A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
* These authors contributed equally
В данной статье мы представляем протокол применения наносекундного импульсного электрического поля (nsPEF) для стимуляции шванновских клеток in vitro. Способность к синтезу и секреции соответствующих факторов и изменения в поведении клеток подтвердили успешную стимуляцию с использованием nsPEF. Исследование дает положительное представление о методе регенерации периферических нервов.
Шванновские клетки (СК) являются миелинизирующими клетками периферической нервной системы, играющими решающую роль в регенерации периферических нервов. Наносекундное импульсное электрическое поле (nsPEF) — это новый метод, применимый в электростимуляции нервов, который продемонстрировал свою эффективность в стимулировании пролиферации клеток и других биологических процессов. С целью оценки того, претерпевают ли СК значимые изменения при нПЭФ и помогают изучить потенциал новых методов регенерации периферических нервов, культивируемые клетки RSC96 подвергали стимуляции нПЭФ при 5 кВ и 10 кВ с последующим продолжением культивирования в течение 3-4 дней. Впоследствии были оценены некоторые релевантные факторы, экспрессируемые СК, чтобы продемонстрировать успешную стимуляцию, включая специфический маркерный белок, нейротрофический фактор, фактор транскрипции и регулятор миелинизации. Репрезентативные результаты показали, что nsPEF значительно усиливает пролиферацию и миграцию СК и способность синтезировать соответствующие факторы, которые положительно влияют на регенерацию периферических нервов. В то же время, более низкая экспрессия GFAP указывала на благоприятный прогноз повреждения периферических нервов. Все эти результаты показывают, что нПСЭФ обладает большим потенциалом в качестве эффективного метода лечения повреждений периферических нервов путем стимуляции СК.
Каждый год миллионы людей страдают от повреждения нервов, затрагивающих как периферическую нервную систему (ПНС), так и центральную нервную систему (ЦНС)1. Исследования показали, что аксональная восстановительная способность ЦНС после повреждения нерва достаточно ограничена, в то время как ПНС демонстрирует повышенную способность благодаря значительной пластичности СК2. Тем не менее, достижение полной регенерации после травм периферических нервов остается трудной задачей и продолжает представлять серьезную проблему для здоровья человека 3,4. В настоящее время аут....
1. Размораживание криоконсервированных клеток RSC96
Импульсные электрические поля низкой интенсивности стимулируют пролиферацию клеток
По данным анализа CCK-8, скорость пролиферации RSC96 в группе 5 кВ/см была значительно выше, чем в клетках контрольной группы. Однако по мере увеличения параметров (20 кВ/см и 40 кВ/см) скорость проли?.......
Согласно сообщениям, в последние годы наблюдается быстрый рост применения nsPEF. nsPEF оказывает высоконаправленное воздействие только на желаемую область, обеспечивая достаточное количество энергии для лечения, не вызывая дополнительных термических повреждений, что делает его более без.......
Эта работа финансировалась в рамках Национального проекта по разработке ключевых научных приборов и оборудования (NO.82027803).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Antifade mounting medium | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | G1401 | |
Anti-GFAP Mouse mAb | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | GB12100-100 | |
Anti-Neurofilament heavy polypeptide Mouse mAb | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | GB12144-100 | |
Anti-S100 beta Mouse mAb | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | GB14146-100 | |
BSA | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | GC305010 | |
Coverslip | Jiangsu Shitai experimental equipment Co., LTD | 10212432C | |
CY3-labeled goat anti-mouse IgG | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | GB21302 | |
DAPI Staining Reagent | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | G1012 | |
Decolorizing shaker | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | DS-2S100 | |
High Voltage Power Supply for nsPEF | Matsusada Precision Inc. | AU-60P1.6-L | |
Histochemical pen | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | G6100 | |
Membrane breaking liquid | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | G1204 | |
Microscope slide | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | G6012 | |
Palm centrifuge | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | MS6000 | |
PBS powdered | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | G0002 | |
Pipette | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | ||
Positive fluorescence microscope | Nikon, Japan | NIKON ECLIPSE C1 | |
Rabbit Anti-SOX10/AF488 Conjugated antibody | Beijing Bioss Biotechnology Co., LTD | BS-20563R-AF488 | |
RSC96 Schwann cells | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | STCC30007G-1 | |
scanister | 3DHISTECH | Pannoramic MIDI | |
Special cable for nsPEF | Times Microwave Systems | M17/78-RG217 | |
Turbine mixer | Wuhan Xavier Biotechnology Co., LTD | MV-100 |
This article has been published
Video Coming Soon
ABOUT JoVE
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved