Ex Vivo Cultivo de células tumorales circulantes en el líquido cefalorraquídeo de pacientes con melanoma para estudiar la enfermedad leptomeníngea asociada al melanoma

La enfermedad leptomeníngea asociada al melanoma (M-LMD, por sus siglas en inglés) ocurre cuando las células tumorales circulantes (CTC, por sus siglas en inglés) ingresan al líquido cefalorraquídeo (LCR) y colonizan las meninges, las capas de membrana que protegen el cerebro y la médula espinal. Una vez establecido, el pronóstico para los pacientes con M-LMD es sombrío, con una supervivencia general que oscila entre semanas y meses. Esto se debe principalmente a la escasez de conocimientos sobre la enfermedad y, como consecuencia, a la disponibilidad de opciones de tratamiento eficaces. La definición de la biología subyacente de la M-LMD mejorará significativamente la capacidad de adaptar las terapias disponibles para el tratamiento de la M-LMD o diseñar nuevos inhibidores para esta enfermedad universalmente mortal. Sin embargo, un obstáculo importante radica en la obtención de cantidades suficientes de CTC a partir del LCR derivado del paciente (CSF-CTC) para realizar experimentos preclínicos, como la caracterización molecular, el análisis funcional y los estudios de eficacia in vivo . El cultivo ex vivo de CTC-CSF también ha demostrado ser un desafío. Para abordar esto, se desarrolla un nuevo protocolo para el cultivo de M-LMD CSF-CTC derivadas del paciente ex vivo e in vivo . Se ha encontrado que la incorporación de medios condicionados producidos por células meníngeas humanas (HMC) es fundamental para el procedimiento. El análisis de la matriz de citocinas revela que los factores producidos por las HMC, como las proteínas de unión al factor de crecimiento similar a la insulina (IGFBP) y el factor de crecimiento endotelial vascular A (VEGF-A), son importantes para apoyar la supervivencia ex vivo de CSF-CTC. Aquí, se demuestra la utilidad de las líneas aisladas de CSF-CTC derivadas del paciente para determinar la eficacia de los inhibidores que se dirigen a las vías de señalización del factor de crecimiento similar a la insulina (IGF) y la proteína quinasa activada por mitógenos (MAPK). Además, se muestra la capacidad de inocular intratecalmente estas células in vivo para establecer modelos murinos de M-LMD que pueden emplearse para pruebas preclínicas de terapias aprobadas o novedosas. Estas herramientas pueden ayudar a desentrañar la biología subyacente que impulsa el establecimiento de LCR-CTC en las meninges e identificar nuevas terapias para reducir la morbilidad y la mortalidad asociadas con la M-LMD.