אנו מעריכים את פרויקט התמריץ וההדרכה לביצועים של מוסד המחקר המדעי בצ'ונגצ'ינג (jxyn-2021-1-15 ו- jxyn-2021-2-6) לתמיכה כספית.

הניסוי הקליני אושר על ידי ועדת האישורים של בית החולים צ'ונגצ'ינג לרפואה סינית מסורתית (מס '2022-ky-31). המקרה הטיפוסי כלל חולה שאובחן עם דלקת ריאות פנאומוציסטיס, והתקבלה הסכמה מדעת מהמטופל.
1. דרישות ציוד וחומרים עבור ROSE
<ol><li>ציוד: עיין בקובץ טבלת החומרים עבור הצ...

שיפור הטיפול בזיהומים ריאתיים באמצעות M-ROSE

<ol>
	<li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnostic+value+of+endoscopic+ultrasound-guided+fine+needle+aspiration+with+rapid+on-site+evaluation+performed+by+endoscopists+in+solid+pancreatic+lesions:+A+prospective,+randomized+controlled+trial.">Diagnostic value of endoscopic ultrasound-guided fine needle aspiration with rapid on-site evaluation performed by endoscopists in solid pancreatic lesions: A prospective, randomized controlled trial.</a> J Gastroenterol Hepatol. 37 (10), 1975-1982 (2022).</li><li>Bruno, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficacy+and+cost+effectiveness+of+rapid+on+site+examination+(ROSE)+in+management+of+patients+with+mediastinal+lymphadenopathies.">Efficacy and cost effectiveness of rapid on site examination (ROSE) in management of patients with mediastinal lymphadenopathies.</a> Eur Rev Med Pharmacol Sci. 17 (11), 1517-1522 (2013).</li><li>Li, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microbiology+rapid+on-site+evaluation:+a+better+method+for+Mucoid+Pseudomonas+Aeruginosa+diagnosis+in+bronchiectasic+patients.">Microbiology rapid on-site evaluation: a better method for Mucoid Pseudomonas Aeruginosa diagnosis in bronchiectasic patients.</a> Eur Rev Med Pharmacol Sci. 26 (5), 1738-1742 (2022).</li><li>Tao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+microbiological+rapid+on-site+evaluation+in+respiratory+intensive+care+units:+a+retrospective+study.">Application of microbiological rapid on-site evaluation in respiratory intensive care units: a retrospective study.</a> Ann Transl Med. 10 (1), 7 (2022).</li><li>Yan, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+value+of+microbiology+rapid+on-site+evaluation+of+sepsis+caused+by+pulmonary+infection.">The value of microbiology rapid on-site evaluation of sepsis caused by pulmonary infection.</a> Eur Rev Med Pharmacol Sci. 27 (12), 5862-5868 (2023).</li><li>Muri, R., Trippel, M., Borner, U., Weidner, S., Trepp, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+impact+of+rapid+on-site+evaluation+on+the+quality+and+diagnostic+value+of+thyroid+nodule+fine-needle+aspirations.">The impact of rapid on-site evaluation on the quality and diagnostic value of thyroid nodule fine-needle aspirations.</a> Thyroid. 32 (6), 667-674 (2022).</li><li>Wang, Z., Shi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+rapid+on-site+evaluation+in+contemporary+pediatric+interventional+respiratory+diseases.">Application of rapid on-site evaluation in contemporary pediatric interventional respiratory diseases.</a> Chinese Journal of Practical Pediatrics. 12, 470-475 (2019).</li><li>Shah, P. L., Herth, F. J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+interventional+pulmonology.">Progress in interventional pulmonology.</a> Respiration. 95 (5), 287-288 (2018).</li><li>Hsia, D., Musani, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interventional+pulmonology.">Interventional pulmonology.</a> Med Clin North Am. 95 (6), 1095-1114 (2011).</li><li>Moore, A. J., Mercer, R. M., Musani, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+interventional+pulmonology.">Advances in interventional pulmonology.</a> Clin Chest Med. 39 (1), 271-280 (2018).