Ex Vivo Kweek van circulerende tumorcellen in het cerebrale ruggenmergvocht van melanoompatiënten om melanoom-geassocieerde leptomeningeale ziekte te bestuderen

Melanoom-geassocieerde leptomeningeale ziekte (M-LMD) treedt op wanneer circulerende tumorcellen (CTC's) het cerebrale ruggenmergvocht (CSF) binnendringen en de hersenvliezen, de membraanlagen die de hersenen en het ruggenmerg beschermen, koloniseren. Eenmaal vastgesteld, is de prognose voor M-LMD-patiënten somber, met een totale overleving variërend van weken tot maanden. Dit is voornamelijk te wijten aan een gebrek aan ons begrip van de ziekte en, als gevolg daarvan, de beschikbaarheid van effectieve behandelingsopties. Het definiëren van de onderliggende biologie van M-LMD zal het vermogen om beschikbare therapieën voor de behandeling van M-LMD aan te passen aanzienlijk verbeteren of nieuwe remmers te ontwerpen voor deze universeel dodelijke ziekte. Een belangrijke barrière ligt echter in het verkrijgen van voldoende hoeveelheden CTC's uit de van de patiënt afgeleide CSF (CSF-CTC's) om preklinische experimenten uit te voeren, zoals moleculaire karakterisering, functionele analyse en in vivo werkzaamheidsstudies. Het ex vivo kweken van CSF-CTC's is ook een uitdaging gebleken. Om dit aan te pakken, wordt een nieuw protocol ontwikkeld voor de kweek van patiënt-afgeleide M-LMD CSF-CTC's ex vivo en in vivo . De opname van geconditioneerde media geproduceerd door menselijke meningeale cellen (HMC's) blijkt van cruciaal belang te zijn voor de procedure. Cytokine-array-analyse onthult dat factoren geproduceerd door HMC's, zoals insuline-achtige groeifactorbindende eiwitten (IGFBP's) en vasculaire endotheliale groeifactor-A (VEGF-A), belangrijk zijn bij het ondersteunen van CSF-CTC-overleving ex vivo. Hier wordt het nut van de geïsoleerde, van de patiënt afgeleide CSF-CTC-lijnen aangetoond bij het bepalen van de werkzaamheid van remmers die zich richten op de insuline-achtige groeifactor (IGF) en mitogeen-geactiveerde proteïnekinase (MAPK) signaleringsroutes. Bovendien wordt het vermogen aangetoond om deze cellen in vivo intrathecaal te inoculeren om muizenmodellen van M-LMD op te stellen die kunnen worden gebruikt voor preklinische tests van goedgekeurde of nieuwe therapieën. Deze hulpmiddelen kunnen helpen bij het ontrafelen van de onderliggende biologie die de vestiging van CSF-CTC in de hersenvliezen stimuleert en nieuwe therapieën identificeren om de morbiditeit en mortaliteit geassocieerd met M-LMD te verminderen.