获得全兔眼的高质量冷冻切片

该协议描述了如何在较大的动物（如兔子）中获得高质量的视网膜冷冻切片。摘除后，将眼睛短暂浸入固定剂中。然后，去除角膜和虹膜，将眼睛放置过夜，以便在4°C下进行额外固定。 固定后，将镜片取下。然后将眼睛放入冷冻模型中，并填充嵌入培养基。通过去除晶状体，嵌入介质可以更好地进入玻璃体，并导致更好的视网膜稳定性。重要的是，眼睛应在包埋培养基中孵育过夜，以使眼睛完全浸润整个玻璃体。孵育过夜后，将眼睛冷冻在干冰上并切片。可以获取整个视网膜切片用于免疫组化。标准染色方案可用于研究视网膜组织内抗原的定位。遵守该协议可产生高质量的视网膜冷冻切片，可用于任何利用免疫组织化学的实验。