</li><li>Majid, A., Fernandez-Bussy, S., Folch, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interventional+pulmonology+and+solitary+pulmonary+nodule.">Interventional pulmonology and solitary pulmonary nodule.</a> Arch Bronconeumol. 54 (10), 497-498 (2018).</li><li>Ali, M. S., Sorathia, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Palliative+care+and+interventional+pulmonology.">Palliative care and interventional pulmonology.</a> Clin Chest Med. 39 (1), 57-64 (2018).</li><li>Czarnecka, K., Yasufuku, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interventional+pulmonology:+focus+on+pulmonary+diagnostics.">Interventional pulmonology: focus on pulmonary diagnostics.</a> Respirology. 18 (1), 47-60 (2013).</li><li>Schacht, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endobronchial+ultrasound-guided+transbronchial+needle+aspiration:+performance+of+biomedical+scientists+on+rapid+on-site+evaluation+and+preliminary+diagnosis.">Endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration: performance of biomedical scientists on rapid on-site evaluation and preliminary diagnosis.</a> Cytopathology. 27 (5), 344-350 (2016).</li><li>Pearson, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+on-site+evaluation+of+fine-needle+aspiration+by+non-cytopathologists:+A+systematic+review+and+meta-analysis+of+diagnostic+accuracy+studies+for+adequacy+assessment.">Rapid on-site evaluation of fine-needle aspiration by non-cytopathologists: A systematic review and meta-analysis of diagnostic accuracy studies for adequacy assessment.</a> Acta Cytol. 62 (4), 244-252 (2018).</li><li>Arimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cryobiopsy+with+endobronchial+ultrasonography+using+a+guide+sheath+for+peripheral+pulmonary+lesions+and+DNA+analysis+by+next+generation+sequencing+and+rapid+on-site+evaluation.">Cryobiopsy with endobronchial ultrasonography using a guide sheath for peripheral pulmonary lesions and DNA analysis by next generation sequencing and rapid on-site evaluation.</a> Respir Investig. 57 (2), 150-156 (2019).</li><li>Gianella, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utility+of+rapid+on-site+cytologic+evaluation+during+endobronchial+ultrasound-guided+transbronchial+needle+aspiration+in+malignant+and+nonmalignant+disease.">Utility of rapid on-site cytologic evaluation during endobronchial ultrasound-guided transbronchial needle aspiration in malignant and nonmalignant disease.</a> Acta Cytol. 62 (5-6), 380-385 (2018).</li><li>Natella, V., Cozzolino, I., Sosa Fernandez, L. V., Vigliar, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymph+nodes+fine+needle+cytology+in+the+diagnosis+of+infectious+diseases:+clinical+settings.">Lymph nodes fine needle cytology in the diagnosis of infectious diseases: clinical settings.</a> Infez Med. 20, 12-15 (2012).</li><li>Baughman, R. P., Spencer, R. E., Kleykamp, B. O., Rashkin, M. C., Douthit, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ventilator+associated+pneumonia:+quality+of+nonbronchoscopic+bronchoalveolar+lavage+sample+affects+diagnostic+yield.">Ventilator associated pneumonia: quality of nonbronchoscopic bronchoalveolar lavage sample affects diagnostic yield.</a> Eur Respir J. 16 (6), 1152-1157 (2000).</li><li>Petrone, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Does+cytotechnician+training+influence+the+accuracy+of+EUS-guided+fine-needle+aspiration+of+pancreatic+masses.">Does cytotechnician training influence the accuracy of EUS-guided fine-needle aspiration of pancreatic masses.</a> Dig Liver Dis. 44 (4), 311-314 (2012).</li></ol>

פולמונולוגיה התערבותית היא ענף חשוב של מחלות נשימה מודרניות; בפרט, זה כבר בשימוש נרחב באבחון של מחלות ריאה 8,9. בשנים האחרונות, פולמונולוגיה התערבותית אבחנתית משגשגת בשל שכיחות מוגברת של גידולים ממאירים ריאתיים, יותר זיהומים פתוגניים עמידים לתרופות המתרחשי...

