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  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • Representative Results
  • Discussion
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Este artigo apresenta um protocolo simplificado para estabelecer um modelo de pulpite em camundongos usando um mordaça bucal inovador, seguido de análise histológica subsequente.

Abstract

A pulpite, uma causa comum de perda natural do dente, leva à necrose e perda de bioatividade na polpa dentária inflamada. Desvendar os mecanismos subjacentes à pulpite e seu tratamento eficiente é um foco contínuo da pesquisa endodôntica. Portanto, entender o processo inflamatório dentro da polpa dentária é vital para melhorar a preservação da polpa. Comparado a outros experimentos in vitro , um modelo de pulpite murina oferece um contexto mais autêntico e geneticamente diverso para observar a progressão patológica da pulpite. No entanto, o uso de camundongos, apesar de sua relação custo-benefício e acessibilidade, apresenta dificuldades devido ao seu pequeno tamanho, má coordenação e baixa tolerância, dificultando os procedimentos intrabucais e odontológicos. Este protocolo apresenta um novo design e aplicação de uma mordaça bucal para expor a polpa do camundongo, facilitando procedimentos intraorais mais eficientes. A mordaça bucal, composta por uma arcada dentária prontamente disponível para a maioria dos dentistas e pode agilizar significativamente a preparação cirúrgica, mesmo para procedimentos iniciais. Micro-CT, coloração de hematoxilina-eosina (HE) e coloração de imunofluorescência foram usadas para identificar alterações na morfologia e expressão celular. O objetivo deste artigo é ajudar os pesquisadores a estabelecer um procedimento mais reprodutível e menos exigente para criar um modelo de inflamação pulpar usando esta nova mordaça bucal.

Introduction

A polpa dentária, parte integrante do dente, é responsável por múltiplas funções essenciais, como fornecimento de nutrientes, formação de dentina, função sensorial e reações de defesa1. No entanto, a polpa dentária, circundada por tecido duro, é suscetível a lesões e danos causados por cárie profunda, pulpite, trauma ou terapias subsequentes 2,3. A ausência de polpa dentária funcional aumenta o risco de fragilidade dentária4. Além disso, a perda de vitalidade pulpar em dentes permanentes jovens pode afetar adversamente a maturação dentária, e as técnicas atuais d....

Protocol

Os procedimentos experimentais neste estudo foram aprovados pelo comitê de ética da Escola de Estomatologia da China Ocidental, Universidade de Sichuan (WCHSIRB-D-2021-125). Camundongos C57BL/6 adultos foram obtidos da Gempharmatech Experimental Animals Company, Chengdu, China. Toda a coroa do primeiro molar superior entra em erupção 21 dias após o nascimento. Os camundongos para cirurgia devem ter mais de 21 dias com vitalidade normal11. Aqui, camundongos de 6 a 8 semanas de idade foram usad.......

Representative Results

O procedimento descrito acima foi realizado no primeiro molar superior direito de camundongos C57BL/6 de 3, 6-8 semanas de idade, enquanto os primeiros molares superiores esquerdos foram preservados como controle. Os resultados histológicos e de imunofluorescência do controle em branco, amostras de pulpite de 12 h e pulpite de 24 h foram utilizados para demonstração.

Seguindo o protocolo de análise de TC de Goldman et al.15, a exposição pulpar foi confirmada por .......

Discussion

Como o único tecido mole dentro dos dentes, a polpa dentária desempenha um papel crucial na manutenção da bioatividade do dente, mas permanece altamente sensível. A preservação dessa polpa vital tornou-se a abordagem inicial preferida em tratamentos endodônticos recentes, necessitando de uma compreensão abrangente dos mecanismos inflamatórios da polpa dentária16. A flutuação espaço-temporal do microambiente inflamatório e as interações entre os tipos de células residentes na pulp.......

Acknowledgements

Este estudo foi financiado por doações da Fundação Nacional de Ciências Naturais da China U21A20368 (L. Y.), 82101000 (H. W.) e 82100982 (F. L.), e pelo Programa de Ciência e Tecnologia de Sichuan 2023NSFSC1499 (H. W.). Todos os dados e imagens originais estão incluídos neste artigo.

....

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
Animal
C57/B6J miceGempharmatech Experimental Animals CompanyC57/B6JFor the establishment of pulp exposure
Equipment
1 mL syringeChengdu Xinjin Shifeng Medical Apparatus & Instruments Co. LTD.SB1-074(IV)Apply in drug injection.
8# C+ fileReadysteel0010047Apply in exposing the roof of pulp chamber.
Anesthesia Mix solution10% ketamine hydrochloride+ 5% xylazine + 85% sterile isotonic saline. 
DAPI Staining SolutionBeyotimeC1005Apply in immunofluorescence staining for counter-staining of nucleus.
Dental high-speed dental handpieceJing yuan electronic commerce technologyWJ-422Apply in pulp exposure.
Heavy wire cutterJirui Medical Instrument Co., Ltd.noneApply inarc cutting.
Hematoxylin and Eosin Stain kitBiosharpBL700BFor the histological analysis of the slides.
IL-6 antibodyNovusNBP2-89149Apply in immunofluorescence staining to detect the inflammation of the dental pulp.
Ketamine(Ketamine hydrochloride)Vet One, Boise, Idaho, USAC3N VT1100mg/kg, IP. Apply in nesthetization.
Medical tap3M1530Apply in mice immobilization.
Orthodontic arch wire Shanghai Wei Rong Medical Apparatus Co. LTD.K417Diameter of 8µm
Round dental burr (0.6 mm)Shofu global072208Apply in removing enamel and shallow layer of dentin.
Young loop bending plierJirui Medical Instrument Co., Ltd.noneApply in arc bending.

References

  1. Kleinert, A., Kleinert, L., Ozimirska, M., Chałas, R. Endodontium - together or separately. Folia Morphol. 77 (3), 409-415 (2018).
  2. Dhillon, H., Kaushik, M., Sharma, R. Regenerative endodontics-Creating new horizons. J Biomed Mate....

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