoclaved). Moreover, nesting material and paper wool were scattered on top of the bedding. Three plastic houses with two openings each (37 cm &#215; 60 cm; height 30 cm) and a plastic tunnel (length: 58 cm; diameter: 16 cm) served as shelters. Additionally, enrichment items such as wooden gnawing blocks, hay and willow balls, and snack balls filled with food pellets, that fall out when moving the ball, were provided. The rabbits had free access to tap water, pelleted food, and autoclaved hay as well as straw. Further information on food and enrichment items are listed in the Table of Materials. The animal room was cleaned on Thursdays.
The rabbits were maintained under standard conditions (room temperature and relative humidity given as mean &#177; standard deviation: 20.3 &#177; 0.4 &#176;C and 50 &#177; 5 %) on a light:dark cycle of 12:12 h (artificial light with additional daylight incidence). A radio was turned on 30 min before the beginning of the light phase for approximately 8 h to habituate the rabbits to ambient noises.

Autor em destaque: Treinamento de animais de laboratório para manuseio suave e sem estresse

Treinando coelhos de laboratório para refinar os procedimentos de criação de rotina

We intend to improve animal welfare for as long as animal experiments are carried out. It is our moral responsibility and duty to ensure that the laboratory animals suffer as less as possible. This also includes caring for and handling the animals in the gentlest way possible.For instance, by using positive reinforcement training. Our research suggests that gentle handling techniques and positive reinforcement training reduces stress in laboratory animals. researchers are currently confronted with the requirements to train their laboratory animals.However, this is extremely challenging for someone without any previous experiences in animal training. Therefore, our protocol provides step-by-step instructions that should allow everyone to get the first positive experiences in training a rabbit. First of all, it is animal friendly.We compared the behavior of the rabbits after they were picked up in a transport box, or with the conventional handling techniques. The transport box was less aversive and therefore, could serve as an effective refinement measure.

Watch this Scientific Journal Video about Author Spotlight: Training of Laboratory Animals for Gentle and Stress-Free Handling at JoVE.com

Protocolos de treinamento envolvendo reforço positivo para procedimentos de criação de rotina em coelhos foram desenvolvidos e provaram ser bem-sucedidos, pois os coelhos mostraram de forma confiável os comportamentos treinados no exame geral semanal. Pegar os coelhos com a caixa de transporte foi menos aversivo do que a técnica de manuseio convencional.

Non-aversive handling and training techniques for laboratory animals are required to facilitate experimental and routine husbandry procedures, improving ...

Tencionamos melhorar o bem-estar dos animais enquanto forem realizadas experiências com animais. É nossa responsabilidade moral e dever garantir que os animais de laboratório sofram o menos possível. Isso também inclui cuidar e lidar com os animais da maneira mais gentil possível.Por exemplo, usando o treinamento de reforço positivo. Nossa pesquisa sugere que técnicas de manuseio suave e treinamento de reforço positivo reduzem o estresse em animais de laboratório. Os pesquisadores são atualmente confrontados com os requisitos para treinar seus animais de laboratório.No entanto, isso é extremamente desafiador para alguém sem nenhuma experiência anterior em treinamento de animais. Portanto, nosso protocolo fornece instruções passo a passo que devem permitir que todos tenham as primeiras experiências positivas no treinamento de um coelho. Em primeiro lugar, é amigo dos animais.Comparamos o comportamento dos coelhos após serem recolhidos em uma caixa de transporte, ou com as técnicas convencionais de manuseio. A caixa de transporte era menos aversiva e, portanto, poderia servir como uma medida de refinamento eficaz.

Treinando coelhos de laboratório para refinar os procedimentos de criação de rotina

Abstract