הטכניקה של הערכה מהירה באתר (ROSE) היא שיטה יעילה ביותר המיושמת בתחום הליכי מחלות ריאה. הוא מאפשר דגימה בזמן אמת והתערבות אבחנתית, ומאפשר ניתוח ציטולוגי מיידי1. גישה חדשנית זו כוללת הטבעה של חלק מדגימת הרקמה על שקופית תוך שמירה על שלמותה. אחד היתרונות העיקריים של ROSE טמון ביכולתו להקל על פרשנות מהירה של מידע קליני באמצעות טכניקות מיקרוסקופיה מיוחדות. זה כולל ניתוח של מורפולוגיה של התא, סיווג, כימות, קביעת יחסים מרכיבים, הערכת סידור, ניתוח מתאם, הערכת רקע, וזיהוי של אובייקטים זרים. על ידי שילוב כל הנתונים הללו עם המידע הקליני של המטופל, ROSE ממלא תפקיד מרכזי בהערכת הלימות הדגימה ובהנחיית הליכים וטכניקות התערבותיות בזמן אמת2.
כחברת בת של טכנולוגיית ROSE, טכנולוגיית M-ROSE מתמקדת בעיקר ברכישת הרקע המיקרוביולוגי של נגעי מטרה במקום להבחין בין תאים שפירים לממאירים 3,4. מצד אחד, M-ROSE מאפשר זיהוי מיקרוסקופי של פתוגנים כגון אספרגילוס, קריפטוקוקוס, פנאומוציסטיס וקנדידה5. מצד שני, יש לו השלכות מנחות משמעותיות בהערכת איכות הדגימות הנשימתיות, הבחנה בין מחלות זיהומיות ללא זיהומיות, הבחנה בין זיהום לזיהום, כמו גם הערכת חומרת זיהום ופרוגנוזה 6,7. לדוגמה, בתוך דגימה נשימתית, דו-קיום של חיידקים בעלי מורפולוגיה זהה לצד חדירת תאי דלקת מצביע על זיהום; לעומת זאת, נוכחותם של חיידקים רבים בעלי מגוון מורפולוגי המלווים בתאי אפיתל מצביעה על זיהום. היכולת לנתח באופן מקיף מידע קליני ולחזות תוצאות הופכת את M-ROSE לכלי רב ערך בהליכים של מחלות ריאה.
לסיכום, ROSE משמש כנשא ציטולוגי חיוני המשפר משמעותית את היעילות והדיוק של אבחון מחלות ריאה. יכולותיו הרב-גוניות תורמות לשיפור תוצאות המטופלים בכך שהן מבטיחות התערבות בזמן ומקלות על אבחון מדויק באמצעות טכניקות דגימה והתערבות אבחונית בזמן אמת. עם זאת, חשוב לציין כי התקדמות זו מסתמכת על השגת דגימות מוסמכות. כאן, אנו מציגים פרוטוקול M-ROSE סטנדרטי הכולל הכנת שקופיות, טכניקות צביעה והנחיות פרשנות. פרוטוקול זה משמש כנקודת התייחסות רבת ערך עבור קלינאים כדי לקבוע תוכניות הערכה וטיפול מדויקות תוך הקלה על קבלת החלטות לגבי טיפול עוקב בדגימות מטרה.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Cytological microscope</td>
			<td>Olympus Corporation</td>
			<td>CX43</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diff Quik (DQ) staining solutions</td>
			<td>Besso Biotechnology Co. LTD</td>
			<td>G1541</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable 2.5-5 mL syringe needles</td>
			<td>Shandong Zhu Pharmaceutical Group</td>
			<td>20183150304</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powder-free latex gloves</td>
			<td>Henan Yadu Industrial Co., LTD</td>
			<td>20182140728</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile cell culture slides</td>
			<td>Jinan Preret industry and trade Co., LTD</td>
			<td>7101</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

