Realtidsteknik med hög genomströmning för att kvantifiera bildandet av neutrofila extracellulära fällor i humana neutrofiler

Neutrofiler är myeloida celler som utgör en viktig del av det medfödda immunförsvaret. Det senaste decenniet har avslöjat ytterligare nyckelroller som neutrofiler spelar i patogenesen av cancer, autoimmuna sjukdomar och olika akuta och kroniska inflammatoriska tillstånd genom att bidra till initiering och vidmakthållande av immundysreglering genom flera mekanismer, inklusive bildandet av neutrofila extracellulära fällor (NET), som är strukturer som är avgörande för antimikrobiellt försvar. Begränsningar i tekniker för att kvantifiera NET-bildning på ett opartiskt, reproducerbart och effektivt sätt har begränsat vår förmåga att ytterligare förstå neutrofilers roll i hälsa och sjukdomar. Vi beskriver en automatiserad, realtidsmetod med hög genomströmning för att kvantifiera neutrofiler som genomgår NET-bildning med hjälp av en levande cellavbildningsplattform i kombination med en membranpermeabilitetsberoende dubbelfärgningsmetod som använder två olika DNA-färgämnen för att avbilda intracellulärt och extracellulärt DNA. Denna metodik kan hjälpa till att bedöma neutrofilfysiologi och testa molekyler som kan rikta in sig på NET-bildning.