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Abstract

Immunology and Infection

Pseudomonas syringae pv에 대한 기공 반응의 직접 관찰 및 자동 측정. 토마토 애기장대(Arabidopsis thaliana)의 DC3000

Published: February 9th, 2024

DOI:

10.3791/66112

1Graduate School of Agriculture, Kyoto University, 2Institute of Transformative Bio-Molecules (WPI-ITbM), Nagoya University, 3Phytometrics Co., Ltd.

* These authors contributed equally

Abstract

기공은 식물 잎 표피에서 발견되는 미세한 구멍입니다. 기공 구멍의 조절은 광합성을 위한 이산화탄소 흡수와 증열 수분 손실의 균형을 맞출 뿐만 아니라 박테리아 침입을 제한하는 데에도 중추적인 역할을 합니다. 식물은 미생물을 인식하면 기공을 닫는 반면, 슈도모나스 주사기와 같은 병원성 박테리아는 pv. 토마토 DC3000 (Pto), 닫힌 기공을 다시 열어 잎 내부로 접근합니다. 세균 침입에 대한 기공 반응을 평가하기 위한 기존 분석법에서는 잎 표피 껍질, 잎 디스크 또는 분리된 잎을 박테리아 현탁액에 띄운 다음 현미경으로 기공을 관찰한 후 기공 구멍을 수동으로 측정합니다. 그러나 이러한 분석은 번거롭고 식물에 부착된 잎의 자연적인 박테리아 침입에 대한 기공 반응을 반영하지 않을 수 있습니다. 최근에는 잎을 식물에서 떼어내지 않고 꼬집어 기공을 관찰할 수 있는 휴대용 영상 장치와 함께 기기로 촬영한 잎 이미지에서 기공 개구를 자동으로 측정하도록 설계된 딥러닝 기반 이미지 분석 파이프라인이 개발되었습니다. 여기에서 이러한 기술적 진보를 바탕으로 애기장대(Arabidopsis thaliana )의 박테리아 침입에 대한 기공 반응을 평가하는 새로운 방법이 소개되었습니다. 이 방법은 자연 감염 과정을 모방한 Pto 분무 접종, 휴대용 이미징 장치를 사용하여 Pto 접종 식물의 잎에 있는 기공을 직접 관찰하는 방법, 이미지 분석 파이프라인에 의한 기공 개구의 자동 측정의 세 가지 간단한 단계로 구성됩니다. 이 방법은 자연적인 식물-박테리아 상호 작용을 밀접하게 모방하는 조건에서 Pto 침입 중 기공 폐쇄 및 재개를 입증하는 데 성공적으로 사용되었습니다.

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