microbiological rapid on-site evaluation for pulmonary infectious diseases

ההתחלה המהירה של טיפול אמפירי אנטי זיהומי היא קריטית בחולים המציגים זיהום ריאתי בלתי מוסבר. למרות שרכישת הדמיה היא פשוטה יחסית בפרקטיקה הקלינית, חוסר הספציפיות שלה מחייב לעתים קרובות בדיקות נוספות הגוזלות זמן רב כגון תרבית כיח, תרבית נוזל שטיפה ברונכואלבאולרי או ריצוף גנטי כדי לזהות את האטיולוגיה הבסיסית של המחלה במדויק. יתר על כן, היעילות המוגבלת של טיפול אמפירי אנטי זיהומי עלולה לתרום לשימוש לרעה באנטיביוטיקה. ההתקדמות האחרונה בפענוח רקע מיקרוביאלי בשקופיות הערכה מהירה באתר (ROSE) אפשרה לרופאים להשיג דגימות במהירות באמצעות ברונכוסקופיה (למשל, שטיפת נאדיות, צחצוח רירית, מהדק רקמות), מה שמקל על צביעה לצד המיטה ופרשנות המספקת מידע רקע מיקרוביאלי חיוני. כתוצאה מכך, זה מבסס בסיס לפיתוח טיפול ממוקד נגד זיהום ותוכניות טיפול תרופתי אישיות. עם הבנה טובה יותר של אילו פתוגנים גורמים לזיהומים בזמן אמת, רופאים יכולים להימנע מאנטיביוטיקה רחבת טווח מיותרת התורמת לעמידות לאנטיביוטיקה. הקמת תהליך עבודה מהיר וסטנדרטי של M-ROSE במחלקות לרפואה נשימתית או ביחידות לטיפול נמרץ תסייע רבות לרופאים לגבש אסטרטגיות טיפול מדויקות לחולים, דבר שיש לו השלכות קליניות משמעותיות.

The technique of rapid on-site evaluation (ROSE) is a highly efficient method employed in the field of pulmonary disease procedures. It enables real-time sampling and diagnostic intervention, facilitating immediate cytological analysis1. This innovative approach involves imprinting a portion of the tissue specimen onto a slide while preserving its integrity. One of the key advantages of ROSE lies in its capacity to facilitate prompt interpretation of clinical information through specialized microscopy techniques. This encompasses the analysis of cell morphology, classification, quantification, determination of constituent ratios, assessment of arrangement, correlation analysis, evaluation of background, and identification of foreign objects. By integrating all this data with the patient's clinical information, ROSE plays a pivotal role in evaluating sampling adequacy and guiding real-time interventional procedures and techniques2.
As a subsidiary of ROSE technology, M-ROSE technology primarily focuses on acquiring the microbiological background of target lesions rather than discerning between benign and malignant cells3,4. On one hand, M-ROSE enables the microscopic identification of pathogens such as Aspergillus, Cryptococcus, Pneumocystis, and Candida5. On the other hand, it holds significant guiding implications in assessing respiratory specimen quality, distinguishing infectious from non-infectious diseases, discriminating infection from contamination, as well as evaluating infection severity and prognosis6,7. For instance, within a respiratory specimen, the coexistence of bacteria exhibiting identical morphology alongside infiltrating inflammatory cells indicates an infection; conversely, the presence of multiple morphologically diverse bacteria accompanied by epithelial cells suggests contamination. The capacity to comprehensively analyze clinical information and predict outcomes renders M-ROSE an invaluable tool in pulmonary disease procedures.
In conclusion, ROSE serves as a crucial cytological carrier that significantly enhances the efficiency and precision of diagnosing lung diseases. Its multifaceted capabilities contribute to improved patient outcomes by ensuring timely intervention and facilitating accurate diagnosis through real-time sampling and diagnostic intervention techniques. However, it is important to note that these advancements rely on obtaining qualified samples. Herein, we present a standardized M-ROSE protocol encompassing slide preparation, staining techniques, and interpretation guidelines. This protocol serves as an invaluable reference for clinicians to establish accurate evaluation and treatment plans while facilitating decision-making regarding subsequent handling of target specimens.

