Ex vivo Culture de cellules tumorales circulantes dans le liquide céphalo-rachidien de patients atteints de mélanome pour étudier la maladie leptoméningée associée au mélanome

La maladie leptoméningée associée au mélanome (M-LMD) se produit lorsque les cellules tumorales circulantes (CTC) pénètrent dans le liquide céphalo-rachidien (LCR) et colonisent les méninges, les couches membranaires qui protègent le cerveau et la moelle épinière. Une fois établi, le pronostic des patients atteints de M-LMD est sombre, avec une survie globale allant de quelques semaines à quelques mois. Cela est principalement dû à un manque de compréhension de la maladie et, par conséquent, à la disponibilité d’options de traitement efficaces. La définition de la biologie sous-jacente de la M-LMD améliorera considérablement la capacité d’adapter les thérapies disponibles pour le traitement de la M-LMD ou de concevoir de nouveaux inhibiteurs pour cette maladie universellement mortelle. Un obstacle majeur, cependant, réside dans l’obtention de quantités suffisantes de CTC à partir du LCR dérivé de patients (CSF-CTC) pour mener des expériences précliniques, telles que la caractérisation moléculaire, l’analyse fonctionnelle et les études d’efficacité in vivo . La culture de CTC-LCR ex vivo s’est également avérée difficile. Pour y remédier, un nouveau protocole est mis au point pour la culture de CCT-CS-CFC M-LMD dérivées de patients, ex vivo et in vivo . L’incorporation de milieux conditionnés produits par les cellules méningées humaines (HMC) s’avère essentielle à la procédure. L’analyse des réseaux de cytokines révèle que les facteurs produits par les HMC, tels que les protéines de liaison au facteur de croissance analogue à l’insuline (IGFBP) et le facteur de croissance de l’endothélium vasculaire-A (VEGF-A), sont importants pour soutenir la survie ex vivo du LCR-CTC. Ici, l’utilité des lignées isolées de CSF-CTC dérivées de patients est démontrée pour déterminer l’efficacité des inhibiteurs qui ciblent les voies de signalisation du facteur de croissance analogue à l’insuline (IGF) et de la protéine kinase activée par les mitogènes (MAPK). De plus, la capacité d’inoculer ces cellules par voie intrathécale in vivo pour établir des modèles murins de M-LMD pouvant être utilisés pour des essais précliniques de thérapies approuvées ou nouvelles est démontrée. Ces outils peuvent aider à démêler la biologie sous-jacente à l’établissement du LCR-CTC dans les méninges et à identifier de nouvelles thérapies pour réduire la morbidité et la mortalité associées au M-LMD.