מחבר זרקור: קידום זיהוי פתוגנים והערכת מחלות בזמן אמת באמצעות M-ROSE

הערכה מיקרוביולוגית מהירה באתר למחלות זיהומיות ריאתיות

Our intent is to introduce a real time rapid assessment method, M-ROSE to assist the physicians for formulating accurate treatment strategies for patient with pulmonary infections. Rapid cell staining technology and a high definition microscopic imaging system are currently used to advance research in the field. The number of clinical studies on M-ROSE is relatively limited.The biggest challenge is interpretation of M-ROSE results, which requires personnel, and trained personnel as it is difficult to visually identify pathogens and differentiate between infection and contamination. With a better understanding of pathogens causing infections in real time, physicians can avoid unnecessary broad spectrum antibiotics contributing to antibiotic resistance and as a treatment of pulmonary infections. M-ROSE is real time and highly efficient.M-ROSE enables the microscopic identification of pathogens such as aspergillus, cryptococcus, numerous and candida. It holds significant guiding implications in sizing respiratory basic quality, distinguishing infections from non-infectious disease, discriminating, infection from contamination, as well as evaluating infection, severity, and prognose.

במקרה טיפוסי, גבר בן 63 הגיע לבית החולים עם שיעול, חום וכאבים בחזה. החולה אובחן בעבר עם תסמונת נפרוטית, המאופיינת בפרוטאינוריה ובבצקת, וקיבל טיפול בפרדניזון וטקרולימוס במשך זמן רב. ממצאי המעבדה הראשוניים הדגימו ספירת תאי דם לבנים של 10.49 x 109/L, ספירת נויטרופילים של 8.87 x 109/L, חלבון מג?...

Read this Scientific Article Protocol about Microbiological Rapid On-Site Evaluation for Pulmonary Infectious Diseases at JoVE.com

הפרוטוקול כאן מדגים זרימת עבודה מהירה ומתוקננת של הערכה מיקרוביולוגית מהירה באתר הלקוח (M-ROSE), הכוללת שלושה שלבים: יצירת שקופיות, צביעה ופענוח. פרוטוקול זה יסייע לרופאים לקבל החלטות קליניות מהירות.

The prompt initiation of empirical anti-infective therapy is crucial in patients presenting with unexplained pulmonary infection. Although imaging ...

הכוונה שלנו היא להציג שיטת הערכה מהירה בזמן אמת, M-ROSE כדי לסייע לרופאים לגבש אסטרטגיות טיפול מדויקות לחולים עם דלקות ריאה. טכנולוגיית צביעת תאים מהירה ומערכת הדמיה מיקרוסקופית בחדות גבוהה משמשות כיום לקידום המחקר בתחום. מספר המחקרים הקליניים על M-ROSE מוגבל יחסית.האתגר הגדול ביותר הוא פענוח תוצאות M-ROSE, הדורש כוח אדם, וכוח אדם מיומן, שכן קשה לזהות חזותית פתוגנים ולהבדיל בין זיהום לזיהום. עם הבנה טובה יותר של פתוגנים הגורמים לזיהומים בזמן אמת, רופאים יכולים להימנע מאנטיביוטיקה רחבת טווח מיותרת התורמת לעמידות לאנטיביוטיקה וכטיפול בדלקות ריאה. M-ROSE הוא זמן אמת ויעיל ביותר.M-ROSE מאפשר זיהוי מיקרוסקופי של פתוגנים כגון אספרגילוס, קריפטוקוקוס, רבים וקנדידה. יש לו השלכות מנחות משמעותיות על מדידת איכות בסיסית נשימתית, הבחנה בין זיהומים למחלות לא זיהומיות, אפליה, זיהום מזיהום, כמו גם הערכת זיהום, חומרתו ופרוגנוזה.

הערכה מיקרוביולוגית מהירה באתר למחלות זיהומיות ריאתיות

Abstract